Трифункциональная антигенсвязывающая молекула - заявка 2016138347 на патент на изобретение в РФ

1. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула, при этом указанная антигенсвязывающая молекула является по меньшей мере четырехвалентной и содержит антигенсвязывающий сайт, обладающий специфичностью против первого эпитопа антигена, антигенсвязывающий сайт, обладающий специфичностью против второго эпитопа антигена, и два антигенсвязывающих сайта, обладающих специфичностью против третьего эпитопа антигена.
2. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 1, отличающаяся тем, что каждый из указанных антигенсвязывающих сайтов состоит из пары VH/VL, при этом домены VH и VL первой пары VH/VL нековалентно связаны друг с другом и каждый из указанных нековалентно связанных доменов VH и VL связан с другим доменом VH или VL второй пары VH/VL, расположенной смежно с указанной первой парой VH/VL, посредством пептидного линкера или пептидной связи.
3. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 2, отличающаяся тем, что домен VH пары VH/VL связан пептидным линкером или пептидной связью с доменом VH пары VH/VL и домен VL указанной первой пары VH/VL связан пептидным линкером или пептидной связью с доменом VL указанной второй пары VH/VL.
4. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула согласно п. 1, отличающаяся тем, что указанная молекула представляет собой антигенсвязывающий полипептидный димер, включающий первый полипептид и второй полипептид, каждый из полипептидов имеет по меньшей мере четыре вариабельных домена антитела, соединенных друг за другом, при этом
(а) указанный первый полипептид содержит первый и второй вариабельные домены антитела, соединенные друг с другом линкером из приблизительно 12 или менее аминокислотных остатков, и антигенсвязывающую одноцепочечную Fv-единицу, имеющую вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH), соединенный с вариабельным доменом легкой цепи антитела (VL), указанные вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) и вариабельный домен легкой цепи антитела (VL) способны ассоциировать с образованием первого антигенсвязывающего сайта, при этом указанный первый или второй вариабельный домен антитела соединен с указанной антигенсвязывающей одноцепочечной Fv-единицей пептидным линкером;
(b) указанный второй полипептид содержит первый и второй вариабельные домены антитела, соединенные друг с другом линкером из приблизительно 12 или менее аминокислотных остатков, при этом указанные первый и второй вариабельные домены антитела и антигенсвязывающая одноцепочечная Fv-единица, имеющая вариабельный домен легкой цепи антитела (VL), соединенный с вариабельным доменом тяжелой цепи антитела (VH), указанные вариабельный домен легкой цепи антитела (VL) и вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) способны ассоциировать с образованием второго антигенсвязывающего сайта, и указанный первый или второй вариабельный домен антитела соединен с указанной антигенсвязывающей одноцепочечной Fv-единицей пептидным линкером;
(c) указанный первый вариабельный домен антитела первого полипептида ассоциирует со вторым вариабельным доменом антитела второго полипептида с образованием третьего антигенсвязывающего сайта;
(d) указанный второй вариабельный домен антитела первого полипептида ассоциирует с первым вариабельным доменом антитела второго полипептида с образованием четвертого антигенсвязывающего сайта; и
(e) два из указанных четырех антигенсвязывающих сайтов специфичны к одному и тому же антигену.
5. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4, отличающаяся тем, что
(a) указанный первый полипептид содержит первый и второй вариабельные домены тяжелой цепи антитела (VH), соединенные друг с другом линкером из приблизительно 12 или менее аминокислотных остатков, и антигенсвязывающую одноцепочечную Fv-единицу, имеющую третий вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH), соединенный с вариабельным доменом легкой цепи антитела (VL), указанные третий вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) и вариабельный домен легкой цепи антитела (VL) способны ассоциировать с образованием первого антигенсвязывающего сайта, при этом указанные первый или второй вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) соединен с указанной антигенсвязывающей одноцепочечной Fv-единицей пептидным линкером;
(b) указанный второй полипептид содержит первый и второй вариабельные домены легкой цепи антитела (VL), соединенные друг с другом линкером из приблизительно 12 или менее аминокислотных остатков, и антигенсвязывающую одноцепочечную Fv-единицу, имеющую третий вариабельный домен легкой цепи антитела (VL), соединенный с вариабельным доменом тяжелой цепи антитела (VH), указанные третий вариабельный домен легкой цепи антитела (VL) и вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) способны ассоциировать с образованием второго антигенсвязывающего сайта, и указанный первый или второй вариабельный домен антитела, при этом второй вариабельный домен легкой цепи антитела (VL) соединен с антигенсвязывающей одноцепочечной Fv-единицей пептидным линкером;
(c) указанный первый вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) первого полипептида ассоциирует со вторым вариабельным доменом легкой цепи антитела (VL) второго полипептида с образованием третьего антигенсвязывающего сайта;
(d) указанный второй вариабельный домен тяжелой цепи антитела (VH) первого полипептида ассоциирует с первым вариабельным доменом легкой цепи антитела (VL) второго полипептида с образованием четвертого антигенсвязывающего домена; и
(e) два из указанных четырех антигенсвязывающих сайтов специфичны к одному и тому же антигену.
6. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4 или 5, отличающаяся тем, что указанные первый и второй вариабельные домены первого полипептида и указанные первый и второй вариабельные домены второго полипептида соединены линкером, имеющим от 3 до 9 аминокислотных остатков.
7. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4 или 5, отличающаяся тем, что указанные второй вариабельный домен и одноцепочечная Fv-единица первого полипептида и указанные второй вариабельный домен и одноцепочечная Fv-единица второго полипептида соединены линкером, имеющим от 2 до 35 аминокислотных остатков.
8. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4 или 5, отличающаяся тем, что указанные вариабельный домен тяжелой цепи и вариабельный домен легкой цепи одноцепочечной Fv-единицы первого полипептида и указанные вариабельный домен легкой цепи и вариабельный домен тяжелой цепи одноцепочечной Fv-единицы второго полипептида соединены линкером, имеющим 12 или более аминокислотных остатков.
9. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4 или 5, отличающаяся тем, что указанные первый и второй антигенсвязывающие сайты двух одноцепочечных Fv-единиц специфичны к одному и тому же антигену.
10. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 4 или 5, отличающаяся тем, что указанные третий и четвертый антигенсвязывающие сайты, образованные посредством ассоциации между первым и вторым полипептидом, специфичны к одному и тому же антигену.
11. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что два указанных антигенсвязывающих сайта, специфичных к одному и тому же антигену, специфичны к антигену, презентированному на Т-клетке или клетке-естественном киллере (NK-клетке).
12. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 11, отличающаяся тем, что указанный антиген представляет собой CD3, CD16 или CD16A.
13. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 11, отличающаяся тем, что два других связывающих сайта специфичны к двум разным антигенам на одной и той же клетке.
14. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 13, отличающаяся тем, что указанная клетка представляет собой клетку опухоли.
15. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по п. 14, отличающаяся тем, что два разных антигена выбраны из группы, состоящей из CD19, CD20, CD26, CD29, CD30, CD33, CD200, CD267, рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), EGFRvIII, HER2, HER3, рецептора инсулиноподобного фактора роста (IGFR), IGF-1R, молекулы адгезии эпителиальных клеток (Ер-САМ), плацентарной щелочной фосфатазы (PLAP), антигена Томсена-Фриденрайха (TF), MUC-1 (муцина), CD5, альфа-рецептора ИЛ-4 (IL4-R альфа), рецептора ИЛ-13 (IL13-R), высокоаффинного рецептора IgE I типа (FcεRI) и IgE, gpA33, комплексов главного комплекса гистосовместимости класса I (MHCI) с пептидом.
16. Триспецифичная антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-5, отличающаяся тем, что первый антигенсвязывающий сайт и второй антигенсвязывающий сайт являются специфичными к двум разным эпитопам антигенов, презентированным на клетках-естественных киллерах (NK-клетках).
17. Вектор для экспрессии триспецифичной антигенсвязывающей молекулы, кодирующий антигенсвязывающую молекулу по любому из пп. 1-16.
18. Клетка-хозяин для получения триспецифичной антигенсвязывающей молекулы, трансформированная вектором по п. 17.
19. Применение триспецифичной антигенсвязывающей молекулы по п. 14 или 15 в терапии опухолей.
Наверх