Способ получения носителя для твердофазного синтеза пептидов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советсккх

Соцмалистическнх

Респубики

«i<895987 (6 I ) Дополнительное к ввт. свид-ву (22) Заявлено 28,03,80 (21) 2913550/23-04 с присоединением заявки ¹ (23 } Приоритет

Опубликовано 07.01.82. Бюллетень № 1

Дата опубликования описания 10.01.82 (51)NL. Кл.

С 07 F 7/18

С 07 С 103/52

Государственный комитет во делам изобретений и открытий (53) УДК 547.245..07(088.8) В. H. Постнов, С. И. Кольцов, А. N. Постнова

К. А. Макаров и В. Б. Алесковский (72) Авторы изобретения

Ленинградский ордена Октябрьской Революции

Красного Знамени технологический институт и и Ленинградский ордена Ленина и ордена Труд

Знамени государственный университет им. А. А. (7!) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НОСИТЕЛЯ ДЛЯ ТВЕРДОФАЗНОГО

СИНТЕЗА ПЕПТИДОВ

Изобретение относится к химии кремнийорганических соединений, а именно к способу получения носителя для твердофазного синтеза пептидов.

Данный носитель может быть использован в производстве синтетических пеп5 тидов из аминокислот.

Известен способ получения носителей для твердофазного синтеза пептидов путем нанесения сополимера стиропа с ди10 винилбензолом на поверхность стеклянных гранул (1 ) .

К недостаткам данного способа относится низкая емкость полученного носителя, обусповпенная малой величиной

его удельной поверхности.

Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ попучения носителя дпя твердофаэного синтеза пептидов путем обработки поверхности стеклянных шариков р-бромметилфенилтрихпорсиланом в среде этанола

2 при 60 С и последующим гидролизом полученного продукта (2 ) .

Недостатком указанного способа является низкое содержание галогенметильных (якорных) групп на поверхности носителя, в связи с этим низкая емкость ммслЬ по первой аминокислоте, равная 0,04 что обусловлено низкой реакционной способностью П -бромметип-фенилтрихлорсилана, а также низким содержанием и активностью поверхностных силанопьных групп, ?цепь изобретения - повышение поверх постной активности носителей для пептидного синтеза.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу попучения носителя для твердофазного синтеза пептидов путем обработки силикагепя Р-фенилэтиптрихлорсипаном в среде органического растворителя при нагревании до тем«

4 пературы 60-80 С с последующим гидролизом подученного продукта и дальнейшей обработкой продукта гидропиэа метил3 89598 хлорметиловым эфиром в присутствии катализатора четыреххлористого олова.

Предпочтительно вести обработку силикагеля P фенилэтилтрихлорсиланом в присутствии триэтиламина, 5

Введение триэтиламина позволило увеличить содержание привитых групп, вследствие активирующего действия íà 5»-ОН группу посредством образования поверхностных комплексов .!о бензопьным раствором -фени пэти птрих порсипана при 80 С 3 ч. Непрореагировавший реагент удапяют с образца сухим хлороформом. После чего обрааец гидропизуют горячей водой, а затем сушат под вакуумом 46 ч при 130 С. Хпорметипирование проводят в среде метилхлорметилового эфира в присутствии катализатора четыреххлористого олова при 60 С 2 ч. После окончания реакции образец помещают в сокслет с диоксаном, куда подается сухой хлористый водород. После удаления четыреххлористого олова образец отмывают от хлористого водорода диоксаном и сушат о под вакуумом 4-5 ч при 130 С. Продукт содержит 0,40 ммоль/г «5» -(СН2)О -CH>C| групп. Полученный носитель испытывается в процессе синтеза дипептида глицил- -аланина, который проводится по стандартной методике

Меррифильда.

Пример 2. Условия проведения поверхностных реакций аналогичны описанным в примере 1, но на стадии обработки силикагеля Р -фенилэтилтрихлорсиланом добавляли триэтиламин в количестве 0,46 мл на 10 г образца. Полученный носитель содержал 0,70 ммоль/г

0,70

Носитель на основе стекла, полученный по известному способу

0,08 облегчающих реакцию электрофильного замещения.

Предлагаемый способ позволяет получить носитель с более высоким содержанием привитых галогенметильных (якор-И ных) групп, что способствует увеличению количества пептида, полученного на носиг теле, т. е. для синтеза одного и того же количества пептида необходимо взять в 8 раз меньше носителя, чем при исполь-39 зовании носителя, полученного известным способом.

Пример 1, 20 г силикаегля, очищенного от ионов железа, сушат 2 ч в гоке сухого инертного газа или воздуха при 180 С, а затем обрабатывают 10%-ным

Предлагаемый носитель на основе крупнопористого силикагеля

Формула изобретения

1. Способ получения носителя для твердофазного синтеза пептидов путем обработки силикатной основы кремнийорганическим соединением в среде органического растворителя при нагревании, gg -(СН )2 g .СН С8 групп. Емкость по первой аминокислоте составила 0,35 ммоль/г.

В таблице представлены сравнительные характеристики носителей по привитым функциональным группам. с последующим гидролизом образующегося продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения поверхностной активности носителя, в качестве силикатной основы используют силикагель и в качестве кремнийорганического соединения - (3 -«фенилэтилтрихлорсилан

Источники информатики, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент ФРГ ¹ 2047413, кл. С 07 С 103/52, 1972.

2.Pa r Фидр. S.A,neu ВОЮ Suppcvt.

Вг роЬРЕРОдЕ 6Зи1ЪЕЫв.- Yekrahed-. ов ett",)973,¹28,ñ.2633 (щ ототмп) 5 895987 и продукт гндролиза обрабатывают метилхлорметиловым эфиром в присутствии катализатора — четыреххлорис того олова, 2, Способ по п, 1, о т л и ч а юш и и с я тем, что обработку силикагеля Р -фенилэтилтрихлорсиланом ведут в присутствии триэтиламина, 1

Составитель Р, Иванчикова

Редактор В. Бобков Техред Т. Маточка Корректор О, Билак

11619/6 Тираж 389 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4