Химерный антигенный рецептор - заявка 2016138422 на патент на изобретение в РФ

1. Химерный антигенный рецептор (CAR), который содержит дисиалоганглиозид (GD2)-связывающий домен, который содержит
a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющие комплементарность области (CDR) со следующими последовательностями:
CDR1 - SYNIH (SEQ ID № 1);
CDR2 - VIWAGGSTNYNSALMS (SEQ ID № 2)
CDR3 - RSDDYSWFAY (SEQ ID № 3); и
b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую CDR со следующими последовательностями:
CDR1 - RASSSVSSSYLH (SEQ ID № 4);
CDR2 - STSNLAS (SEQ ID № 5)
CDR3 - QQYSGYPIT (SEQ ID № 6).
2. CAR по п.1, в котором GD2-связывающий домен содержит VH домен, который имеет последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 9 или SEQ ID № 10; или VL домен, который имеет последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 11 или SEQ ID № 12, или ее вариант, обладающий по меньшей мере 90% идентичностью последовательностей, который сохраняет способность i) связывать GD2 и ii) индуцировать передачу T-клеточных сигналов.
3. CAR по п.1, в котором GD2-связывающий домен содержит последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 7 или SEQ ID № 8, или ее вариант, обладающий по меньшей мере 90% идентичностью последовательностей, который сохраняет способность i) связывать GD2 и ii) индуцировать передачу T-клеточных сигналов.
4. CAR по п.1, который содержит трансмембранный домен, который содержит последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 13, или ее вариант, обладающий по меньшей мере 80% идентичностью последовательностей.
5. CAR по п.1, в котором GD2-связывающий домен и трансмембранный домен соединены с помощью спейсера.
6. CAR по п.4, в котором спейсер содержит одно из следующего: Fc домен IgG1 человека; шарнир IgG1; шарнир IgG1-стебель CD8; или стебель CD8.
7. CAR по п.6, в котором спейсер содержит шарнир IgG1-стебель CD8 или стебель CD8.
8. CAR по п.6, в котором спейсер содержит Fc домен IgG1 или его вариант.
9. CAR по п.8, в котором спейсер содержит Fc домен IgG1, который содержит последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 23 или SEQ ID № 24, или ее вариант, обладающий по меньшей мере 80% идентичностью последовательностей.
10. CAR по п.1, который также содержит внутриклеточный домен передачи T-клеточных сигналов.
11. CAR по п.10, в котором внутриклеточный домен передачи T-клеточных сигналов содержит один или несколько из следующих эндодоменов: эндодомен CD28; эндодомен OX40 и CD3-ζ.
12. CAR по п.11, в котором внутриклеточный домен передачи T-клеточных сигналов содержит все из следующих эндодоменов: эндодомен CD28; эндодомен OX40 и CD3-ζ.
13. CAR по п.1, который содержит последовательность, представленную в виде любой из SEQ ID №№ 26-35, или ее вариант, который обладает по меньшей мере 80% идентичностью последовательностей, но сохраняет способность i) связывать GD2 и ii) индуцировать передачу T-клеточных сигналов.
14. Последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует CAR по любому из пп. 1-13.
15. Последовательность нуклеиновой кислоты по п.14, в которой оптимизируют кодоны.
16. Последовательность нуклеиновой кислоты по п.14, которая содержит последовательность, которая представлена в виде SEQ ID № 25, или ее вариант, обладающий по меньшей мере 90% идентичностью последовательностей.
17. Нуклеиновая кислота по п.14, которая также кодирует ген самоубийства.
18. Вектор, который содержит последовательность нуклеиновой кислоты по любому из пп. 14-17.
19. T-клетка, которая экспрессирует CAR по любому из пп. 1-13.
20. T-клетка, которая совместно экспрессирует CAR по любому из пп. 1-13 и ген самоубийства.
21. T-клетка по п.20, в которой ген самоубийства представляет собой iCasp9 или RQR8.
22. Способ получения T-клетки по любому из пп. 19-21, который включает стадию введения нуклеиновой кислоты по любому из пп. 14-17 в T-клетку.
23. Фармацевтическая композиция, которая содержит T-клетку по любому из пп. 19-21, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом.
24. Способ лечения злокачественной опухоли, который включает стадию введения T-клетки по любому из пп. 19-21 пациенту.
25. Способ по п.24, в котором злокачественная опухоль представляет собой нейробластому.
26. T-клетка по любому из пп. 19-21 для применения в лечении злокачественной опухоли.
27. Применение T-клетки по любому из пп. 19-21 в получении лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли.
Наверх