Связывающие элементы к фно-альфа - заявка 2016141561 на патент на изобретение в РФ

1. Связывающий элемент, обладающий специфичностью связывания к ФНО-альфа, включающий:
(i) по меньшей мере одну из вариабельных последовательностей CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3 тяжелой цепи, представленных в SEQ ID No: 6, 7 и 8; и/или
(ii) по меньшей мере одну из вариабельных последовательностей CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3 легкой цепи, представленных в SEQ ID No: 3, 4 и 5;
или его вариант.
2. Связывающий элемент по п.1, где связывающий элемент имеет IC50 в отношении ФНО-альфа человека ниже 50 пМ, где связывающий элемент необязательно является моновалентным связывающим элементом, таким как scFv.
3. Связывающий элемент по п.1 или 2, являющийся гуманизированным.
4. Связывающий элемент по любому из пп.1-3, включающий:
(i) вариабельную легкую цепь, обладающую по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID No 1; и/или
(ii) вариабельную легкую цепь, обладающую по меньшей мере 90% идентичностью последовательности с SEQ ID No 2.
5. Связывающий элемент по любому из пп.1-4, дополнительно включающий линкерную последовательность, где линкерная последовательность является последовательностью, представленной в SEQ ID No: 10, или его вариант.
6. Связывающий элемент по п.5, включающий SEQ ID No 9.
7. Связывающий элемент по любому из пп.1-6, где вариабельная тяжелая цепь дополнительно включает по меньшей мере один из следующих остатков:
(i) Серин (S) в аминокислотном положении 12 тяжелой цепи (согласно нумерации AHo);
(ii) Серин (S) или Треонин (T) в аминокислотном положении 103 тяжелой цепи (согласно нумерации AHo); и/или
(iii) Серин (S) или Треонин (T) в аминокислотном положении 144 тяжелой цепи (согласно нумерации AHo).
8. Связывающий элемент по любому из пп.1-7, который представляет собой или включает:
(i) фрагмент антитела, такой как Fab, Fabʹ, F(ab)ʹ2, scFv, Fv фрагмент, нанотело, VHH или минимальную распознающую единицу;
(ii) молекулу полноразмерного иммуноглобулина; и/или
(iii) неиммуноглобулиновый каркас, такой как аффитело, молекулу аффилина, аднектин, мутеин липокалина, дарпин, ноттин, домен Куниц-типа, авимер, тетранектин или транс-тело.
9. Связывающий элемент по любому из пп.1-8, являющийся моновалентным или поливалентным, где связывающий элемент необязательно является биспецифическим, предпочтительно диателом, одноцепочечным диателом или тандемным scFv.
10. Связывающий элемент по любому из пп.1-9, остающийся по меньшей мере на 93% мономерным после инкубирования в течение 1 недели при 37°C в концентрации 10 мг/мл в PBS, pH7,2.
11. Связывающий элемент по любому из пп.1-10, являющийся химически или биологически модифицированным.
12. Связывающий элемент по п.11, являющийся гликозилированным, ПЭГилированным или ГЭКилированным.
13. Связывающий элемент, специфично связывающийся с ФНО-альфа, где связывающий элемент обладает активностью IC50 в отношении ФНО-альфа человека ниже 100 пМ, согласно измерению по ингибированию ФНО-альфа-индуцированной цитотоксичности в клетках PK-15, где связывающий элемент перекрестно блокирует специфичное связывание связывающего элемента по любому из пп.1-12 с ФНО-альфа.
14. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, включающая последовательность, кодирующую связывающий элемент по любому из пп.1-13.
15. Вектор, включающий последовательность молекулы нуклеиновой кислоты по п.14.
16. Клетка-хозяин, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по п.14 или вектор по п.15.
17. Композиция, включающая связывающий элемент по любому из пп.1-13, молекулу нуклеиновой кислоты по п.14, вектор по п.15 или клетку-хозяин по п.16; а также подходящий носитель, разбавитель или эксципиент.
18. Композиция по п.17, являющаяся косметической, диагностической или фармацевтической композицией.
19. Композиция по п.18, являющаяся фармацевтической композицией, причем носитель является фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или эксципиентом.
20. Композиция по п.19, находящаяся в форме, подходящей для парентерального, перорального, ректального, системного, урогенитального, наружного, интравитреального, интраокулярного, ушного, интраназального, дермального, подъязычного или буккального введения.
21. Способ лечения заболевания, опосредованного ФНО-альфа, включающий введение пациентпациенту фармацевтической композиции по любому из пп.18-20.
