Способ дифференциальной диагностики ишемического и геморрагического инсульта

 

и 944547

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскик

Социалистических

Республик (6l ) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 11.11. 80 (21) 3223146/28-13 (51)M. Кл. с присоединением заявки М

А 61 В 10/00

G 01 И 33/48

3ЬвударетванныН кюивтет

СССР. ю авлаи взавретеник я еткрытяй (23 ) П рноритет

Опубликовано 23.07.82. Бюллетень М27

Дата опубликования описания 23.07.82 (53) УД К ь 616. 07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Э.Е. Мхеян,, Ю.С. Тунян, С.Э.Акопов и Г.О. Бакунц.

1 !

1 (Т

Ереванский государственный медицинский и

Й мат.: (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ

ИШЕМИ4ЕСКОГО И ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА

Изобретение относится к -медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики ишемического и геморрагического инсульта.

Известен способ дифференциальной диагностики ишемического и геморрагического инсульта путем исследования форменных элементов крови { 1) .

Однако известный способ не обеспечивает достаточной точности диагностики.

Целью изобретения является повышение точности диагностики.

Укаэанная цель достигается тем, что согласно способу дифференциальной диагностики ишемического и геморрагического инсульта исследуют способность эритроцитов поглощать анионныи краситель l-анилинонафталин-8- ., 2о

-сульФонат, и по величинам констант поглощения, равным при температурах

17, 30 и 40 С соответственно 0,08, 0,09 и 0,28, диагностируют геморра" гический инсульт, а по величинам констант соответственно 0,02, 0,03 и

0,04 диагностируют ишемический инсульт °

Способ, осуществляют следующим образом.

Берут кровь для исследования 10 мл из локтевой вены и стабилизируют

3,8Ж-ным цитратом натрия в отношении 9: 1. Эритроциты трижды отмывают в изотоническом трис-НС1 буфере (рН 6,9). После этого эритроциты инкубируют в том же буфере 30 мин о при 37 С, а затем вновь троекратно отмывают. Плотноотцентрифугированные эритроциты разводят тем же буфером до концентрации 10 клеток на

1 мкл. Необходимо строго контролировать концентрацию эритроцитов в суспензии, допустимы колебания не более %..0,53.

3 94

Для дальнейшего исследования готовят 3 ряда пробирок, по 5 пробирок в каждом ряду, нумерованные от

1 до 5. В каждую. пробирку наливают по ?,3 мл ранее приготовленной эритроцитарной суспензии. Первый ряд пробирок инкубируют при 17 С, второй - при 30 C и третий - при о

40 С. После того как эритроцитарная суспензия приобретает соответствующуюю температуру, в каждую пробирку быстро добавляют 0,2 мл раствора АНС в изотоническом трис-НС1 буфере (рН 6,91 до конечной концентрации 2 10 моль. Пробирки У 1 каждого ряда центрифугируют при

3000 об/мин сразу после заполнения и отбирают 0,5 мл надосадочной жидкости для последующего анализа. Для пробирск У 2 каждого ряда аналогичную ofl рацию выполняют после 5 мин инкуб;,ции, Ю 3 - после 12 мин, и 1 после 20 мин и V 5 - после 90 мин инкубации. Необходимо .инкубацию всех трех рядов пробирок производить одновременно и строго следить за температурным режимом " допустимы колебания температур не более 4-0,2 С.

К отобранным 0,5 мл супернатанта иэ каждой пробирки добавляют 0,05 мл раствора тритона Х-100 до конечной концен1рации О,li, Пробы инкубиру-. ют 15 мин 37 С, после чего флуориметрируют на спектрофлуориметре при длине волны возбуждения 370 нм и длине волны флуоресценции 465 нм.

Интенсивность флуоресценции оценивается в относительных единицах.

Результаты измерения используют" ся для расчета константы поглощения

АНС, причем интенсивность флуоресценции проб иэ пробирок.Ю 1 каждого ряда обозначают как G пробирок

Ю 5 — Г0о, а пробирок " .2 - 4 соответственно как (1g G, 6 . Константу поглощения (К ) рассчитывают по формуле G o — G op еи

6 — G oo

K--- -"" ----1

У

\где вместо G u t последовательно подет а вляют cR соответ ствующие данные для пробирок V 2 - 4. Таким об" разом, для каждого ряда, т.е. для каждой температуры инкубации, . получают по три значения К, из которых рассчитывают среднюю величину. Полученные в итоге три значения К для каждой «мпературы инкубации позво"

4547 ляют судить о характере инсульта (см.таблицу).

Данные о величинах констант поглощения АНС эритроцитами больных с геморрагическим и ишемическим инсультом приведены в таблице.

