@ -хлоралкилили циклоалкилперхлораты,обладающие иммунодепрессивной активностью,и способ их получения

 

1. |Э-Хлоралкилили циклогшкилперхлораты общей формулыi^r•^Н—CH-^2 ! ОСЮз С1где RT - Cj-алкил;R^ - водород или R Лн^-тетраме-тилен,обладающие иммунодепрессивной активностью.2.. Способ получения (J-хлоралкилили циклоалкклперхлоратов общей формулыR-CH-CH-R^^: осюэ С1где R ^ - с ^-алкил fR- - водород или R^+Rj^-TeTpaMe-тилен,отличающийся тем, что, соответствующий олефин подвергают взаимодействию с хлором и перхлора- ' том лития в эфире или зтилацетате , 'при температуре от (-78) до (+10)'*С с последующей обработкой водой.(Лс:00 о со 00

СООЭ СОВЕТСНИХ

1%СОУЬЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H АВТОРСИОМЪ СВИДДГГЕЛЬСТВЪГ

Я вЂ” СН вЂ” сН- К

ОСЛО, С1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР в эюю и (21) 2850063/23-04 (22) 24.09.79 (46) 07.02.84. Бюл. Р 5 (72) И.E.Êîâàëåâ, Е.P.Ðóáöîâà, О.Ю.Полевая, Н.С.Зефиров, В.В.Ждан кин.и А.C.Êîçüìèí (71) Научно-исследовательский институт по биологическим испытаниям химических соединений и Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного

Знамени государственный университет имени Я.В.Ломоносова (53) 547 ° 137(088.8) (56) 1. Г.Н.Дорофенко и др. "Хлорная кислота и ее соединения в органичес« ком синтезе", иэд. РТУ, PocTQB-на-Дону, 1965,с. 43.

2. L Birc kenbach, J,Goubeau.. "О реакции серебряных солей одноосновных кислот с йодом в присутствии циклогексена, Chem.Ber, 65, 1932, р. 1339.

/ 3. H.Е.Ковалев и др. "Введение в иммунофармакологию", нзд. Казанского университета, 1972, с. 53-82. (54 f ф-ХЛОРАЛКИЛ- ИЛИ ЦИКЛОАЛКИЛПЕРХЛОРАГЫ, ОВЛАДИОЩИЕ ИММУНОДЕПРЕССИВ, SUÄÄ 809810

3 5п С 07 С 71 00 А 61 к 31/21

НОй АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ (57) 1. р -Хлоралкил- или циклоалкилперхлораты общей формулы

В -СН вЂ” СН вЂ” R

ОС>0, где 8 - С -алкил;

Rg - водород или Н„ФН -тетраметилен, обладающие иммунодепрессивной активностью.

2.. Способ получения -хлоралкилили циклоалкилперхлоратов общей формулы где R - С -алкил," водород или R +R -тетраме1 тилен, отличающийся тем, что, соответствующий слефин подвергают взаимодействию с хлором н перхлоратом лития в эфире илн этилацетате при температуре от (-78) до (+10) С с последующей обработкой водой.

809810, Изобретение относится к новым органическим f)-хлорперхлоратам, в частности к биологически активным р --хлор-, алкил- или циклоалкилперхяоратам, обладающим иммунодепрессивной активностью, и к способу их получения. 5

Известно, что органические перхлораты находят применение в качестве алкилирующих или ацилирующих средств, а также в качестве окислителей 1). 3Î

Сведения о биологической активности органических ф -хлорперхлоратов в литературе отсутствуют.

В литературе известен способ полу-, чения 2-йод-циклогексилперхлората, заключающийся в,том, что, смесь циклогексана и перхлората серебра обрабатывают йодом. Постулируется (но никак не доказывается), что при этом образуется 2-йадциклогексилперхло- . 20 рат, который не выделяют, а сразу гидролизом превращают в 2-йодцикло гексанол.

Недостатком этого способа является использование в качестве реаген- 25

1та перхлората серебра —. очень взрывоопасного и труднодоступного соединения. Кроме того, сам целевой продукт не выделен и не охарактеризован, поэтому .можно считать, что образование 30 его не подтверждено (2 1.

В качестве известного препарата, обладающего иммунодепрессивной активностью, используют. циклофосфан, для которого доза эффективного дей ствия близка к токсичной (3 3.

