Мет-связывающие агенты и их применения - заявка 2015131718 на патент на изобретение в РФ

1. Биспецифический агент, содержащий:
a) первый сайт связывания, специфически связывающий МЕТ человека, и
b) второй сайт связывания, специфически связывающий один или более компонентов пути WNT.
2. Биспецифический агент по п. 1, отличающийся тем, что указанный первый сайт связывания содержит антиген-связывающий сайт антитела, специфически связывающего МЕТ человека, причем указанный антиген-связывающий сайт содержит CDR1 тяжелой цепи, содержащую ASYAWS (SEQ ID NO: 1), CDR2 тяжелой цепи, содержащую YISYSGGTDYNPSLKS (SEQ ID NO: 2), и CDR3 тяжелой цепи, содержащую KGAY (SEQ ID NO: 3); и CDR1 легкой цепи, содержащую SASSSVSSSYLY (SEQ ID NO: 4), CDR2 легкой цепи, содержащую STSNLAS (SEQ ID NO: 5), и CDR3 легкой цепи, содержащую HQWSSYPYT (SEQ ID NO: 6).
3. Биспецифический агент по п. 1, отличающийся тем, что указанный второй сайт связывания: (!) специфически связывает один или более белков Frizzled (FZD), или (ii) специфически связывает один или более белков WNT человека.
4. Биспецифический агент по п. 3, отличающийся тем, что указанные один или более белков FZD выбраны из группы, состоящей из: FZD8, FZD1, FZD2, FZD5 и FZD7, или отличающийся тем, что один или более белков WNT выбраны из группы, состоящей из: WNT1, WNT2, WNT2b, WNT3, WNT3a, WNT7a, WNT7b, WNT8a, WNT8b, WNT10a и WNT10b.
5. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, который представляет собой биспецифическое антитело.
6. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, который содержит растворимый рецептор FZD.
7. Биспецифический агент по п. 6, отличающийся тем, что указанный растворимый рецептор FZD содержит Fri-домен белка FZD человека.
8. Биспецифический агент по 7, отличающийся тем, что указанный белок FZD человека представляет собой FZD8 человека.
9. Биспецифический агент по п. 7, отличающийся тем, что указанный Fri-домен белка FZD человека содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 39, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 37, SEQ ID NO: 38, SEQ ID NO: 40 и SEQ ID NO: 41.
10. Биспецифический агент по любому из пп. 7-9, отличающийся тем, что указанный Fri-домен белка FZD человека связан с гетерологичным полипептидом.
11. Биспецифический агент по п. 10, отличающийся тем, что указанный гетерологичный полипептид содержит Fc-область человека.
12. Биспецифический агент по п. 6, отличающийся тем, что указанный растворимый рецептор FZD содержит SEQ ID NO: 56 или SEQ ID NO: 53.
13. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанный первый сайт связывания содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 7 и вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 8.
14. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что указанный второй сайт связывания содержит полипептид, кодируемый плазмидой, депонированной в АТСС под обозначением РТА-13611.
15. Биспецифический агент по п. 1, отличающийся тем, что указанный первый сайт связывания содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую плазмидой, депонированной в АТСС под обозначением РТА-13609, и вариабельную область легкой цепи, кодируемую плазмидой, депонированной в АТСС под обозначением РТА-13610; а
указанный второй сайт связывания содержит полипептид, кодируемый плазмидой, депонированной в АТСС под обозначением РТА-13611.
16. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, содержащий первый СН3-домен и второй СН3-домен, каждый из которых модифицирован для того, чтобы стимулировать образование гетеродимеров.
17. Биспецифический агент по п. 16, отличающийся тем, что указанный первый и второй СН3-домены модифицированы с учетом электростатических эффектов.
18. Биспецифический агент по любому из пп. 1-4, который:
(i) ингибирует связывание МЕТ с фактором роста гепатоцитов;
(ii) облегчает интернализацию МЕТ;
(iii) стимулирует деградацию МЕТ;
(iv) ингибирует димеризацию МЕТ;
(v) ингибирует активацию МЕТ;
(vi) ингибирует связывание одного или более из белков WNT с по меньшей мере одним FZD;
(vii) ингибирует канонический сигналинг WNT;
(viii) ингибирует рост опухоли или клеток опухоли;
(ix) индуцирует экспрессию маркеров дифференцировки в опухоли;
(x) индуцирует дифференцировку клеток в опухоли;
(xi) снижает частоту раковых стволовых клеток в опухоли; и/или
(xii) ингибирует эпителиально-мезенхимальный переход (ЕМТ).
19. Биспецифический агент или антитело, специфически связывающие МЕТ человека, причем указанный биспецифический агент или антитело связывают эпитоп, содержащий аминокислоты PCQDC (SEQ ID NO: 113).
20. Выделенное антитело, специфически связывающее МЕТ человека, содержащее:
CDR1 тяжелой цепи, содержащую ASYAWS (SEQ ID NO: 1), CDR2 тяжелой цепи, содержащую YISYSGGTDYNPSLKS (SEQ ID NO: 2), и CDR3 тяжелой цепи, содержащую KGAY (SEQ ID NO: 3); и CDR1 легкой цепи, содержащую SASSSVSSSYLY (SEQ ID
NO: 4), CDR2 легкой цепи, содержащую STSNLAS (SEQ ID NO: 5), и CDR3 легкой цепи, содержащую HQWSSYPYT (SEQ ID NO: 6).
21. Антитело по п. 20, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, обладающую по меньшей мере приблизительно 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 7, и вариабельную область легкой цепи, обладающую по меньшей мере приблизительно 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 8.
22. Антитело по любому из пп. 19-21, который представляет собой моноклональное антитело, рекомбинантное антителом, одновалентное антитело, химерное антитело, гуманизированное антитело, антитело человека, биспецифическое антитело, антитело IgG1, антитело IgG2 или фрагмент антитела, содержащий антиген-связывающий сайт.
23. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифический агент или антитело по любому из пп. 1-22 и фармацевтически приемлемый носитель.
24. Клетка, продуцирующая биспецифический агент или антитело по любому из пп. 1-22.
25. Полинуклеотид, кодирующий биспецифический агент или антитело по любому из пп. 1-22.
26. Биспецифический агент или антитело по любому из пп. 1-22 для применения при лечении рака.
27. Биспецифический агент или антитело по любому из пп. 1-22 для применения при ингибировании роста опухоли.
28. Применение биспецифического агента или антитела по любому из пп. 1-22 для лечения рака.
29. Применение биспецифического агента или антитела по любому из пп. 1-22 для ингибирования роста опухоли.
30. Применение по п. 28 или 29, включающее применение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического агента, причем в некоторых случаях указанный терапевтический агент является химиотерапевтическим агентом.
Наверх