Биспецифические антигенсвязывающие конструкции против her2 - заявка 2016125551 на патент на изобретение в РФ

1. Антигенсвязывающая конструкция, содержащая:
первую антигенсвязывающую полипептидную конструкцию, которая моновалентно и специфически связывает ECD2 (внеклеточный домен 2) антигена HER2 (рецептор эпидермального фактора роста 2, расположенный на HER2-экспрессирующих клетках;
вторую антигенсвязывающую полипептидную конструкцию, которая моновалентно и специфически связывает ECD4 (внеклеточный домен 4) антигена HER2, расположенный на HER2-экспрессирующих клетках;
первый и второй линкерные полипептиды, причем первый линкерный полипептид функционально связан с первой антигенсвязывающей полипептидной конструкцией, а второй линкерный полипептид функционально связан со второй антигенсвязывающей полипептидной конструкцией;
при этом линкерные полипептиды способны к образованию ковалентной связи друг с другом,
и причем один или оба из первого или второго антигенсвязывающего полипептида представляют собой scFv.
2. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1, отличающаяся тем, что каждый первый и второй линкерный полипептид содержат полипептид шарнирной области иммуноглобулина, выбранный из шарнирной области IgG1, IgG2 или IgG4.
3. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первый и/или второй линкерные полипептиды функционально связаны с пептидным остовом, необязательно Fc.
4. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первый и второй линкерные полипептиды функционально связаны с димерным Fc-доменом, содержащим первый и второй Fc-полипептиды, причем каждый из них содержит последовательность СН3, причем первый Fc-полипептид функционально связан с первым линкерным полипептидом, а второй линкерный полипептид функционально связан со вторым линкерным полипептидом.
5. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что (i) первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab; или (ii) первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv; или (iii) как первая
антигенсвязывающая полипептидная конструкция, так а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляют собой scFv.
6. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что
i. первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, и первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция Fab содержит
a. первый полипептид VH1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 221), v 5020 (SEQ ID NO: 205), v7091 (SEQ ID NO: 221), v6717 (SEQ ID NO: 267), или v10000 (SEQ ID NO: 99) и
b. первый полипептид VL1 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 35), v 5020 (SEQ ID NO: 35), v7091 (SEQ ID NO: 35), v6717 (SEQ ID NO: 259), или v10000 (SEQ ID NO: 71);
а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция scFv содержит
(a) второй полипептид VH2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 179), v 5020 (SEQ ID NO: 157), v7091 (SEQ ID NO: 305), v6717 (SEQ ID NO: 179) или v10000 (SEQ ID NO: 305), и
(b) второй полипептид VL2 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 171), v 5020 (SEQ ID NO: 149), v7091 (SEQ ID NO: 297), v6717 (SEQ ID NO: 171) или v 10000 (SEQ ID NO: 297); или
ii. первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab, и первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция scFv содержит
(a) первый полипептид VH1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 221), v 5020 (SEQ ID NO: 205), v7091 (SEQ ID NO: 221), v6717 (SEQ ID NO: 267) или v10000 (SEQ ID NO: 99)), и
(b) первый полипептид VL1 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 35), v 5020 (SEQ ID NO: 35), v7091 (SEQ ID NO: 35), v6717 (SEQ ID NO: 259) или v 10000 (SEQ ID NO: 71),
а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция Fab содержит
(а) второй полипептид VH2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 179), v 5020 (SEQ ID NO: 157), v7091 (SEQ ID NO: 305), v6717 (SEQ ID NO: 179) или v10000 (SEQ ID NO: 305), и
(b) второй полипептид VL2 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 171), v 5020 (SEQ ID NO: 149), v7091 (SEQ ID NO: 297), v6717 (SEQ ID NO: 171) или v10000 (SEQ ID NO: 297); или
iii. первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, и первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция scFv содержит
(a) первый полипептид VH1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 221), v 5020 (SEQ ID NO: 205), v7091 (SEQ ID NO: 221), v6717 (SEQ ID NO: 267) или v10000 (SEQ ID NO: 99), и
(b) первый полипептид VL1 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD2-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 35), v 5020 (SEQ ID NO: 35), v7091 (SEQ ID NO: 35), v6717 (SEQ ID NO: 259) или v10000 (SEQ ID NO: 71),
а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция scFv и содержит
(a) второй полипептид VH2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий VH ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 179), v 5020 (SEQ ID NO: 157), v7091 (SEQ ID NO: 305), v6717 (SEQ ID NO: 179) или v10000 (SEQ ID NO: 305), и
(b) второй полипептид VL2 вариабельной области легкой цепи, содержащий VL ECD4-связывающей полипептидной конструкции v5019 (SEQ ID NO: 171), v 5020 (SEQ ID NO: 149), v7091 (SEQ ID NO: 297), v6717 (SEQ ID NO: 171) или v10000 (SEQ ID NO: 297).
7. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция выбрана из
i. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VH CDR, содержащие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336 и SEQ ID NO: 337 или SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336 и SEQ ID NO: 348;
ii. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VH CDR, содержащие аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 90% идентичны трем последовательностям VH CDR SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336 и SEQ ID NO: 337 или SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336 и SEQ ID NO: 348
iii. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VL CDR, содержащие аминокислотные последовательности трех последовательностей VL CDR SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 339 и SEQ ID NO: 340 или SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 347 и SEQ ID NO: 340;
iv. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VL CDR, которые
по меньшей мере на 90% идентичны аминокислотным последовательностям трех последовательностей VL CDR, которые по меньшей мере на 90% идентичны SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 339 и SEQ ID NO: 340 или SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 347 и SEQ ID NO: 340;
v. полипептидной конструкции, содержащей шесть последовательностей CDR, содержащих аминокислотные последовательности шести последовательностей CDR SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336, SEQ ID NO: 337, SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 339 и SEQ ID NO: 340; или SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 347 и SEQ ID NO: 340; или
vi. полипептидной конструкции, содержащей шесть последовательностей CDR, содержащих аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 90% идентичны шести последовательностям CDR SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336, SEQ ID NO: 337, SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 339 и SEQ ID NO: 340; или SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336, SEQ ID NO: 348, SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 347 и SEQ ID NO: 340, и
второй антигенсвязывающий полипептид выбран из
vii. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VH CDR, содержащие аминокислотные последовательности трех последовательностей VH CDR SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342 и SEQ ID NO: 343;
viii. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VH CDR, содержащие аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 90% идентичны трем последовательностям VH CDR SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342 и SEQ ID NO: 343;
ix. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VL CDR, содержащие аминокислотные последовательности трех последовательностей VL CDR SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346;
x. полипептидной конструкции, содержащей три последовательности VL CDR, которые по меньшей мере на 90% идентичны аминокислотным последовательностям трех последовательностей VL CDR SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346;
xi. полипептидной конструкции, содержащей шесть последовательностей CDR, содержащих аминокислотные последовательности шести последовательностей CDR SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342, SEQ ID NO: 343, SEQ ID NO: 344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346; или
xii. полипептидной конструкции, содержащей шесть последовательностей CDR, содержащих аминокислотные последовательности, которые по меньшей мере на 90% идентичны шести последовательностям CDR SEQ ID NO: 341, SEQ ID NO: 342, SEQ ID NO: 343, SEQ ID NO:
344, SEQ ID NO: 345 и SEQ ID NO: 346.
8. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция: (i) блокирует на 50% или больше связывание пертузумаба с ECD2, и/или (ii) второй антигенсвязывающий полипептид блокирует на 50% или больше связывание трастузумаба с ECD4.
9. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит одну из антигенсвязывающих полипептидных конструкций v5019, v10000, v7091, v5020 или v6717, специфических по отношению к ECD2 HER2, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит одну из антигенсвязывающих полипептидных конструкций v5019, v10000, v7091, v5020 или v6717, специфических по отношению к ECD4 HER2.
10. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную антигенсвязывающей полипептидной конструкции v5019, v10000, V7091, v5020 или v6717, специфической по отношению к ECD2 HER2, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную антигенсвязывающей полипептидной конструкции v5019, v10000, V7091, v5020 или v6717, специфической по отношению к ECD4 HER2.
11. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, выбранная из v5019, v10000, v7091, v5020 и v6717.
12. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой Fab, а вторая антигенсвязывающая полипептидная конструкция представляет собой scFv, причем, что указанная антигенсвязывающая конструкция
(i) индуцирует повышенную степень интернализации рецептора в клетках HER2 3+ и/или
(ii) демонстрирует повышенную активность против клеток HER2 1+ в анализе АЗКЦ (антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность) по сравнению с эталонной бипаратопной антигенсвязывающей конструкцией, имеющей два Fab.
13. Антигенсвязывающая конструкция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что первая и вторая антигенсвязывающие полипептидные конструкции представляют собой scFv, причем
антигенсвязывающая конструкция индуцирует повышенную степень интернализации рецептора в клетках с уровнем экспрессии HER2 1+, 2+ и 3+ по сравнению с эталонной антигенсвязывающей конструкцией, имеющей два Fab.
14. Модифицированная конструкция пертузумаба, содержащая одну или более антигенсвязывающих полипептидных конструкций, которые моновалентно и специфически связываются с ECD2 HER2, причем каждая полипептидная конструкция содержит VH и VL, при этом VH содержит три последовательности CDR, содержащие аминокислотные последовательности трех последовательностей VH CDR SEQ ID NO: 335, SEQ ID NO: 336 и SEQ ID NO: 348, и VL содержит три последовательности CDR, содержащие аминокислотные последовательности трех последовательностей VL CDR SEQ ID NO: 338, SEQ ID NO: 347 и SEQ ID NO: 340.
15. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 14, отличающаяся тем, что VH содержит VH v9996, и VL содержит VL v9996.
16. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 14 или 15, отличающаяся тем, что антигенсвязывающая полипептидная конструкция содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную VH v9996 и VL v9996.
17. Модифицированная конструкция пертузумаба по пп. 14 и 15, отличающаяся тем, что модифицированная конструкция пертузумаба является моновалентной, бивалентной или мультивалентной.
18. Модифицированная конструкция пертузумаба по пп. 14 и 15, отличающаяся тем, что указанная конструкция является (i) моновалентной и содержит Fab или scFv, (ii) является бивалентной и содержит Fab и scFv или (iii) является бивалентной и содержит два scFv.
19. Модифицированная конструкция пертузумаба по пп. 14 и 15, отличающаяся тем, что указанная конструкция является моновалентной и обладает аффинностью, повышенной в 7-9 раз, по отношению к ECD2 HER2 по сравнению с пертузумабом.
20. Модифицированная конструкция пертузумаба по пп. 14 и 15, содержащая димерный Fc-домен, связанный с антигенсвязывающей полипептидной конструкцией при помощи линкера или без него.
21. Модифицированная конструкция пертузумаба по пп. 14 и 15, отличающаяся тем, что указанная модифицированная конструкция пертузумаба содержит первую и вторую антигенсвязывающие полипептидные конструкции и первый и второй Fc-полипептиды, причем
каждый из них содержит последовательность СН3, причем первый Fc-полипептид функционально связан с первой антигенсвязывающей полипептидной конструкцией при помощи первого линкера или без него, и второй мономерный Fc-полипептид функционально связан со второй антигенсвязывающей полипептидной конструкцией с помощью второго линкера или без него.
22. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 21, содержащая полипептидный линкер.
23. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 22, отличающаяся тем, что указанный линкер содержит шарнирную область IgGl.
24. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 21, отличающаяся тем, что Fc-домен представляет собой Fc-домен антитела человека.
25. Модифицированная конструкция пертузумаба по п. 21, отличающаяся тем, что Fc-домен представляет собой Fc-домен IgGl человека.
26. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, отличающаяся тем, что температура плавления (Тпл) димеризованных СН3-доменов составляет около 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 77,5, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84 или 85°C или выше.
27. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, вырабатываемый с чистотой более, чем около 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% при экспрессии.
28. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, вырабатываемый с чистотой более, чем около 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% при экспрессии на основе генетического материала одной клетки.
29. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, содержащий одну или более модификаций по меньшей мере в одной из последовательностей СН3.
30. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, содержащий одну или более модификаций по меньшей мере в одной из последовательностей СН3, которые способствуют образованию гетеродимера со стабильностью, сравнимой со стабильностью гомодимерного Fc-домена дикого типа.
31. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая i. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации
T350V_L351 Y_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T366I_N390R_K392M_T394W во втором Fc-полипептиде; или
ii. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации L351 Y_S400E_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T350V_T366L_K392L_T394W во втором Fc-полипептиде,
iii. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации L351Y_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T366L_K392M_T394W во втором полипептиде;
iv. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации L351Y_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T366L_K392L_T394W во втором Fc-полипептиде;
v. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации T350V_L351Y_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T350V_T366L_K392L_T394W во втором Fc-полипептиде;
vi. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации T350V_L351Y_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T350V_T366L_K392M_T394W во втором Fc-полипептиде; или
vii. гетеродимерный Fc-фрагмент IgGl, имеющий модификации T350V_L351Y_S400E_F405A_Y407V в первом Fc-полипептиде и модификации T350V_T366L_N390R_K392M_T394W во втором Fc-полипептиде,
согласно EU-нумерации по сравнению с гомодимерным Fc-фрагментом дикого типа.
32. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, содержащий по меньшей мере один СН2-домен.
33. Конструкция по п. 32, отличающаяся тем, что СН2-домен(ы) гетеродимерного Fc-фрагмента содержит одну или более модификаций.
34. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, 33, содержащая гетеродимерный Fc-фрагмент, содержащий одну или более модификаций, что способствуют избирательному связыванию Fc-гамма рецепторов.
35. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, 33, отличающаяся тем, что указанная конструкция гликозилирована.
36. Конструкция по любому из пп. 1 и 2, 14 и 15, 22-25, 33, отличающаяся тем, что указанная конструкция конъюгирована с лекарственным средством.
37. Конструкция по п. 36, отличающаяся тем, что лекарственное средство представляет собой майтансин (DM1).
38. Конструкция по п. 36, отличающаяся тем, что указанная конструкция конъюгирована с DM1 при помощи линкера SMCC.
39. Фармацевтическая композиция, содержащая конструкцию по любому из пп. 1-38 и фармацевтический носитель.
40. Фармацевтическая композиция по п. 39, отличающаяся тем, что фармацевтический носитель содержит буфер, антиоксидант, молекулу с низкой молекулярной массой, лекарственное средство, белок, аминокислоту, углевод, липид, хелатирующий агент, стабилизатор или вспомогательное вещество.
41. Фармацевтическая композиция для использования в медицине, содержащая конструкцию по любому из пп. 1-38.
42. Фармацевтическая композиция для использования в лечении рака, содержащая конструкцию по любому из пп. 1-38.
43. Способ лечения субъекта, имеющего HER2-экспрессирующую (HER2+) опухоль, включающий введение субъекту эффективного количества конструкции по любому из пп. 1-38 или фармацевтической композиции по любому из пп. 39-42.
44. Способ по п. 43, отличающийся тем, что результатом лечения является уменьшение объема опухоли, ингибирование роста опухоли, увеличение периода времени до начала прогрессии опухоли, продление выживаемости субъекта без признаков заболевания, уменьшение метастазов, увеличение выживаемости субъекта без прогрессирования заболевания или увеличение общей выживаемости субъекта.
45. Способ по п. 43 или 44, отличающийся тем, что опухоль представляет собой рак поджелудочной железы, рак головы и шеи, рак ЖКТ, колоректальный рак, рак молочной железы, рак почек, рак шейки матки, рак яичников, рак эндометрия, рак матки, злокачественная меланома, рак глотки, рак ротовой полости или рак кожи.
46. Способ по пп. 43 и 44, отличающийся тем, что опухоль содержит клетки, которые экспрессируют в среднем 10000 или больше копий HER2 на опухолевую клетку.
47. Способ по пп. 43 и 44, отличающийся тем, что опухоль представляет собой HER2 1+, HER2 2+ или HER2 3+, что определяют с помощью иммуногистохимического исследования (ИГХ).
48. Способ по п. 47, отличающийся тем, что опухоль экспрессирует HER2 на уровне 2+ или ниже, который определяют с помощью ИГХ.
