Способ выделения биологически активных веществ из прополиса

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

pi>884703 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 03. 10. 79 (21) 2824951/28-13 с присоединением заявки Но (я)м. кл.з

A 61 K 35/64

Государствениый комитет

СССР по делам изобретеиий и открытий (23) Приоритет (53) УДК 638.178 (088.8) Опубликовано 301181. Бюллетень N9 44

Дата опубликования описания 30. 11. 81

ДДЦ.» т .Г ° ,... /

Специальное конструкторское бюро химизации Всесоюзного государственного хозрасчетного объединения по производству товаров бытовой химии (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ-AKTHBHEIX

ВЕЩЕСТВ ИЗ ПРОПОЛИСА

Изобретение относится к технологии получения биологически активных веществ для косметических препаратов. из прополиса путем экстракции. . Известен способ получения биологически активных веществ из прополиса экстрагированием со смесью этилового спирта и воды с последующей фильтрацией (1 .

Однако этот способ не,обеспечивает полного выделения флавоноидов, что связано с выбором растворителей (спирт, вода).

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ выделения биологически-активных веществ из прополиса путем экстракции смесью этилового спирта и воды 32).

Недостаток известного способа - неполное отделение биологическиактивных веществ, так как применение в качестве растворителей только этилового спирта и воды не обеспечивает выделения широкой гаммы биологически активных составных частей прополиса, кроме этого этот способ.не обеспечивает полного отделения механических примесей и естественных загрязнений.

Цель изобретения - более полное выделение биологически — активных веществ из прополиса.

Поставленная цель достигается тем, что в смесь этилового спирта и воды добавляют глицерин, обеспечивая соотношение в смеси этиловогО спирта, глиперина и воды 75-85, 5-10 и 10-.

15 вес.Ъ соответственно, а соотношение прополис: зкстрагент — 1:5, экстракцию ведут при 35-45 С с последующим охлаждением до (-5) (-8 )oC, а остаток после экстракции обрабатывают норковым маслом при

75-85 С и соотношении остаток: норковое масло — 1:2.

Способ осуществляется следующим образом.

Натуральный прополис охлаждают

2О до температуры не ниже -10oC,çàòåì измельчают до величины гранул 2-4 см.

Измельченный прополис и растворитель — глицерин и этиловый спиртзагружают в реактор и при перемешивании нагревают до 40 f 5 C При этой температуре проводят экстракцию прополиса в течение 4 ч.

Потом экстрагируемую смесь охлаждают холодной водой до 20 + 5 C и пере

ЗО сасывают в другой реактор. При пере884703 мешивании охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5)-(-8 ) С.

Охлажденную смесь фильтруют на нутчфильтре при вакууме 0,06 и 0,01 MIla (0,6 «+ О, 1 кгс/см ) .

Экстракцию остатка прополиса норковым маслом проводят при 80 и 5 С в течение 3 ч. Горячую смесь фильтруют при 80 1 5 С нутч-фильтром при вакууме 0,06й0,01 МПа (0,6 i 0,1 кгс/см ).

Горячий фильтрат - масляный экстракт прополиса выпускают в емкость для хранения.

Для полного выделения биологически активных веществ из прополиса проделана серия опытов с целью подбора растворителей и оптимальных их соотношений, а также для сравнения с известным способом.

Т а б л и ц а 1

Состав растворителя,вес.%

Пример

Выход флавоноидов, вес. %

Глицерин дистиллированный

94%-ный

Этиловый спирт

96%-ный

Вода

82,7

12,0 5,3

70,0

10,0 5,0

85., 0

70,0

15,0

10,0

10,0

5,0

5,0

Vl I

10,0

90,0

69,0

При использовании растворителя, состоящего из этилового спирта и глицерина, выход флавоноидов снижается..

Для определения соотношения про- полис: растворитель проведены опыты, результаты которых даны в табл. 2.

Соотношение прополис:растворитель

) t: 1 3 ) Та блица 2 л

Свойства

1:2 1:3 1:4 1:5 1:6 1:7

Продолжительность процесса, ч

Температура, Ñ

40

40

40

Растворимость в флавоноиде, вес.%

63,0 65,0 68,0 70,0

70,0 70,0

16,0 13,2 10,4 9,,1 ео теля и соответственно снижается концентрация флавоноидов.

