Модифицированный кремнезем в качествесорбента для лигандообменной xpo-матографии

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТИЛЬСТВУ

Союз Советскик

Социапистическик

Республик (11) 833975

Ф (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено03.07, 79, (21) 2805291/23-04 с присоединением заявки Йо (23) Приоритет (51)М. Кл 3

С 07 F 7/18

О 01 Ы 31/08

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий

Опубликовано300581, Бюллетень йо20 (53) УДК 47. 245 (088. 8) Дата опубликования описания 300 " 81 (72) Авторы изобретения

A.Ñ.Üî÷êoâ, Ю.П.Белов и В.A.Äàâàíêîâ

РЛYB Т ;.- 1

1 !

1 !

Ордена Ленина институт элементоорганически1с соединений AH СССР

i (71) Заявитель (54) МОДИФИЦИРОВАННЫЙ КРЕМНЕЗЕМ В КАЧЕСТВЕ

COPBEHTA ДЛЯ ЛИГАНДООБМЕННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

НО (1)

Оон — Снг- Нг

-C5-Сне() снг — М но (I I) 25

Изобретение относится к химии кремнийорганических соединений, а именно, к модифицированному кремнезему, содержащему на поверхности группу формулы, 1 в качестве сорбента для лигандообмен- 10 ной хроматографии.

Данный сорбент можно испольэовать для разделения и анализа оптических ивомеров аминокислот.

Известна L-пролиновая смола, приме- 15 няемая в качестве сорбента для лигандообменной хроматографии (1).

Наиболее близким к описываемому сорбенту, является полистирольная макросетчатая смола, содержащая íà 2() поверхности группу Формулы применяемая в качестве сорбента для лигандообменной хорматографии (21 . 30

Недостатком этого сорбента является набухание гранул полистирола, что часто приводит к закупориванию хроматографической колонки, в связи-с чем снижается эффективность разделения.

Цель изббретения повышение эффективности сорбентов для лигандообменной хроматографии °

Поставленная цель достигается новым модифицированным кремнеземом, со- держащим на поверхности группу формулы (1), который может быть использован в качестве сорбента для лигандообменной хроматографии.

Модифицированный кремнезем, содержащий на поверхности группу формулы (1) ввиду жесткости матрицы не набухает и позволяет. использовать хроматографические колонки с высокой эффективностью, что особенно важно в условиях лигандообменной хроматографии, когда одной селективности недостаточно для разделения например оптических изомеров валина и изолейцииа.

Эффективность разделения при использовании в качестве сорбента модифицированного кремнезема, содержащего на поверхности группы формулы (1), почти B 50 раз лучше, а селективность

833975 ным холодильником до конца выделения хлористого водорода. Реакционную смесь упаривают, отфильтровывают и через сорбент (смолу) при периодическом встряхивании в течении 72 ч пропускают влажный воздух. Полученный продукт промывают толуолом, метанолом, водой и высушивают. К сухому сорбенту добавляют 0,15 r. йодистого натрия, 2 r метилового эфира оксипролина, 10 мл метанола н смесь встряхивают

10 ч при 500С. Сорбент отфильтровывают, промывают метанолом, водой, 0,5н. соляной кислотой, водой, затем заливают концентрированным раствором сернокнслой меди в буферном растворе и

СН СООН вЂ” NH

Процесс проводят по следующей схеме — 81- оК -01 $1C5gQH

/ ,а — -si о-й-ск,ск, сн,йю ко

I t ! ой 4

Э Си СЦ СЯ СНСОМЩЦОН

I 1

ООСИ

- -8(-Π— и Жу СНз(СЕ М C00H

Элементный состав полученного соединения составлял 8% углерода и 0,9Ф азота, поверхностнаи плотность привитых групп 3,2 мкм/м и емкость по ме35 ди 0 5 мг-экв.

В ходе получения ИК -спектров -бы. ли зарегистрированы следующие характеристические частоты, подтверждающие строение полученного соединения: 40

1740 см1-эфирная форма карбоксипьной групгиа; 750 см соответствует фенильной группировке в цеци.

Пример 2. Получение сорбента проводят в тех же условиях, что и в 45 примере 1, только используют макропористый силикагель с удельной поверхностью 50 м /г (определено по сорбции

1 азота) . В этом случае содержание углерода составляло 4%, содержание азота 5р

0,2В, поверхностная плотность привитйх групп -. 1 .мкМ/м емкость по меди

0,04 мг-экв.

Пример 3. Использований сорбента для разделения оптических изомеров пролина. Разделение проводят в 55 колонке длиной 150 вм и внутренним диаметром 3 мм, 1окрытой, внутри эмалью. Фракция силикагеля 5 мкм.Расход элюента — раствора ацутата натрия (0-,5M) и ацетата меди (10 М), рН 7 60 равен: 1 мл/мин. Детектор - Uvicord на 10-403 вьые, чем у известных ана- . логов., Способ получения модифицированного кремнезема, содержащего на поверхности группу формулы (1), заключается в том, что кремнезем, модифицированный -хлорметилфенилэтилтрихлорсиланом,подвергают вхаимодействию с эфиром оксипролина с последующим гидролизом полученного продукта при рН среды 4-6,5.

Пример 1.ПОлучение сорбента !О для лигандообменной хроматографии.

Для синтеза диссиметрического сорбента используют микропористый силика. гель с удельной поверхностью 400 м /г (определено по сорбции азота). 15

К 5 г микропористого силикагеля фракции 10 мкм, предварительно высуШенного при 150-2500С в вакууме, добавляют 15.мл абсолютного толуола, в котором растворяют 5 rP-хпорметил- 20 фенилтрихлорсилан и кипятят с обрат111 с удаленньМ светофильтром и объемом кюветы 15 мкл. Эффективность колонки 7100 теоретических тарелок при селективности 1,9.

Пример 4. В тех же условиях, что и в примере 3 близкие результаты были получены для смеси оптических иэомеров валина.

Пример 5. В i ех же условиях, что и в примере 3 были получены для нзолейцина. Результаты испытаний представлены в таблице.

Пример б,. Регенерация отработанного носителя.

Сорбент промывают метанолом водой ю I ,5 н..соляной кислотой, снова водой и заливают концентрированным раство- ром сернокислой меди в буферном растворе СН СООН вЂ” NH40H при рН 8 и выдерживают при встряхивании до интенсивно синего окрашивания, после чего

его отфильтровывают, промывают 0,2 н.

NH OH и окончательно водой.

Практические испытания сорбента показали, что с его помощью можно разделять оптические изомеры широко" го круга аминокислот.

В таблице приведена эффективность и селективность разделения на предлагаемых сорбентах оптических изомеров

DZ-валина и 03-изолейцнна.

833975 а ффвфЦ, 15

1 7

1,б .

0,02

Формула изобретения

Составитель Р.Иванчикова

Редактор Е.Киннв Техред И.Aeranaa Корректор Г.Решетник

Заказ 3994/40 Тираж 397 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. ужгород, ул. Проектная, 4

- CI4-©4: .. 0,03,Модифицированный кремнезем,содержащий на поверхности группу форму25

I в качестве сорбента для лигандообменной хроматографии.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Семечкин A.Â. Некоторые закономерности лигандообменной.хроматографии рацематов, канд. дисс. N., ?975.

2. Биоорганическая химия, 1978, 4, Ь 9, с. 1164.