49. Способ по п. 43, отличающийся тем, что HER2+ опухоль, представляет собой рак яичников с уровнем экспрессии HER2 2+/3+, который определяют с помощью ИГХ, и амплификацией гена HER2, и умеренно чувствительна к трастузумабу.
50. Способ по п. 43, отличающийся тем, что HER2+ опухоль, представляет собой рак молочной железы с уровнем экспрессии HER2 2+ или ниже, что определяют с помощью иммуногистохимического исследования (ИГХ).
51. Способ по п. 43, отличающийся тем, что HER2+ опухоль, представляет собой (i) негативный по рецепторам эстрогенов (ER-), негативный по рецепторам прогестерона (PR-), резистентный к трастузумабу, резистентный к химиотерапии инвазивный протоковый рак молочной железы с уровнем экспресии HER2 3+, (ii) резистентный к трастузумабу отечно-инфильтративный рак молочной железы (ER-, PR-) с уровнем экспресии HER2 3+, (iii) инвазивный протоковый рак молочной железы (ER-, PR-) с уровнем экспресии HER2 3+ или (iv) резистентный к трастузумабу и пертузумабу рак молочной железы с амплификацией гена HER2 и уровнем экспресии HER2 2+.
52. Способ по пп. 43 и 44, 48-51, отличающийся тем, что субъект ранее не получал лечение с использованием антитела к HER2.
53. Способ по пп. 43 и 44, 48-51, отличающаяся тем, что опухоль резистентна или устойчива к пертузумабу, трастузумабу и/или TDM1.
54. Способ по любому из пп. 43 и 44, 48-51, отличающийся тем, что субъект ранее получал лечение с использованием пертузумаба, трастузумаба и/или TDM1.
55. Способ по любому из пп. 43 и 44, 48-51, отличающийся тем, что конструкцию выбирают из v5019, v10000, v7091, v5020 или v6717.
56. Способ по пп. 43 и 44, 48-51, отличающийся тем, что введение осуществляют путем инъекции или инфузии.
57. Способ по пп. 43 и 44, 48-51, дополнительно включающий введение субъекту дополнительного средства, необязательно химиотерапевтического средства.
58. Способ по п. 57, отличающийся тем, что
i. опухоль представляет собой немелкоклеточный рак легких, и дополнительное средство представляет собой одно или более средств из цисплатина, карбоплатина, паклитаксела, альбумин-связанного паклитаксела, доцетаксела, гемцитабина, винорелбина, иринотекана, этопозида, винбластина или пеметрекседа;
ii. опухоль представляет собой рак желудка, и дополнительное средство представляет
собой одно или более средств из 5-фторурацила (в присутствии или в отсутствие фолиновой кислоты), капецитабина, карбоплатина, цисплатина, доцетаксела, эпирубицина, иринотекана, оксалиплатина или паклитаксела;
iii. опухоль представляет собой рак поджелудочной железы, и дополнительное средство представляет собой одно или более средств из гемцитабина, фолфиринокса, абраксана или 5-фторурацила;
iv. опухоль представляет собой эстроген- и/или прогестерон-позитивный рак молочной железы, и дополнительное средство представляет собой одно или более средств из комбинации (а) доксорубицина и эпирубицина, (b) комбинации паклитаксела и доцетаксела или (с) комбинации фторурацила, циклофосфамида и карбоплатина;
v. опухоль представляет собой рак головы и шеи, и дополнительное средство представляет собой одно или более средств из паклитаксела, карбоплатина, доксорубицина или цисплатина;
vi. опухоль представляет собой рак яичников, и дополнительное средство представляет собой одно или более средств из цисплатина, карбоплатина или таксана, как, например, паклитаксела или доцетаксела.
59. Способ по пп. 43 и 44, 48-51, 58, отличающийся тем, что субъект представляет собой человека.
60. Способ обнаружения или измерения количества HER2 в образце, включающий воздействие на образец антигенсвязывающей конструкцией по пп. 1-38 и обнаружение или измерение количества связанною комплекса.
