Циклические аналоги апелина - заявка 2016139223 на патент на изобретение в РФ

1. Циклический аналог апелина общей формулы Х1-Х2-Х3-Х4-Х5-Х6-Х7-Х8-Х9-Х10-Х11-Х12-Х13-Х14, содержащий один лантиониновый мостик структуры Ala-S-Ala или один метиллантиониновый мостик структуры Abu-S-Ala или Ala-S-Abu, где
X1 представляет собой N-конец полипептида и либо отсутствует, либо представляет собой Lys-Phe-Arg-Arg;
Х2 либо отсутствует, либо выбран из pGlu, Gln и Ala;
Х3 представляет собой Arg или Ala;
Х4 представляет собой Pro, Ala, Pro-(me)Lan, Pro-Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X5 представляет собой Arg, Ala, (me)Lan, Dhb, Arg-(me)Lan, Arg-Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X6 представляет собой Leu, Ala, (me)Lan, Dhb, Leu-(me)Lan, Leu-Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X7 представляет собой Ala, (me)Lan, Dhb, Ala-(me)Lan, Ala-Dhb, Dhb-Ala или (me)Lan-Ala;
X8 представляет собой His, Ala, (me)Lan, Dhb, His-(me)Lan, His-Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X9 представляет собой Lys, Ala, (me)Lan, Dhb, Lys-(me)Lan, Lys-Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X10 представляет собой Gly, Ala, (me)Lan, Dhb, Ala-Dhb или Ala-(me)Lan;
X11 представляет собой Pro, Ala, (me)Lan, Pro-Lan или Ala-(me)Lan;
X12 представляет собой Met, Ala, (me)Lan, Met-(me)Lan или Ala-(me)Lan;
X13 либо отсутствует, либо выбран из Pro, Dhb, (me)Lan, Pro-(me)Lan и Ala-(me)Lan;
Х14 представляет собой С-конец и либо отсутствует, либо выбран из Phe и Ala в том случае, если X13 не отсутствует;
где
Abu означает аминомасляную кислоту, a Dhb означает дегидробутирин;
(me)Lan означает Lan или meLan, где Lan обозначает N-или С-концевую половину лантионина (Ala-S-Ala), a meLan обозначает N- или С-концевую половину метиллантионина (Abu-S-Ala или Ala-S-Abu);
при условии, что:
(i) аналог содержит до двух остатков Ala;
(ii) последовательность от Х4 до X13 содержит одну пару meLan или одну пару Lan, которые вместе образуют (метил)лантиониновый мостик; и
(iii) при этом указанный (метил)лантиониновый мостик имеет размер i, i+3; i, i+4, i, i+5, или i, i+6, предпочтительно i, i+3 или i, i+4;
или его амид, сложный эфир или соль.
2. Аналог апелина по п. 1, где X1 отсутствует.
3. Аналог апелина по п. 1 или 2, где Х2 представляет собой pGlu.
4. Аналог апелина по любому из пп. 1-3, где Х2-Х3-Х4-Х5-Х6 представляет собой Gln-Arg-Pro-Arg-Leu или pGlu-Arg-Pro-Arg-Leu.
5. Аналог апелина по любому из пп. 1-3, где Х5, Х6, Х7 или Х9 представляет собой (me)Lan.
6. Аналог апелина по любому из пп. 1-5, где последовательность Х7-Х8-Х9-Х10 представляет собой (me)Lan-His-Lys-(me)Lan, предпочтительно Lan-His-Lys-Lan, или где последовательность Х7-Х8-Х9-Х10 представляет собой (me)Lan-His-Lys-(me)Lan-Gly, предпочтительно Lan-His-Lys-Lan-Gly.
7. Аналог апелина по любому из пп. 1-3, где последовательность Х4-Х5-Х6-Х7-Х8 представляет собой Pro-(me)Lan-Arg-Leu-Ala-(me)Lan или Pro-Arg-(me)Lan-Arg Leu-Ala-(me)Lan.
8. Аналог апелина по любому из предыдущих пунктов, где последовательность X11-Х12-Х13-X14 представляет собой (me)Lan-Met-Pro-Phe.