Как видно из таблицы, у больных с геморрагическим инсультом величина константы поглощения в 2-2,5 ра1о эа больше, чем у больных с ишемическим инсультом. При этом, если у больных с геморрагическим инсуль- @ том константы поглощения при 17 С и 30оС равны, а константа при 40 С резко повышена, то у больных с ишемическим инсультом, наоборот, равны константы при 40 С и 30 С, а коно. станта при 17 С резко снижена. Как видно иэ таблицы, величина константы щ поглощения, и ее изменения в зависимости от температуры, резко различны у больных с геморрагическим и ишемическим инсультом, что позволяет проводить адекватную дифференциальную диагностику.

П р и.м е р 1. Больной Il.Â. 70 лет, поступил в отделение острых нарушений мозгового кровообращения в бессознательном состоянии. Константы поглощения АНС: 170C - 0,09 1, 30 С0,087, 400C - 0,245.

Заключение: высокие значения констант поглощения АНС и резкое повышение значения константы в области высоких температур, при равенстве значений констант поглощения при 17 и 30 указывает на геморрагический характер процесса.

Диагноз: атеросклероз. Артериальная гипертензия. Острое нарушение мозгового кровообращения по типу геморрагического инсульта в бассейне левой среднемозговой артерии. Отек мозга. Патологоанатомический диагноз: диффузный атеросклероз, паренхиматозносубарахноидальное кровоизлияние в области левой среднемозговой артерии. Отек мозга.

Пример 2. Больная Б,Р., 75 лет, поступила в отделение острым В нарушений мозгового кровообращения. о

Константы поглощения AHC: 17 С0,0169, 30 С - 0,0356, 40 С - 0,0341.

Заключение: низкие значения констант поглощения и резкое пониже 5 ние константы при 17 С при равенсто ве констант при 30 С и 40 С указывает на ишемический характер процесса.

47 шение константы при 40 С при равенстве констант поглощения при 17

О и 30 С указывает на геморрагический характер процесса.

Диагноз: атеросклероз. Острое нарушение моз гового кровообращения по типу ишемического инсульта в бассейне левой среднемозговой артерии с размягчением. Отек мозга. Сахарный диабет. Патологоанатомический диагноз: общий атеросклероз, атеросклероз сосудов мозга. Общирный очаг ишемии в левой гемисфере с частичным охватом левого таламуса. е

Пример 3. Больная A.E.

56 лет, поступила в отделение острых нарушений мозгового кровообращения.

Константы поглощения АНС. и

17 С 0,088

30 С 0,083

40 С 0,26

Заключение: высокие значения констант поглощения ЛНС и резкое повы- 1в

9445

Диагноз: атеросклероз. АртериальI ная гипертензия. Острое нарушениь мозгового кровообращения Ilo типу гемисфере. Отек мозга. Патологьанатомический диагноз: обширная гематома в кий диагноз: обширная гематома в правой гемисфере.

Ожидаемый эффект от внедрения предложенного способа заключается в том, что он позволит с большей вероятностью проводить дифференциальную диагностику ишемического и геморрагического инсульта.

J о

Температура инкубации, С

Группы больных

40

Больные с геморрагическим инсультом . n=29

0,0891 0,0021

0,281

+0,0083

О, 085

+0,00! 3

Больные с ишемическим инО, 0372

+0,0011

О, 0162.

+0,0007

0,0339 й0,0005 сультом п=39

0,0725

+O 0018

0,085

+ 0,0008

0,0427

Т0,00155

Здоровые лица и--31

Il р и м е ч а н и е. Различие между группами здоровых лиц и больных с инсультом, а такие между больными с геморрагическим и ишемическим инсультами достоверны (Р< 0,05).

Формула изобретения поглощения„равным при 17, 30 и 40 С соответственно 0,08; 0,09 и 0,28, Способ дифференциальной диагнос- диагностируют геморрагический инсульт тики ишемического и геморрагического а по величинам констант соответстинсульта путем исследования формен- венно 0,02, 0,03 и 0,04 диагностируных элементов крови, о т л и ч а ю50 ют ишемический инсульт. шийся тем, что, с целью повыше- Источники информации, ния точности способа, исследуют принятые во внимание при экспертизе способность эритроцитов поглощать 1. Сосудистые заболевания голованионный краситель 1-анилинонафталин- ного мозга. Под ред. E.В.Юмидта.

-8-сульфонат, и по величинам констант й., "Медицина", 1974.

ВНИИПИ Заказ 5183/2 . Тираж. 714 Подписное филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул..Проектная, 4