Способ диагностики скрытых форм сахарного диабета

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

М (61) Дополнительное к авт, саид-ву (22) 3аявлено 09.1080 (21) 3217435/28-13 ($11М. Кл.з

A 61 В 10/00

G 0l N 33/48 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет

Государственный комитет

С.СС P по делам изобретений н открытий (53) УДК 616-07 (088. 8) Опубликовано 150982. Бюллетень №34

Дата опубликования описания 150982 (72) Авторы изобретения

Матулявичюс, A.Ï. ян (71) Заявитель

Каунасский филиал Институт эндокринологии и химии (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СКРЫТЫХ ФОРМ САХАРНОГО

ДИАБЕТА

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и касается диагностики скрытьк форм сахарного диабета.

Известен способ диагностики.скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации имкунореактивного инсулина в элементах крови (1). (О

Однако известный способ недостаточно точен, так как, например, у больных диабетом с ожирением наблюдается повышенный уровень имкуно-реактивного инсулина в плазме, и их результаты нельзя сравнить с резуль- 15 татами людей, имеющих нормальный вес, Цель изобретения - повышение точ-. ности диагностики скрытых форм сахарного диабета. указанная цель достигается тем, что в способе диагностики скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации нмкунореактивного инсулина в элементах крови, отличи- 25 тельной особенностью является то, что нммунореактивный инсулин определяют в э итроцитах, и по увеличению

его концентрации, по сравнению с нормой, диагностируют заболевание. 30

Способ осуществляется следующим образом.

В гепаринизированные пробирки забирают кровь 1 ч после 75 г пероральной нагрузки глюкозой. Эритроциты для определения иммунореактивного инсулина подготавливают следующим образом: после отсасывания плазмы. и лейкоцитов добавляют в массу эритроцитов 1/1 0,9% раствор хлористого натрия, тщательно перемешивают и центрифугируют 5 мин по 3000 об/мин.

Потом отсасывают надосадочную жидкость и разливают эритроциты в пластмассовые пробирки. ТаК подготовленные эритроциты могут хранить в холодильнике при -20 С до определения иммунореактивного инсулина. Отогревание проводят при комнатной температуре. Инсулин в эритроцитах определяют радиоиьмунологическим методом двойных антител, используя реагенты фирмы CIS SEA-SORlN (Франция) .

Результаты исследования представлены s табл.1.

В зритроцитах 31 пациента без нарушения толерантности глюкозы обнаружено 36,0+4,5 микроединицы инкунореактивного инсулина на 1 мл. Из

957864

13. пациентов с нарушением толерантности глюкозы у шести уровень иммунореактинного инсулина в эритроцитах был в пределах нормы, а у семи пациентов этой группы был статйстически достоверно выше, чем у предыдущих 5 групп, хотя уровень глюкозы н крови этих пациентов не отличался от уровня глюкозы пациентов с нарушением толерантности глюкозы, по нормальным уровням иммунореактинного инсулина 10 в эритроцитах.

Таким образом, среди пациентов с нарушением толерантности глюкозы, которые по уровню глюкозы в крови после 1 ч после нагрузки глюкозой не отличаются, можно различать две разные группы по определению иммунореактивного инсулина в эритроцитЬх.

Пациенты с нормальным уровнем имму- нореактивного инсулина н эритроцитах, не смотря на понышенный по сравнению со здоровыми уровень глюкозы крови, после нагрузки глюкозой можно считать более близким к норме, а пациенты с повышенным уровнем иммунореактинногo инсулина н эритроцитах — более близкими к сахарному диабету.

Количество инсулина в плазмер в эритроцитах и глюкозы у больных без нарушения толерантности глюкозы ЗО (НТГ) с нормальным весом (не больше, +10% идеального веса) и с ожирением (больше + 203 идеального веса) 1 ч после перроральной нагрузки глюкозой приведены н табл.2. 35

Количество иьмунореактивного инсулина (ИРИ) в плазме у пациентов с ожирением увеличено, что лишает. этот анализ информационной ценности, а в то же время количество ИРИ в. эритроцитах у пациентов с ожирением отличается незначительно, что открывает более широкие возможности ис" пользования определения ИРИ в эрит. Роцитах в раннем диагнозе сахарного диабета.

Пример 1. Пациент мужчина.

Провели пероральную нагрузку глюкозой и взяли кровь в гепаринизированные пробирки 1 ч после нагрузки.. глюкозой. Кровь центрифугировали, отделяя плазму от массы эритроцитов, определяли глюкозу ортотолуйдиновым методом в плазме. После отсасывания, плазмы и лейкоцитов дОбавляли в Массу эритроцитов 1/1 0,9% раствор хлористого натрия, тщательно перемешивали и центрифугировали 5 мин по 3000 об/мин. Эатем отсасывали надосадочную жидкость и разливали 60 эритроциты н пластмассовые пробирки.

