Способ изготовления микропипеток

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к эвт. синд-ву (22)Заявлено 08.12.80. (21) 3213528/29-33 с присоединением заявки № (23) Приоритет (5t)NL. Кл.

С 03 В 23!18

9зеударствениый квинтет

СССР

ho делон изобретений к открытий

Опубликовано 15 . 10 .82 ° Бюллетень ¹ 38 (53) УДК 666.037..7(088.8) Дата опубликования описания 17. 10 . 82

В.Т. Ларин, В.А. Никитин, А.Н. Хохлов, А.Л. и И.Н. Пигарев . (72) Авторы изобретения

Специальное конструкторское бюро биологическ приборостроения АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЛ НИКРОПИПЕТОК

Изобретение относится к промышленности стройматериалов, в частности к стекольной промышленности при изготовлении стеклянных микроинструментов, и может быть использовано в биологии, медицине и животноводстве для S проведения микрохирургических операций и микроэлектродных исследований на клетках и-тканях.

Известен способ изготовления мик" ропипеток, используемых в качестве микроэлектродов для измерения электрической активности клеток и для микроинъекций и микровсасывания веществ или органелл из клетки, включающий в себя вытягивание капилляра необходи-1 мого размера, вытягивание микропипет-. ки с конусным кончиком с последующим отрывом и затачивание микропипеток на абразивном круге (1). ю

Наиболее близким к изобретению по технической сущности является способ из гото аления ми кропи петок путем вытягивания капилляра при нагревании его

2 и последующего отрыва кончика, при.чем последующее скалывание кончика осуществляют путем импульсного воздействия жидкости, помещенной в полость микроампулы (21.

Однако известный способ достаточно сложен, требует очень точного под- бора поршня для микроампулы, что затрудняет процесс при различных размерах капилляров для микропипеток, практически невозможно получение микропипеток с заранее заданными размерами (диаметром кончика и углом скалывания ), что весьма существенно особенно при пересадке ядер клеток, мал выход годных микропипеток с необходимым углом скалывания.

Цель изобретения - удешевление процесса, повышение производительности.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу изготовления микропипеток путем вытягивания капилляра при нагревании его и последующего отрыва кончика, изменяют толщину стен3 Я6604 ки капилляра неравномерным нагревом капилляра и подачей воздуха внутрь

его, либо шлифуют стенку капилляра с одной стороны, либо приваривают на капилляр полоску стекла,при этом 5 полоску стекла берут толщиной больше или равной толщине стенки капилляга и шириной 0,2-1,0 диаметра капилляра, а отрыв кончика осуществляют при подаче в зону нагрева, воздуха или, . 1в инертного газа.

При этом для тонкостенных капилляров целесообразнее производить при-, варку или приклейку полоски, стекла, а при толстостенных - шлифовку части стенки капилляра или выдувание при йерввномерном разогреве заготовки.

На фиг. 1 показана схема получения раэностенного капилляра по предлагаемому способу; на Фиг. 2 " схема вытяжки и отрыва микропипетки со скошенным кончиком; на фиг. 3 " один из вариантов изготовленной микропипет ки.

Схема (Фиг. 1 и 2 ) включает заготовку 1, полоску 2 стекла, нагреватель 3, капилляр 4, микронагреватель 5, микропипетку 6, регулятор 7 нагрева.

1!зготовление микРопипеток по пРеД- зя лагаемому способу производится следую. щим образом.

На заготовку 1 с необходимым соотношением внутреннего и внешнего диаметров приваривают по концам (или при.

- 35 клеивают ) полоску 2 стекла с толщинои равной не менее толщины стенки загс" товки 1 и шириной, равной 0,2-0,5 диаметра заготовки для тонкостенных капилляров. При толстостенных можно выл

40, полнять шлифовку стенки с обеспечением указанных соотношений или выдувание при неравномерном разогреве заготовки, при этом осуществляется одновременно и вытяжка капилляра. Далее с

45 помощью нагревателя 3 разогревают заготовку и вытягивают иэ заготовки капилляр 4 1,2-2.мм; который получается разностенным в точном соответствии с исходным профилем заготовки. Затем разностенный капилляр 4 размягчается

50 в средней части с помощью микронагревателя 5 для вытягивания микропипетки. При получении необходимого диаметра кончика микронагреватель 5 отключается и производится отрыв готовой микропипетки 6.

Во время отрыва в зону или внутрь капилляра подается воздух или инерт3 4 ный газ для охландения кончика в зоне отрыва. При этом из-за раэностенности капилляра 4 происходит неравномерное охлаждение материала в кончике микропипетки 6, Где стенка тоньше, охлаждение и отрыв происходит ранее, где стенка более толстая, происходит дальнейшая вытяжка и последующий отрыв, т.е. получается острый скошенный кончик у микропипетки 6. Регулирование длины и диаметра кончика микропипетки обеспечивается регулированием температуры микронагревателя 5 с помощцью регулятора 7 нагрева, скоростью вытяжки и подачи воздуха или инертного газа.

Угол скалывания при отрыве определяется величиной .разностенности капилляра, т.е. толщиной стенки и шириной полоски утолщения.

Таким образом, можно получить идентичные микропипетки желаемых размеров - по длине кончика, диаметру конФ чика и углу скалывания.

Например, при толщине полоски, равной толцине стенки заготовки и, ширине 0,2-1,0 диаметра заготовки на приборе МЭ-3 или ИЭ-4, выпускаемом в СССР, получаются микропипетки с диаметрами 0,5-5 мкм и углами скалывания 20-45О. Один из вариантов такой микропипетки с диаметром кончика 5

5 мкм и углом около 40 приведен на о микрофотографии фиг. 3, Применение предлагаемого способа дает воэможность существенно уменьшить затраты на изготовление микропипеток.

Годовой экономический эффект составляет не менее 200 тыс,руб.

Формула изобретения

Способ изготовления микропипеток путем вытягивания капилляра при нагре. ванин его и последующего отрыва кончика, отличающийся тем„ что, с целью удешевления процесса и повышения производительности, изменяют толщину стенки капилляра неравномерным нагревом капилляра и подачей воздуха внутрь его либо шлифуют стенку капилляра с одной стороны, либо приваривают на капилляр полоску стекла, при этом полоску стекла берут, толщиной больше или равной толщине стенки -капилляра и шириной 0,2-1,0 диаметра капилляра, а отрыв кончика осуществляют при подаче в зону нагрева воздуха или инертного газа.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

Э

966043 6

Е1ectrocephalography and Сl inical Neuгор1 у iology, 1974, и 36, р. 323-326.

2. Авторское свидетельство СССР

1. Kripke В.R., Ogden T.E. А techni- У 612904, кл. С 03 8 33/06, 1975

que for beveling f inc ni crop i pet tes. s (прототип) .

966043 доэдух

Жюмжма и отры6

ВНИИПИ Заказ 7768/34 Тираж 508 Подписное филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4