9. Аналог апелина по п. 1, выбранный из группы, состоящей из: pERPmeLanRLAmeLanKGPMPF, pERPLanRLALanKGPMPF, pERPRmeLanLAmeLanKGPMPF, pERPLanLAHLanGPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanPMdhbF, pERPRLLanAHKLanPMPF, pERPRLLanAHKLanPMPF, pERPRLLanAHKLanGPMPF, pERPRLLanAHKLanGPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanGPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanGPMPF, pERPRLmeLanHKmeLanGPMPF-NH2, pERPRLmeLanHKmeLanGPMP, pERPRLLanHKLanGPMPF, pERPRLmeLanHKGmeLanPMPF, pERPRLLanHKGLanPMPF, pERPRLLanHKGLanPMPF, pERPRLAHLanGPMLanF, pERPRLLanHKGLanMPF, pERPRLmeLanHKGmeLanMPF, pERPRLLanHKGPLanPF, pERPRLLanHKGPLanMPF, KFRRQRPRLmeLanHKmeLanPMPF, KFRRQRPRLmeLanHKmeLanGPMPF, KFRRQRPRLLanAHKLanPMPF, KFRRQRPRLLanAHKLanGPMPF, KFRRQRPRLLanHKGLanPMPF, KFRRQRPRLAHLanGPMLanF, pERPRLLanHKGPMLanF и pERPRLLanHKGPMLanPF.
10. Аналог апелина по любому из пп. 1-9, способный индуцировать выработку сАМР в клетках, экспрессирующих рецептор апелина (APJ), с ЕС50, составляющей 0,1-200 нМ предпочтительно 0,1-5 нМ.
11. Аналог апелина по любому из пп. 1-10, характеризующийся сниженной интернализацией рецептора апелина, связанной с бета-аррестином, по сравнению с нативным апелином-13.
12. Аналог апелина по любому из пп. 1-11, демонстрирующий стабильность (Т50) в плазме крови крысы, составляющую по меньшей мере 3 часа, предпочтительно по меньшей мере 6 часов, более предпочтительно по меньшей мере 8 часов.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере один аналог апелина по любому из пп. 1-12.
14. Аналог апелина по любому из пп. 1-12 для применения в качестве лекарственного препарата.
15. Аналог апелина по любому из пп. 1-12 для применения в способе лечения состояния, связанного с измененным водным балансом, стресс-индуцированного расстройства, такого как тревожность и депрессия, сердечно-сосудистого нарушения или метаболического нарушения, предпочтительно сердечно-сосудистого нарушения.
16. Способ получения аналога апелина по любому из пп. 1-12, включающий:
a) получение клетки-хозяина, содержащей:
- молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую первый фрагмент нуклеиновой кислоты, кодирующий N-концевой лидерный пептид, встречающийся у пептида-предшественника лантипептида/лантибиотика, и второй фрагмент нуклеиновой кислоты, кодирующий аналог пептида, при этом указанные первый и второй фрагменты находятся в одной открытой рамке считывания указанной молекулы нуклеиновой кислоты;
- последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую фермент, способный осуществлять дегидратацию серина и/или треонина;
- необязательно последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую транспортный белок;
b) обеспечение возможности трансляции указанной первой нуклеиновой кислоты; а также
c) сбор указанного аналога пептида.
17. Способ по п. 16, включающий замыкание кольца химическими или ферментативными средствами, предпочтительно ферментативными средствами.
18. Способ по п. 16 или 17, где второй фрагмент нуклеиновой кислоты кодирует полипептид, выбранный из группы, состоящей из QRPTRLACKGPMPF, QRPSRLACKGPMPF, QRPRTLACKGPMPF, QRPSLAHCGPMPF, QRPRLTHKCPMPF, QRPRLSAHKCPMPF, QRPRLSAHKCPMPF, QRPRLSAHKCGPMPF, QRPRLSAHKCGPMPF, QRPRLTHKCGPMPF, QRPRLTHKCGPMPF-NH2, QRPRLTHKCGPMP, QRPRLSHKCGPMPF, QRPRLTHKGCPMPF, QRPRLSHKGCPMPF, QRPRLSHKGCPMPF, QRPRLAHSGPMCF, QRPRLSHKGCMPF, QRPRLTHKGCMPF, QRPRLSHKGPCPF, QRPRLSHKGPCMPF, KFRRQRPRLTHKCPMPF, KFRRQRPRLTHKCGPMPF, KFRRQRPRLSAHKCPMPF, KFRRQRPRLSAHKCGPMPF, KFRRQRPRLSHKGCPMPF, KFRRQRPRLAHSGPMCF, QRPRLSHKGPMCF и QRPRLSHKGPMCPF.
Наверх