Новое биспецифическое антитело, связывающееся с tlr2 человека и tlr4 человека - заявка 2016134913 на патент на изобретение в РФ

1. Биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, содержащее:
1) вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, содержащую CDR1, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 31 до 35 SEQ ID NO: 4, CDR2, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 50 до 66 SEQ ID NO: 4, и CDR3, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 99 до 109 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR2 человека, содержащую CDR1, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 24 до 39 SEQ ID NO: 6, CDR2, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 55 до 61 SEQ ID NO: 6, и CDR3, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 94 до 102 SEQ ID NO: 6; и
2) вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR4 человека, содержащую CDR1, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 521 до 525 SEQ ID NO: 4, CDR2, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 540 до 556 SEQ ID NO: 4, и CDR3, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 589 до 598 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR4 человека, содержащую CDR1, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 648 до 658 SEQ ID NO: 4, CDR2, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 674 до 680 SEQ ID NO: 4, и CDR3, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 713 до 721 SEQ ID NO: 4.
2. Биспецифическое антитело по п. 1, которое выбрано из указанных ниже (1) или (2):
(1) биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, содержащее
1) вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 120 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 113 SEQ ID NO: 6, и
2) вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR4 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 609 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR4 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 625 до 732 SEQ ID NO: 4; или
(2) биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, которое представляет собой биспецифическое антитело, получаемое на основе посттрансляционной модификации биспецифического антитела (1).
3. Биспецифическое антитело по п. 2, которое выбрано из указанных ниже (1) или (2):
(1) биспецифическое антитело, содержащее антитело к TLR2 человека и фрагмент антитела к TLR4 человека, где
антитело к TLR2 человека представляет собой антитело IgG и содержит вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 120 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 113 SEQ ID NO: 6, и
фрагмент антитела к TLR4 человека представляет собой одноцепочечный фрагмент из вариабельных областей (scFv) и содержит вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR4 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 609 SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR4 человека, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 625 до 732 SEQ ID NO: 4; или
(2) биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, которое представляет собой биспецифическое антитело, получаемое на основе посттрансляционной модификации биспецифического антитела (1).
4. Биспецифическое антитело по п. 3, которое выбрано из указанных ниже (1) или (2):
(1) биспецифическое антитело, содержащее антитело к TLR2 человека и фрагмент антитела к TLR4 человека где антитело к TLR2 человека представляет собой антитело IgG и содержит тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 450 SEQ ID NO: 4, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6, фрагмент антитела к TLR4 человека представляет собой scFv, состоящий из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 732 SEQ ID NO: 4, и N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека посредством линкера связан с C-концом каждой тяжелой цепи антитела к TLR2 человека; или
(2) биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, которое представляет собой биспецифическое антитело, получаемое на основе посттрансляционной модификации биспецифического антитела (1).
5. Биспецифическое антитело по п. 3, которое содержит антитело к TLR2 человека и фрагмент антитела к TLR4 человека, где антитело к TLR2 человека представляет собой антитело IgG и содержит тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 450 SEQ ID NO: 4, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6, фрагмент антитела к TLR4 человека представляет собой scFv, состоящий из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 732 SEQ ID NO: 4, и N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека посредством линкера связан с C-концом каждой тяжелой цепи антитела к TLR2 человека.
6. Полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, вариабельную область тяжелой цепи антитела к TLR4 человека и вариабельную область легкой цепи антитела к TLR4 человека из биспецифического антитела по п. 2.
7. Полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую вариабельную область легкой цепи антитела к TLR2 человека из биспецифического антитела по п. 2.
8. Полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую слияние, где N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека посредством линкера связан с C-концом тяжелой цепи антитела к TLR2 человека из биспецифического антитела по п. 5.
9. Экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид по п. 6.
10. Экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид по п. 7.
11. Экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид по пп. 6 и 7.
12. Экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид по п. 8.
13. Экспрессирующий вектор, содержащий полинуклеотид по пп. 7 и 8.
14. Клетка-хозяин, выбранная из группы, состоящей из указанных ниже (a)-(d):
(a) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую слияние тяжелой цепи антитела к TLR2 человека-scFv антитела к TLR4 человека, в котором N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека, состоящий из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 732 SEQ ID NO: 4, посредством линкера связан с C-концом тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, состоящей из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 450 SEQ ID NO: 4, и экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую легкую цепь антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6;
(b) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую слияние тяжелой цепи антитела к TLR2 человека-scFv антитела к TLR4 человека, в котором N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека, состоящий из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 732 SEQ ID NO: 4, посредством линкера связан с C-концом тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, состоящего из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 450 SEQ ID NO: 4, и полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую легкую цепь антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6;
(c) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую слияние тяжелой цепи антитела к TLR2 человека-scFv антитела к TLR4 человека, в котором N-конец фрагмента антитела к TLR4 человека, состоящий из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 491 до 732 SEQ ID NO: 4, посредством линкера связан с C-концом тяжелой цепи антитела к TLR2 человека, состоящего из аминокислотной последовательности из аминокислот с номерами от 1 до 450 SEQ ID NO: 4; и
(d) клетка-хозяин, трансформированная экспрессирующим вектором, содержащим полинуклеотид, содержащий последовательность оснований, кодирующую легкую цепь антитела к TLR2 человека, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 6.
15. Способ получения биспецифического антитела, связывающегося с TLR2 человека и TLR4 человека, включающий культивирование клеток-хозяев по п. 14 с экспрессией биспецифического антитела, связывающегося с TLR2 человека и TLR4 человека.
16. Биспецифическое антитело, связывающееся с TLR2 человека и TLR4 человека, получаемое способом по п. 15.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифическое
антитело по п. 1 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
Наверх