Целью изобретения является расширение ассортимента органических перхлоратов,. обладающих иммунодепрессивной активностью, и способ их получеПредлагаются Р -хларалкил- или 40 циклоалкилперхлораты общей формулы

R- ск сн — 3,,/С, 2

ОС1О, С

R Сс алкил

1

В - вбдород или Н +R -тетраме1 2 ,тилен.

Способ получения р --хлоралкил- илн циклогексилперхлоратов состоит в том, что гептен или циклогексен подвергают взаимодействию с хлором и перхлоратом лития в инертном органичесRoM растворителе - эфире или этилацетате при температуре от (-78) до (+10) С с последующей обработкой во- 55 дой. Реакция протекает по схеме:

Rcn=cm вар — сн-ь, С12

z ZiC10i, ОС 10 С1 60

Согласно предлагаемому способу через раствор олефина и избытка перхлората лития в инертном растворителе пропускают сухой хлор до появления устойчивой желтой окраски. Пред- g5 почтительно применять 10-30-кратный избыток перхларата лития. Во время пропускания хлора реакционную смесь поддерживают при температуре бт (-78) до (+10) С. Растворитель должен быть инертным по отношению к исходным реагентам н продукту реакции, поэтому применяют полярный иенуклеофильный органический растворитель, такой, как эфир или этилацетат. Эти условия проведения реакции наиболее оптимальны с точки зрения выхода и степени чистоты целевого продукта. По окончании реакции смесь промывают небольшим количеством воды для удаления избытка перхлората лития, органический слой сушат хлористым кальцием н растворитель упаривают в вакууме. Остаток подвергают хроматографическому разделению на колонке с силикагелем. Выход целевых р-хлоралкил(циклоалкил)-перхлоратов составляет 55-70%. В случае 2-хлорциклогексилперхлората были выделены цис- и транс-изомеры. Полученные вещества представляют собой бесцветные маслоабразные жидкости, индивидуальные но данным тонкослойной хроматографии. По сравнению с другими иэвестиыми перхлоратами эти вещества устойчивы при хранении в чистом виде при комнатной температуре в течение нескольких дней а при температуре от (-5) до (-7) С - в течение нескольких дней. Однако при нагревании выше 120ОС эти соединения взрываются. Это свойство затрудняет проведение элементного анализа соединений.

Поэтому строение всех полученных веществ подтверждено данными ИК- и

ПМР-спектроскопии; Ковалентный характер связи между углеводородным радикалом и перхлоратной группой подтверждается растворимостью полученных органических р -хлорперхпоратов в неполярных органических растворителях, а также величиной химического сдвига Ы-протона по отношению к группе ОС10

Пример 1. Через раствор

392 мг (4 ммаль) гептена-1 и 1,07 г (10 ммоль) перхлората лития в 2 мл абсолютного эфира при охлаждении до

-78 С пропускают сухой хлор до появления устойчивой желтай окраски.Раствор промывают небольшим количеством воды,.сушат хлористым кальцием и после упаринания растворителя остаток подвергают хроматографированию на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента пентан. Выделяют фракцию с Rg 0,57, которая представляет собой после упаривания пентана) индивидуальный по данным тонкослойной хроматографии 1-хлор-метилгексилперхлорат в виде маслообразной жидкости, раздагающейся при нагревании до 120 С. Выход 650 мг (70%).

809810

1,0

То же

231 16

462 12

0,9

0i6

2-Хлорциклогекснлперхпорат

То же

300

24

0,5

0,5

600

ОФЗ

Подсолнечное масло (контроль ) 18

Циклофосфан 150

Не характерно 0,46

ПИР-спектр (СС1, Ф, м.д.):

5,07 (1Н, м, CHOC10 ), 3,85 (2Н> д, СНС1) и 2,30-0,80 (11Й,м, протоны сбн ).

Пример 2. В условиях примера 1 при проведении реакции в этил- 5 ацетате при температуре от 0 до 10 С и при использовании 2,14 г (20 ммоль) перхлората лития получают 480 мг (50%) 1-хлорметилгексилперхлората.

Пример 3. Через раствор 10

205 мл (2,5 юдоль) циклогексена и

1,07 r (10.ммоль) перхлората.лития в 2 мл абсолютного эфира при охлаждении до -. 78 С пропускают сухой хлор до появления устойчивой. желтой окраски. Раствор прозывают водой (5 мп), сушат хлористым кальцием, растворитель упаривают. Остаток хроматографируит на колонке : с силикагелем (элюент - смесь этилацетата и гексаиа, 1:4). Выделяют фракцию, имеющую R 0,55. Упариванием растворителя из этой фракции в вакууме получают 275 мг (51%) транс-2-хлорциклогексилперхлората, представляющего

:собой маслообразную жидкость, разлагающуюся при нагревании выше 150 С.