Для определения оптимальной температуры наиболее полного выделения восков, бальзамов и смол из водноЦ спирто-глицеринового экстракта,про75,0

90,0

95,0

95,0

Из приведенных испытаний видно, что наиболее .полное выделение флавоноидов (до 70%) достигнуто при растворителе, содержащем, вес.%:

Спирт этиловый 75-85

Вода 10-15

Глицерин 5-10

Концентрация раствора, вес.% 23,9 17,8

Из опытов видно, что оптимальное соотношение прополис : растворитель

1:5, так как при соотношении 1:2, 1:3, 1:4 происходит неполное выделение флавоноидов, а при соотношении

1:6 и 1:7 повышается расход раствори70,0

65,0

67,0

68,0

884703 ведены опыты, результаты которых даны в табл.3.

Т а б л и ц а 3

Из опытов видно,, что. оптимальное соотношение остаток прополиса: норковое масло — 1:2, так как при соотношении 1:1 растворимость бальзамов, восков и смол неполное, а при соотношении 1:3 повышается расход нормального масла и соответственно снижается концентрация восков, бальзамов и смол в экстракте.

Пля. определения оптимальной температуры в процессе экстракции остатка прополиса норковым маслом проведены опыты, результаты которых даны в табл. 5.

Содержание восков, бальзамов, смол в спиртоглице" риновой смеси, вес. %

TioC

+1

-4

-5

5

0,5

Иэ опытов видно, что снижение температуры способствует полному выделению восков, бальзамов, смол в спиртоглицериновую смесь. Уже при

-5ОС выделяются все воска, бальзамы и смолы, а при повышенной температуре еще есть воска, бальзамы и смолы в спиртоглицериновой смеси.

Для определения оптимальных соотношений остаток прополиса:норковое масло проведены опыты, результаты которых даны в табл.4.

Таблица 4

T oC

65 90

70 95

75 100

80 100

Свойства

1:1 1:2 1:3

100

Из .опытов видно, что температура до 80ОС не обеспечивает полную экстракцию восков, бальзамов и смол, поэтому. снижается выход.

Применение же температуры выше 85 С снижает качество продукции.

Вещества, извлекаемые на каждом этапа экстракции, указаны в табл. 6.

80

80, 100 100

15

30 21

Таблица 6

Извлекаемые вещества

Экстрация

Флавоноидная фракция прополиса

Флавоны — хризин,тектохриэин и другие

Флавонолы †. галангин,изальпин рамноцитрин, кемферид

Флавононы — пиноцембрин, пиностробинпроиэводные кверцетина

Ароматические кислоты — кофейная, heруловая, коричная, бензойная кислоты

Ароматические альдегиды — ванилин, изованилин

Водиорастворимые витамины В, С, PP

Восковая часть прополиса: свободные углеводороды 10%, жирные кислоты 15% сложные эфиры, в главном производные церотиновой кислоты 70%; бальзамы маслорастворимый витамин A

1! этап — вод-, но-спиртовоглицериновым растворителем при 40 + 5ОС

I этап — норковым маслом при 80 и 5 С

П родолжительность процесса,ч

Температура,oC

Растворимость баль-. замов,восков,смол,%

Концентрация раствора,%

Соотношение остаток прополиса:норковое масло

Таблица 5

Растворение восков, бальэамов, смол в норковом масле, вес.%

884703

82,7

12,0

Пример 2. Натуральный прополис охлаждают в холодильнике не ниже (-.10) С, затем измельчают на

Пример 1. Натуральный пропо- лис охлаждают в холодильнике не ниже

-10 C," затем измельчают на измельчителе до величины гранул 2-4 см. В чис тый эмалированный реактор с пароводяной рубашкой вместимостью 100 л, снабженный эмалированной якорной мешалкой и термометром, загружают

10 кг измельченного прополиса и растворитель следующего состава . кг вес. % .Этиловый спирт

96%-ный,в/о 41,35

Вода 6,00

Глицерин

94%-ный . 2,65 5,3

ВклЮчают мешалку и обогрев реактора. Нагревают содержимое реактора до

40 + 5 C. При этой температуре проводят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4 ч. Экстрагируемую смесь охлаждают холодной вОдой до 20 + 5 С и пересасывают в другой реактор, снабженный якорной мешалкой и водяной рубашкой. При перемеши-. вании охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5)-(-8) С.Охлажденную смесь фильтруют на нутч-фильтре при вакууме 0,06+ 0,01 МПа (0,6 + 0,1 ксг/см ).

Фильтрат — водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве 53 кг, содержащий 7 кг флавоноидной фракции прополиса или 70% пропОлиса, собирают в емкость для хранения.

Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополиса составляет

3 кг или 30% от взятого прополиса.

В общем объеме раствора фильтрата содержится,вес.Ъ: вода и этиловый спирт 81,8.; глицерин 5,0; флавоноидная фракция 13,2.

В чистый эмалированный реактор с пароводяной. рубашкой вместимостью

25 л, снабженный якорной мешалкой и термометром, загружают 3 кг высушенного остатка прополиса и 6 кг норкового масла. Включают мешалку и обогрев реактора. Содержимое реактора нагревают при перемешйвании при

80 t 5 C в течение 3 ч. Горячую смесь выпускают из реактора и при 80 1 5 oÑ фильтруют на нутч-фильтре при вакууме 0,06+ 0,01 МНа (0,6 + 0,1 ксг/см ), Горячий фильтрат - масляный .экстракт прополиса в количестве

7, 1 кг, содержащий 16% прополиса. или

1,6 кг восковой части прополиса,выпускают в емкость для хранения.

Масляный фильтрат содержит,вес.Ъ: восковую часть прополиса 22,0; норковое масло 78,0 на фильтре остаются механические примеси в количестве

1,4 кг или 14% от взятого прополиса, которые выбрасываются. измельчителе до величины гранул

2.-4 см.

d0

На фильтре остаются механические примеси в количестве 1,4 кг или 14% от взятого прополиса, которые выбраФ сываются.

Пример 3. Натуральный прополис охлажпают в холодильнике не

В чистый эмалированный реактор с паровсдяной рубашкой вместимостью

100 л, снабженный эйалированной якор ной мешалкой и термометром, загружают 10 кг измельченного прополиса и растворитель следующего состава: кг вес.%

Этиловый спирт

96%-ный, в/о 34,0 85,0

Вода 4,0 10,0

Глицерин 2,0 5,0

ВКлючают мешалку и обогрев реактора. Нагревают содержимое реактора

15 до 40+ 5ОС. При этой температуре проводят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4 ч.

Экстрагируемую смесь охлаждают хо-. лодной водой до 20 и 5 С и пересасы20 вают в другой реактор, снабженный якор. ной мешалкой и водяной рубашкой. При перемешивании.охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5) (-8) Ñ. Охлажденную смесь фильт 5 руют на нутч-фильтРе при вакууме

0,06+ 0,01 МПа (О,6Й 0,1 кгс/см ) .

Фильтрат — водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве

42,8 кг,содержащий 6,8 кг флавоноидЗ0 ной фракции прополйса или 68% от взятого прополиса, собирают в емкость .для хранения.

Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополиса составляет 3,2 кг или 32% от взятого прополиса., В общем объеме раствора фильтрата содержится, вес.В: вода и этиловый спирт 79,0; глицерин 5,0; фланоидная фракция прополиса 16,0.

В чистый эмалированный реактор

40 с паровопяной рубашкой вместимостью

25 л, снабженный якорной мешалкой и термометром, загружают 3,2 кг высушенного остатка прополиса и

6,4 кг норкового масла. Включают ме45 шалку и обогрев реактора. Содержимое реактора нагревают, перемешивая при 80 + 5 С в течение 3 ч.

Горячую смесь выпускают из реактора и при 80f5 С фильтруют на нутч50 фильтре при вакууме 0,06 «+ 0,01 МПа (0,6 и 0,1 кгс/см ).

Горячий фильтрат — масляный экстракт прополиса в количестве 7,5 кг содержащий 16% от взятого прополиса или 1,6 кг восковой части прополиса, выпускают в емкость для хранения. . В масляном фильтрате содержится, вес.Ъ: восковая часть прополиса

21,0; норковое масло 79,0..

884703

10 ниже температуры (-10 С), затем измельчают на измельчителе до величины гранул 2-4 см. В чистый эмалированный реактор с пароводяной рубашкой вместимостью 100 л, снабженный эмалированной якорной мешалкой и термометром загружают 30 кг измельченного прополиса и растворитель следующего состава: кг вес.%

Этиловый спирт

96%-ный,в/о 42,50 75,0

Вода . 7,50 15,0

Глицерин

94%-ный 5,00 10,0

Включают мешалку и обогрев реактОра. Нагревают содержимое реактора до

40 + +50С. При этой температуре прово- 5 дят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4 ч. Экстрагируемую смесь охлаждают холодной водой до 20 + 50C и пересасывают в другой реактор, снабженный якорной мешалкой 20 и водяной рубашкой. При перемешивании охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5)-(-8) С. Охлажденную смесь фильтруют на нутч-фильтре при вакууме 0,06 + 0,01 ИПа (0,6 0,1 кгс/см -).

