Способ диагностики острого массивного некроза печени
Союз Советски к
Социалистичесиик
Республик
О П И С А Н И Е (п)892302
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6)) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 30.04.80 (21) 2918290/28-13 с присоединением заявки РЙ— (28) Приоритет (5I)M. Кл.
G 01 N 33!48
Гвеударствениый квинтет (53) УДК 616 — 071 (088,8) II0 делам изобретений и открытий
Опубликовано 23.12.81. Бюллетень J% 47
Дата опубликования описания 23.12.81
В. А. Усонис, Л. Г. Коркина, Т. Н. Баглае
Э. М. Коган и Ю. А, Владимиров (72) Авторы изобретения (71) Заявитель
Второй Московский ордена Ленина государс институт им . Н, И. Пирогова едицинский ь„ . 1 (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО
МАССИВНОГО НЕКРОЗА ПЕЧЕНИ
Изобретение относитяя к медицине, а именно к способам диагностики.
Известен способ диагностики острого массивного некроза печени путем исследования крови больного (1).
Однако известный способ диагностики массивного некроза неспецифичен и не может обеспечить раннюю диагностику заболевания, так как аналогичные изменения контролируемых параметров крови могут иметь место
10 при желтухах различной этиологии, заболеваниях, вызывающих изменения свертывающей системы крови.
Цель изобретения — повышение точности диагностики.
Эта цель достигается тем, что исследуют
15 кровь больного, выделяют иэ нее лимфоциты, окрашивают их флуоресцентным красителем хлортетрациклином и по количеству флуоресцирующих клеток диагносцируют заболевание.
Способ осуществляют следующим образом.
Из 1 — 2 мл венозной крови выделяют фракцию лимфоцитов путем центрифугирования в градиенте плотности фиколла-верографина по
2 методу Воуим А., 1968. Полученную суспензию дважды отмывают раствором Хенкса и окончательно ресуспендируют клетки в этой же среде в концентрации 2 — 4 10 на 1 мл.
Жизнеспособность лимфоцитов, определяемая с помощью трипанового синего, составляет
92 — 98%. Суспензию лимфоцитов окрашивают водным раствором XTIJ в течение 3 — 5 мин при 37 С, наносят на стекло каплю суспенэии, накрьвают покровным стеклом и тотчас флуориметрируют. Конечная концентрация красителя не превышает 10 м. Флуоресценцию хлортетрациклина возбуждают светом с длиной волны 380 нм, а интенсивность флуоресценции измеряют при 540 нм. В качестве флуоресцентного микроскопа используют микрофлуориметр типа ЛЮМАМ (СССР).
П р и и е р 1, У больной Е. диагносцирован острый вирусный гепатит. Клинические признаки массивного некроза печени не отмечены, биохимические показатели указьвают только на острый гепатит (соеержание Р-липопротеидов 27%) .
892302
Таблица 1
Способ диагностики
Примечание
ХТЦ (% светящихся клеток) -лнпонротеидов
Норма
27,0
11,3
15,5
1,6
5,4
9,5
6,2
2,0
4,1
15,4.
12,9
3,0 х = 95 + 21
Острый вирусный гепатит
27,0
14,5
35,4
17,8
33,0
31,4
13,6
19,8
69
76
36,0
27,0
12,0
26,8 х =247 т25
53 () p количество лимфоцитов, флуоресцирующих при окрашивании ХТЦ, составляет
69,1%. Через двое суток после обследования этой больной предложенным способом у нее проявляются признаки острого массивного некроза. печени: нарастает интоксикация, резко сокращается печень. Рано начинают интенсивную терапию по схеме лечения острого массивного некроза печени, кома не развивается, больная выздопавливает.
Пример 2. У больного Д. отмечена, тяжелая клиническая картина заболевания. Показатели по ХТЦ в пределах нормы 27%. Произведена рутинная терапия. Больной выздоравливает.
В табл. 1 приведены результаты обследования больных острым вирусным гепатитом, остЗаболевание Фамилини больны
6
8
11
12
Л-ов
Ас-ва
Х-ин
Ил-ин
С-ова
И-ов
Са-ов
К-ина
Б-ов
Ва-ин
Б-ян
В-ова
4 рым массивным некрозом печени н здоровых доноров. У здоровых доноров количество флуоресцнрующих клеток не превышает 27%, при остром вирусном гепатите — не превышает
36%, при остром массивном некроэе — свыше 45%.
В табл. 2 представлены результаты обследования больных различными заболеваниями. Дощ стоверное увеличение количества флуоресцирующих клеток, по сравнению с нормой, не отмечено.
Предлагаемый способ обеспечивает высокую точность диагноза, позволяет выявить заболевание на ранних стадиях и обладает достаточной специфичностью.
892302
Продолжение табл, 1
Заболевание
Фамилии больных
Способ диагностики
Примечание
-липопротеидов ХТЦ (% светяшихся клеток) Острый массивный
45,7
Ф-ан
80,0 нек роз печени
54,0 все больные остОстрый массивный
47,2 некроз печени
69,1
63,5
Е-ев
83,2
М-ров х =67,2+5,7
Таблица 2
Количество обследуемых Количество флуоресцирующих больных клеток, %
Заболевание
5,0
Брюшной тиф
1,8
3,2
Бронхиальная астма
19,1
2,2
2,5
Острый ревматизм
2,0
Инфаркт миокарда
Хронический лимфолейкоз
Ц-ва
Г-ва
К-ов
О-на
Е-ва
13
7
27
1
1
4,9
7,0
16,6
11,0
9,4
12,1
14,8
Сразу после заменного переливания крови — 2%. Через
6 — 7 часов после рым массивным . некрозом печени погибли
892302
Составитель Е. Сусликова
Редактор Н. Лазаренко Техред А.Савка Корректор Г. Orap
Заказ 11241/65 Тираж 910 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5
Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Формула изобретения
Способ диагностики острого массивного некроза печени путем исследования крови больного, отличающийся тем,что, с целью повьппения точности диагностики, из крови выделяют лимфоциты, окрашивают их флуоресцентным красителем хлортетрациклином и по количеству флуоресцирующих клеток диагносцируют заболевание.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Справочник по клиническим биохимичес ким методам исследования. М., "Медицина", 1978, с. 3.