Микровезикула и способ ее получения - заявка 2015143513 на патент на изобретение в РФ

1. Способ получения микровезикул, содержащих трансгенный продукт и/или лентивирусную РНК, содержащую трансген, включающий этапы:
культивирования клетки, в которую при помощи лентивирусного вектора in vitro вводится трансген, для внеклеточного высвобождения микровезикул, содержащих трансгенный продукт и/или лентивирусную РНК, содержащую трансген, где указанный лентивирусный вектор является дефицитным, по меньшей мере, по одному гену структурного белка и содержит трансген под контролем промотора гена теломеразной обратной транскриптазы (TERT) в лентивирусной геномной последовательности, и
сбора высвобожденных микровезикул.
2. Способ по п. 1, где у указанной клетки отсутствует указанный, по меньшей мере, один ген структурного белка.
3. Способ по п. 1 или 2, где указанный лентивирусный вектор является дефицитным по гену env.
4. Способ по п. 1, где указанный промотор гена теломеразной обратной транскриптазы (TERT) является промотором гена TERT человека.
5. Способ по п. 4, где указанный промотор гена TERT человека содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1 или нуклеотидную последовательность, имеющую 90% или более идентичности последовательности с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1.
6. Способ по п. 1, где указанный лентивирусный вектор представляет собой:
(i) РНК вектор, содержащий лентивирусную геномную последовательность,
(ii) ДНК вектор, кодирующий РНК, содержащую лентивирусную геномную последовательность, или
(iii) вирусную частицу, несущую РНК, содержащую лентивирусную геномную последовательность.
7. Способ по п. 1, где указанная лентивирусная геномная последовательность представляет собой геномную последовательность ВИЧ.
8. Способ п. 1, где указанный лентивирусный вектор содержит указанный трансген, представляющий собой ген-супрессор опухолевого роста.
9. Способ по п. 8, где указанный ген-супрессор опухолевого роста представляет собой ген PTEN или р16.
10. Способ по п. 1, где указанный лентивирусный вектор содержит указанный трансген, который кодирует кшРНК.
11. Способ по п. 10, где указанная кшРНК специфична по отношению к гену, кодирующему регулятор клеточной пролиферации.
12. Способ по п. 11, где указанный регулятор клеточной пролиферации представляет собой CDC6.
13. Способ по п. 1, где указанная клетка является клеткой, выделенной из почки.
14. Микровезикула, содержащая трансгенный продукт и/или лентивирусную РНК, содержащую трансген, где указанная микровезикула получена способом по любому из пп. 1-13.
15. Способ генной трансдукции, включающий приведение клетки-мишени в контакт с микровезикулой, содержащей трансгенный продукт и/или лентивирусную РНК, содержащую трансген, по п. 14 для их слияния, чем обеспечивается введение трансгена в клетку.
16. Композиция, содержащая микровезикулу по п. 14.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая микровезикулу по п. 14.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17, которая предназначена для применения в лечении рака.
19. Фармацевтическая композиция по п. 17 или 18, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.
20. Способ лечения пациента, включающий введение микровезикулы по п. 14 указанному пациенту, нуждающемуся в введении указанного трансгена или указанного трансгена или указанного трансгенного продукта.
21. Способ по п. 20, где указанный пациент страдает от рака.
Наверх