Подготовленные эритроциты и плазму о хранили в холодильнике при -20 С до момента определения иммунореактивного инсулина (ИРИ). 65

Количество глюкозы в крови

191 мг/100 мг/100 мл, ИРИ в плазме

120 мкед/мл, ИРИ в эритроцитах б1,75. В этом случае все показатели унеличены по сравнению с нормой.

Ранее использонанное в диагностике скрытых форм сахарного диабета определение глюкозы в плазме крови указывает на присутствие НТГ, а то, что

ИРИ н эритроцитах больше нормы (36,0 4,5 мкед/мл), подтверждает присутствие НТГ. В этом случае определение ИРИ в плазме не понижено, как это бынает при диабете, и поэтому определение ИРИ в плазме не имеет информационной ценности (сравнительно высокое значение ИРИ в плазме пациента при ИТГ объясняется ожирением, что создает резистентность к инсулину) .

Пример 2. Пациент мужчина, Исследование проводили как описано в примере 1.

Количество глюкозы - 241 мг/100 мл

ИРИ в плазме — 118 мкед/мл, ИРИ в эритроцитах - 30,9 мкед/мл.

По уровню глюкозы крови пациент относится к группе с ИТГ, а по уровню ИРИ в эритроцитах - к норме.

Количество ИРИ в плазме понышено— свойственные данные для ожирения, в диагностике информационной ценности не имеет.

Пример 3. Пациент мужчина.

Исследования проводились по методике примера 1. Результаты: количество глюкозы было 218 мг/100 мл, ИРИ в плазме - бб,5 мкед/мл, ИРИ н эритро-, цитах — 84 мкед/мл. По уровню глюкозы в крови, больного можно отнести к группе с НТГ, но уровень ИРИ в эритроцитах нормальный, поэтому пациента нужно относить к отдельной группе: НТГ с нормальным уровнем

ИРИ в эритроцитах. Уровень ИРИ в плазме нормальный, Пример 4. Пациент мужчина.

Исследование проводились аналогично пРимеРУ 1. Результаты: количество глюкозы - 195 мг/100 мл, ИРИ в плазме — 47,8 мкед/мл, ИРИ н эритроцитах - 47,5 мкед/мл. При повышенном уровне глюкозы отмечается повышение

ИРИ н эритроцитах, что является данным о присутствии НТГ.

Таким образом среди пациентов, которые по общепризнанным критериям относятся к группе с НТГ, на основании нормального уровня ИРИ н эритроцитах можно выделить отдельную группу пациентов, которые по этим показателям более близки к норме, чем к НТГ. Это позволяет проводить более точный диагноз скрытых форм сахарного диабета. Предлагаемый способ по сравнению с известным дает нозможность более точно опре957864 явления диабета, н не сложен технически.

Таблица 1

Группа

Глюкоза крови, мг/100 мл

36+4,5 (n = 31) (p > 0,5) 112,4+3,8

32,4+1,9 (n 6) (р < 0,001) 202,5+9,6 (р 0,5) 61,7+4,5 (и = 7) 199,4 +3,6 число случаев.

Т а блица 2

Пациенты с нормальным весом

72,4

138

46,2

26,5

120

25,5, 50

37,5

76,9

107

161

43,3

26,5

75 9

174

17 5

69,2

48 1

39,5

169

21 3

51,7

27,.5

156

45

155

26

160

31

7 2

27,5

34,5

22,9

51+5,6

29,7+0,7 3

123,5 11,5 делить заболевание, в связи с чем уменьшаются случаи неправильного вы-

Пациенты без нарушения телерантности глюкозы

Пациенты с нарушением толерантности глюкозы и нормальным уровнем иммунореактивного инсулина в зритроцитах

Пациенты с нарушением толерантности глюкозы н повышенным уровнем иммунореактивного инсулина в эритроцитах

Иммунореактивный инсулин в зритроцитах,мкед/мл

957864

Продолжение табл. 2

Пациенты с ожирением

110

84,7

149,79

123

50 м

48,3

137

183

3I 2

4.6, 9

1 65

38 6

130

136

170

131,6

82,1

99

31,5

98,9

26 5

37,7

169

34,2

79,9

"ф е,еФ

110 4>12 9

120,3 11у8

36+2,8

Составитель А. Бражникова

Редактор Т. Парфенова Техред T.Маточка

Корректор А. Гриценко

Заказ 6650/5 Тираж 714

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Ф е 1, Ф. а.

Формула изобретения

Способ диагностики скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации иммунореактивного инсу; лина в элементах крови, о т л и" ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, иммунореактивный инсулин определяют в эритроцитах, н по увеличению его концентрации, по сравнению с нормой, диагностиРуют заболевание.

Источники информации., принятые во внимание при экспертизе

1. Сегав1 Е, Luft R. The plasma

insuXin response to qiukose infusion

4, in healthy subjcetsfand in diabetes

mefX1tus . Acta Endoer Copenh,1967, 55, р. 278-281.