61. Способ подавления, снижения или блокировки передачи сигнала, опосредованного HER2, в клетке, включающий введение эффективного количества антигенсвязывающей конструкции по пп. 1-38 в клетку.
62. Способ уничтожения или ингибирования роста HER2-экспрессирующей опухолевой клетки, включающий воздействие на клетку антигенсвязывающей конструкцией по пп. 1-38.
63. Способ по п. 62, отличающийся тем, что опухолевая клетка представляет собой клетку карциномы поджелудочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 1+ или 2+, клетку карциномы легких человека с уровнем экспрессии HER2 3+, клетку бронхоальвеолярной карциномы человека европеоидной расы с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку карциномы глотки человека, клетку плоскоклеточной карциномы языка человека с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку плоскоклеточной карциномы глотки с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку колоректальной карциномы человека с уровнем экспрессии HER2 1+ или 2+, клетку карциномы желудка человека с уровнем экспрессии HER2 3+, клетку протоковой карциномы молочной железы человека (ER+, позитивной по рецепторам эстрогена) с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку карциномы молочной железы человека (ER+) с амплификацией гена HER2 и уровнем экспрессии HER2 2+/3+, клетку трижды негативной карциномы молочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 0+/1+, клетку эндометриоидной карциномы человека с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку метастатической злокачественной меланомы легких с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку карциномы шейки матки человека с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку почечно-клеточной карциномы человека с уровнем экспрессии Her2 1+ или клетку карциномы яичника человека с уровнем экспрессии HER2 1+.
64. Способ по п. 62, отличающийся тем, что опухолевая клетка представляет собой клетку карциномы поджелудочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 1+ и 2+ или 3+, клетку метастатической карциномы поджелудочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку карциномы легких человека с уровнем экспрессии HER2 0+/1+, +3+, клетку бронхоальвеолярной карциномы человека европеоидной расы с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку анапластической карциномы легких с уровнем экспрессии HER2 0+, клетку немелкоклеточной карциномы легких человека, клетку карциномы глотки человека, клетку плоскоклеточной карциномы языка человека с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку плоскоклеточной карциномы глотки с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку колоректальной карциномы человека с уровнем экспрессии HER2 1+ или 2+, клетку карциномы желудка человека с уровнем экспрессии HER2 0+, 1+ или 3+, клетку протоковой карциномы молочной железы человека (ER+, позитивной по рецепторам эстрогена) с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку карциномы молочной железы человека (ER+) с амплификацией гена HER2 и уровнем экспрессии HER2 2+/3+, клетку трижды негативной карциномы молочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 0+/1+, клетку протоковой карциномы молочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 0+ (базального типа В, мезенхимально-подобная, трижды негативная), клетку карциномы молочной железы (ER+) с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку метастатической карциномы молочной железы человека с уровнем экспрессии HER2 0+(трижды негативный рак (ER-) люминального типа А с амплификацией гена HER2), клетку мезодермальной опухоли матки человека (смешанная форма рака третьей стадии), клетку эндометриоидной карциномы человека с уровнем экспрессии HER2 2+, клетку эпидермоидный карциномы кожи человека с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку метастатической злокачественной меланомы легких с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку злокачественной меланомы с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку эпидермоидной карциномы шейки матки человека, клетку карциномы мочевого пузыря человека с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку карциномы шейки матки человека с уровнем экспрессии HER2 1+, клетку почечно-клеточной карциномы человека с уровнем экспрессии Her2 1+ или клетку карциномы яичника человека с уровнем экспрессии HER2 1+, 2+ или 3+, и отличающийся тем, что антигенсвязывающая конструкция конъюгирована с майтансином (DM1).
65. Способ по п. 62, отличающийся тем, что опухолевая клетка представляет собой клетку, выбранную из клеточных линий опухоли поджелудочной железы ВхРСЗ, Capan-1, MiaPaca2; клеточных линий опухоли легких Calu-3, NCI-H322; клеточных линий опухоли головы и шеи Detroit 562, SCC-25, FaDu; клеточных линий колоректальной опухоли HT29, SNU-C2B; клеточной линии опухоли желудка NCI-N87; клеточных линий опухоли молочной железы MCF-7, MDAMB175, MDAMB361, MDA-MB-231, ВТ-20, JIMT-1, SkBr3, ВТ-474; клеточной линии опухоли матки TOV-112D; клеточной линии опухоли кожи Malme-3М; клеточных линий опухоли шейки матки Caski, MS751; клеточной линии опухоли мочевого пузыря Т24, клеточных линий опухоли яичника CaOV3 и SKOV3.
