Универсальная противогриппозная вакцина - заявка 2015144135 на патент на изобретение в РФ

1. Вакцина широкого спектра действия против вируса гриппа А, содержащая рекомбинантные псевдоаденовирусные частицы, на основе аденовируса человека пятого серотипа, несущие под контролем индуцибельного промотора ген полноразмерного белка М2 и ген полноразмерного белка NP, модифицированного мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации, соединенных между собой нуклеотидной последовательностью пептида 2А вируса ящура.
2. Вакцина по п. 1, содержащая ген полноразмерного белка М2 с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 4 (фиг. 4), при этом аминокислотная последовательность белка представлена SEQ ID NO: 1 (фиг. 1).
3. Вакцина по пп. 1 и 2, содержащая ген полноразмерного белка NP с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 5 (фиг. 5), модифицированный мотивом PEST и удалением сигнала ядерной локализации, при этом аминокислотная последовательность белка представлена SEQ ID NO: 2 (фиг. 2).
4. Вакцина по пп. 1, 3 характеризующаяся тем, что гены белков М2 и NP отделены нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 6 (фиг. 6), кодирующей саморасщепляющийся пептид 2А вируса ящура SEQ ID NO: 3 (фиг. 3), обеспечивающий экспрессию генов белков М2 и NP отдельно в общей генетической конструкции.
5. Вакцина по пп. 1, 3 характеризующаяся тем, что гены белков М2 (SEQ ID NO: 4) и NP (SEQ ID NO: 5), экспрессируются под контролем индуцибельного промотора Tet-off, позволяющего блокировать экспрессию подконтрольных генов при помощи антибиотика доксициклина или тетрациклина.
6. Вакцина по п. 1, содержащая на дозу
рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих гены белков М2 и NP 106-109 БОЕ/мл;
фармацевтически приемлемый буфер до 0,5 мл.
7. Вакцина по п. 6, содержащая в качестве фармацевтически приемлемого буфера раствор: 10 mM TrisHCl, 75 mМ NaCl, 1 mM MgCl2, 5% сахароза, 0,05% полисорбат 80, 0,5% этанол, 100 мкм ЭДТА, рН 8,0.
8. Вакцина по п. 6 вводится преимущественно интраназально в виде капель или спрея.
9. Способ получения вакцины по п. 6, предусматривающий получение рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц Ad5-tet-M2NP-PEST в культуре клеток линии 293НЕК, концентрирование и очистку рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц с помощью ультрафильтрации и высокоэффективной жидкостной хроматографии, доведение фармацевтически приемлемым буфером до нужной концентрации.
Наверх