ПИР-спектр (СС1 о, м.д.): 4,95 (1Н, м, СНОС10 ф, 4,05 (1Н, м, СНС1) и 2,9-1,1 {8Н, м, остальные протоны цикла).

Иэ другой фракции, имеющей н 0,43, после упарнвання растворителя выделяют 85 мп (17%) цис-2-хлорциклогексилперхлората з виде бесцветного масла, разлагающегося при нагревании вьйае 140вС.

ПИР-спектр { СС1, Ф,м.д. ) г 5,23 (м, 1Н CHOC10> ), 4,37 (м, 1Н, CHC1) и 2,8-1,3 (8И, м, остальные протоны цикла). 40

Пример 4. В условиях примера 3, используя 3,2 r (30 ммоль| перхлората лития, в качестве растворителя этилацетата вместо эфира и пропуская хлор при температуре оТ 0 до 45

5 С, получают 220 мг (40,5%) транс-2-хлорциклогексилперхлората и 70 мг (13%) цис-2-хлорциклогексилперхлората.

Иммунотропную активность предлага"50 емых соединений определяют по их способности влиять на антителообразованне (титры антител з сыворотке крови) и количество антиген-связывающих и розеткообразующих клеток (РОК) в селезенках ьыаей, иммунизированных эритроцитами баоабана (эталонный тестантиген). Эксперименты проводят на белых мааах весом 18-20 г. Животных иммунизируют внутрнбрюшинным введением 0,2 мп 10%-ной взвеси эритроци- 6О тов барана . (5-10 " клеток на.ьыаь).

На седьмой день животных забивают и от каждой мыаи в отдельную пробирку собирают кровь. Пробирки помещают в термостат на 45 мин (37 С), а 65

4 затем в холодильник на 1 ч (4 С) .

После центрифугирозания сыворотку, свободную от клеточных элементов, переносят в отдельные пробирки и затем в микротитраторе Такачи определяют титры антител общепринятым методом. Одновременно из животных из« влекают селезенки и готовят суспенэии селеэеночных клеток, в которых стандартным способом выявляют клетки, связывающие эритроциты барана и

Формирующие розетки, т.е. розеткообразующие кдетки.

Результаты экспериментов. по опре делению количества Р0К обрабатывают статистически. Титры антител выража-. ют в виде супрессивных индексов, которые получают делением средней величины log< титров антител в опыте на среднюю величину 1о 2 титров антител в контроле.

Испытуемые вещество вводят в течение грех дней перед иммунизацией в виде раствора в стерильном подсолнечном масле. Каждое вещество было исследовано в трех дозах, введенных з объемах 0,1, 0,2 и 0,4 мл масла на мыаь. Инвекцию антигена проводят через 24 ч после введения испытуемого . вещества. Экспериментальные данные по исследованию иимунотропного дей ствия испытанных органических р -перхлоратов приведены в таблице.

Средние величины числа РОК.10 и супрессивные индексы при исследовании иммунотропного действия я-хлоралкнл(циклоалкил)-перхлоратов

1-Хлорметилгексилперслорат 115 15

Результаты экспериментов .свидетельствуют о том, что 1-хлорметилгек809810

Составитель

Редактор 3.Бородкина Техред Ж.Кастелевич Корректор В".Бутяга

-ь .ь

Заказ 1P95/4 Тираж 410 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", r.Ужгород, ул.Проектная, 4 силперхлорат оказывает слабое иммунодепрессивное действие у мышей: зто соединение незначительно снижает титры антител (СИ 0,8) и умень-. шает количество POK. Второе из изученных веществ - 2-хлорциклогексилперхлорат обладает более выраженной иммунодепрессивной активностью: например, в дозе 600 мг/кг почти в

2 раза снижается число РОК,а СИ 0,3.

По сравнению с известным иммунодепресаантом-циклоФосфаном предлагаемые вещества обладают более низкой токсичностью: каждое иэ них не выэываЬт гибели,миней в дозах

5 1000 мг/мг при внутрибрюшинном введении, в то время как для циклофосФана LOy составляет 500 мг/кг, а доза зФфективного действия его близка к токсичной.