66. Способ по п. 62, отличающийся тем, что опухолевая клетка представляет собой клетку, выбранную из клеточных линий опухоли поджелудочной железы ВхРСЗ, Capan-1, MiaPaca2, SW 1990, Panc 1; клеточных линий опухоли легких А549, Calu-3, Calu-6, NCI-H2126, NCI-H322; клеточных линий опухоли головы и шеи Detroit 562, SCC-15, SCC-25, FaDu; клеточных линий колоректальной опухоли Colo201, DLD-1, НСТ116, НТ29, SNU-C2B; клеточных линий опухоли желудка SNU-1, SNU-16, NCI-N87; клеточных линий опухоли молочной железы SkBr3, MCF-7, MDAMB175, MDAMB361, MDA-MB-231, ZR-75-1, ВТ-20, BT549, ВТ-474, САМА-1, MDAMB453, JIMT-1, T47D; клеточных линий опухоли матки SK-UT-1, TOV-112D; клеточных линий опухоли кожи А431, Malme-3М, SKEMEL28; клеточных линий опухоли шейки матки Caski, MS751; клеточной линии опухоли мочевого пузыря Т24, клеточной линии опухоли почек ACHN; клеточных линий опухоли яичника CaOV3, Ovar-3 и SKOV3, и отличающийся тем, что антигенсвязывающая конструкция конъюгирована с майтансином.
67. Способ по п. 62, отличающийся тем, что опухолевую клетку выбирают из клетки рака яичников с уровнем экспрессии HER2 2/3+ и амплификацией гена HER2, клетки трижды нег ативного рака молочной железы с уровнем экспрессии HER2 0+/1+; из клетки рака молочной железы (ER+) с уровнем экспрессии HER2 1+; клетки резистентного к трастузумабу рака молочной железы с уровнем экспрессии HER2 2+; клетки рака молочной железы (ER+) с уровнем экспрессии HER2+; или клетки рака молочной железы с уровнем экспрессии HER2 3+.
68. Способ получения конструкций по пп. 1-38, включающий культивирование клетки-хозяина в условиях, подходящих для экспрессии антигенсвязывающей конструкции, отличающийся тем что, указанная клетка-хозяин содержит полинуклеотид, кодирующий антигенсвязывающую конструкцию по пп. 1-38, и выделение указанной конструкции.
69. Выделенный полинуклеотид или набор выделенных полинуклеотидов, содержащий по меньшей мере одну нуклеотидную последовательность, которая кодирует по меньшей мере один полипептид антигенсвязывающей конструкции по пп. 1-38.
70. Полинуклеотид по п. 69, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид или набор полинуклеотидов представляет собой кДНК.
71. Полинуклеотид или набор выделенных полинуклеотидов, кодирующих v5019, V7091, v10000, v5020 или v6717.
72. Вектор или набор векторов, содержащий один или более полинуклеотидов или наборы полинуклеотидов по пп. 69-71.
73. Вектор или набор векторов, содержащий один или более полинуклеотидов или наборы полинуклеотидов по п. 72, выбранный из группы, состоящей из плазмиды, вирусного вектора, неэписомального вектора млекопитающего, экспрессирующего вектора и рекомбинантного экспрессирующего вектора.
74. Выделенная клетка, содержащая полинуклеотид или набор полинуклеотидов по пп. 69-71, или вектор, или набор векторов по п. 72 или 73.
75. Выделенная клетка по п. 74, представляющая собой гибридомную клетку, клетку яичников китайского хомячка (СНО) или клетку HEK293.
76. Набор, содержащий конструкцию по любому из пп. 1-38 и инструкции к применению.
77. Конструкция по п. 35, отличающаяся тем, что указанная конструкция является дефукозилированной.
Наверх