22. Способ по п.21, где заболевание, опосредованное ФНО-альфа, является по меньшей мере одним из пролиферативной диабетической ретинопатии, подагрического артрита, острого подагрического артрита и хронического подагрического артрита, синдрома Шницлера, системного ювенильного идиопатического артрита, ревматоидного артрита, крапивницы, васкулита, диабета 1-го типа, диабета 2-го типа, рецидивирующего многоочагового остеомиелита, рецидивирующего полихондрита, криопирин-ассоциированного периодического синдрома (КАПС), болезни Бехчета, семейной средиземноморской лихорадки, хронической обструктивной болезни легких, ревматической полимиалгии, NALP3-мутаций, гангренозной пиодермии, хронической идиопатической крапивницы, остеоартроза, влажной формы возрастной макулодистрофии, синдрома сухого глаза, псориаза, синовит-акне-пустулез-гиперостоз-остеит синдрома, синдрома активации макрофагов, периодической болезни, аденита, фарингита, синдрома афтозных язв, болезни Стилла взрослых, дефицита мевалонат-киназы, увеита, воспалительного заболевания кишечника, атеросклероза, ФНО-рецептор-ассоциированного периодического синдрома (TRAPS), анкилозирующего спондилита, гнойного гидраденита, псориаза и обыкновенных угрей.
23. Связывающий элемент по любому из пп.1-13, молекула нуклеиновой кислоты по п.14, вектор по п.15 или клетка-хозяин по п.16 для применения в лечении, профилактике или задержке прогрессии заболевания, опосредованного ФНО-альфа.
24. Связывающий элемент, молекула нуклеиновой кислоты, вектор или клетка-хозяин для применения по п.23, где заболеванием, опосредованным ФНО-альфа, является пролиферативная диабетическая ретинопатия, подагрический артрит, острый подагрический артрит и хронический подагрический артрит, синдром Шницлера, системный ювенильный идиопатический артрит, ревматоидный артрит, крапивница, васкулит, диабет 1-го типа, диабет 2-го типа, рецидивирующий многоочаговый остеомиелит, рецидивирующий полихондрит, криопирин-ассоциированный периодический синдром (КАПС), болезнь Бехчета, семейная средиземноморская лихорадка, хроническая обструктивная болезнь легких, ревматическая полимиалгия, NALP3-мутации, гангренозная пиодермия, хроническая идиопатическая крапивница, остеоартроз, влажная форма возрастной макулодистрофии, синдром сухого глаза, псориаз, синовит-акне-пустулез-гиперостоз-остеит синдром, синдром активации макрофагов, периодическая болезнь, аденит, фарингит, синдром афтозных язв, болезнь Стилла взрослых, дефицит мевалонаткиназы, увеит, воспалительное заболевание кишечника, атеросклероз, ФНО-рецептор-ассоциированный периодический синдром (TRAPS), анкилозирующий спондилит, гнойный гидраденит, псориаз и/или обыкновенные угри.
25. Связывающий элемент по любому из пп.1-13, молекула нуклеиновой кислоты по п.14, вектор по п.15 или клетка-хозяин по п.16:
(i) для применения в качестве лекарственного средства, в особенности при лечении заболевания, опосредованного ФНО-альфа;
(ii) для применения в диагностике;
(iii) для применения в косметике; и/или
(iv) для обнаружения.
26. Способ получения связывающего элемента по любому из пп.1-13, включающий:
(i) культивирование клетки-хозяина по п.16, что обеспечивает экспрессию связывающего элемента;
(ii) выделение связывающего элемента; и
(iii) необязательно, очистку связывающего элемента.
27. Способ получения связывающего элемента по любому из пп.1-13, включающий:
(a) контакт бесклеточной системы экспрессии с матрицей продукции нуклеиновой кислоты, причем матрица продукции нуклеиновой кислоты кодирует связывающий элемент по любому из пп.1-13;
(b) обеспечение протекания транскрипции и трансляции матрицы продукции нуклеиновой кислоты, что обеспечивает образование реакционной смеси;
(c) выделение связывающего элемента из реакционной смеси; и
(d) необязательно, очистку связывающего элемента.
28. Способ получения связывающего элемента по любому из пп.1-13, где получение связывающего элемента включает стадию химического синтеза.
29. Способ по п.26 или 27, где способ включает стадию химического синтеза.
30. Способ обнаружения присутствия ФНО-альфа в биологическом образце, включающий:
(i) контакт биологического образца со связывающим элементом по любому из пп.1-13 при условиях, обеспечивающих специфичное связывание связывающего элемента с ФНО-альфа, и
(ii) обнаружение, образовался ли комплекс между связывающим элементом и ФНО-альфа.
31. Способ по п.30, являющийся способом in vitro или способом in vivo.
32. Способ по п.30 или 31, где биологический образец имеет человеческое происхождение.
33. Способ по любому из пп.30-32, где биологический образец является по меньшей мере одним из пробы крови, пробы мочи, пробы спинномозговой жидкости, биоптата и пробы лимфы.
34. Способ по любому из пп.30-33, где способ является способом отбора пациентов, соответствующих критериям терапии связывающим элементом по любому из пп.1-13.
35. Набор, включающий связывающий элемент по любому из пп.1-13 вместе с упакованной комбинацией реактивов и инструкций.
Наверх