Фильтрат — водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве 61 кг, содержащий 7,0 кг Алавоноидной фракции прополиса или 70% от взятого прополиса, собирают в емкость для хранения.

Способ выделения биологически активных веществ из прополиса путем экстракции смесью этилового спирта и

Воды, отличающийся тем, что, с целью более полного выделения вещества, в смесь этилового спир-. та и воды добавляют глицерин, обеспечивая соотношение в смеси этиловОго спирта, глицерина и воды 75-85, 5-10 и 10-15 вес.% соответственно, а соотношение прополис:экстракт 1:5, экстракцию ведут при 35-45 С c,noñëåдующим охлаждением до (-5) - (-8) С, а остаток после экстракции обрабатывают норковым маслом при 75-85 С и

Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополиса составляет 3 кг 35 или 30% от взятого прополиса.

В общем объеме раствора фнльтрата содержится, вес.%: вода и этиловый спирт 89,5; глицерин 8,0; флавоноидная фракция 11,5.

В чистый эмалированный реактор с 40 пароводяной рубашкой .вместимостью

25 л, снабженный якорной мешалкой .и термометром, загружают 3 кг высушенного остатка. прополиса.и 6 кг норкового масла. 45

Включают мешалку и обогрев реактора. Содержимое реактора нагревают, перемешивая, при 80 + 5 C .в течение

3 ч. Горячую смесь выпускают из реак- р тора и при 80+ 5 С фильтруют на нутч-фильтре при вакууме 0,06 + 0,01 ИПа (0,6 0,1 кгс/см1), Горячий фильтрат - масляный экстракт прополиса в количестве 7,1 кг, содержащий 16% от взятого прополиса или 1,6 кг восковой части прополиса, выпускают в емкость для хранения.

В масляном фильтрате содержится. вес.%: восковая часть прополиса 22,0; 60 норковое масло 72,0.

На фильтре остаются механические примеси в количестве 1,4 кг или 14% от взятого прополнса, которые выбра-, сываются. 65

Использование в качестве растворителя смеси этилового спирта, глицерина и воды позволяет выделить из прополиса более широкий диапазон биологически активных веществ.Для выделения бальзамов, восков, смол применяется норковое масло. Благодаря низкой температуре застывания норковое масло обладает высокой экстрагирующей способностью, что связано с высоким поверхностным натяжением.Поэтому норковое масло является оптимальным экстрагирующим компонентом при экстракции смол, восков и .бальзамов прополиса.

Таким образом, при вышеизложенном разделении прополиса для косметических целей получают, водноспирто-глицериновый экстракт, состоящий иэ флавоноидов и содержащий в своем составе все биологически активные компоненты прополиса, мягкие режимы экстракции которого обеспечивают сохранение биологически активных компонентов флавоноидов, а оптимальное соотношение растворителей обеспечивает ускорение процесса экстракции, полноту извлечения и оптимальную концентрацию флавоноидов в экстракте; в технологии приготовления косметических препаратов предусмотрено введение водно-спиртоглицеринового экстракта в технологический процесс при темпег туре выше

50 OC.

Получают экстракт бальзамов, смол и восков прополиса на норковом масле. Воска прополиса придают крему блеск. В смеси с норковым маслом является полезной добавкой косметических препаратов. В технологии приготовления косметических препаратов предусмотрено введение масляного экстракта, бальзамов, восков и смол в технологический процесс при 80900С. A также получают фракции механических примесей и загрязнений прополиса, которые выбрасываются.

Формула,изобретения

884703

Составитель A. Янсоне

Техред М.Голинка Корректор Н., Стец

Редактор И. Ковальчук

Заказ 10318/6

Тираж 690 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,4 соотношении остаток:норковое масло

1ic °

Источники информации, йрищКЩ во внимание нри экспертизе

1. Научные исследования.и мнения о составе, свойствах прополиса и его применение в терапевтических целях.

Бухарест, "Апимондии", 1975, с. 25

2. "Новые исследования по апитерапии" {Второй Международный симпозиум по апитерапии. Бухарест-,-2.«7 сентября 1976), "Апимондии", бухарест, 1976, с.,155-157 (прототип).