Гуманизированные животные по с5 и с3 - заявка 2016146390 на патент на изобретение в РФ

1. Грызун, содержащий в эндогенном локусе С5 грызуна замену последовательности гена грызуна, кодирующей экзон гена С5, на последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей, по меньшей мере, один экзон гена С5 человека с образованием модифицированного гена С5, где экспрессия модифицированного гена С5 находится под контролем регуляторных элементов грызуна в эндогенном локусе С5 грызуна, в котором ген С5 человека, кодирующий белок С5 человека, содержит со 2 экзона по 41 экзон гена С5 человека.
2. Грызун по п. 1, в котором грызун представляет собой мышь или крысу.
3. Грызун по п. 1 или 2, в котором грызун представляет собой мышь, которая неспособна экспрессировать белок С5 мыши.
4. Грызун по любому из пп. 1-3, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С3 мыши, кодируемый эндогенным геном С3 мыши.
5. Грызун по любому из пп. 1-4, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует человеческий или гуманизированный белок С3.
6. Грызун по п. 5, в котором мышь содержит замену в эндогенном локусе С3 мыши гена мыши, кодирующего белок С3 на ген С3 человека, кодирующий белок С3 человека.
7. Грызун по п. 5 или 6, в котором экспрессия гена С3 человека находится под контролем регуляторных элементов мыши в эндогенном локусе С3 мыши.
8. Грызун по любому из пп. 1-7, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С5 человека в сыворотке при концентрациях, по меньшей мере, приблизительно на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 или 200% от уровня белка С5 мыши, присутствующего в сыворотке мыши соответствующей возрастной группы, которая экспрессирует функциональный эндогенный белок С3, но не содержит указанной замены.
9. Грызун по любому из пп. 1-8, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С5 человека в сыворотке при концентрациях в диапазоне приблизительно от 10% до приблизительно 200%, в диапазоне приблизительно от 20% до приблизительно 150% или в диапазоне приблизительно от 30% до приблизительно 100% от уровня белка С5 мыши, присутствующего в сыворотке мыши соответствующей возрастной группы, которая экспрессирует функциональный эндогенный белок С5, но не содержит указанной замены.
10. Грызун по любому из пп. 1-9, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С5 человека в сыворотке при концентрации в диапазоне от приблизительно 10 мкг/мл до приблизительно 150 мкг/мл, в диапазоне от приблизительно 10 мкг/мл до приблизительно 125 мкг/мл или в диапазоне от приблизительно 15 мкг/мл до приблизительно 100 мкг/мл.
11. Грызун по любому из пп. 1-10, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует С5 человека в сыворотке при концентрации, по меньшей мере, приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125 или 150 мкг/мл.
12. Грызун, содержащий в эндогенном локусе С3 грызуна замену последовательности гена грызуна, кодирующей экзон гена С3 на последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующей, по меньшей мере, один экзон гена С3 человека с образованием модифицированного гена С3, где экспрессия модифицированного гена С3 находится под контролем регуляторных элементов грызуна в эндогенном локусе С3 грызуна.
13. Грызун по п. 12, в котором грызун представляет собой мышь или крысу.
14. Грызун по п. 12 или 13, в котором ген С3 человека, кодирующий белок С3 человека, содержит с 1 экзона по 41 экзон гена С3 человека.
15. Грызун по любому из пп. 12-14, в котором ген С3 человека, кодирующий белок С3 человека содержит со 2 экзона по 41 экзон гена С3 человека.
16. Грызун по любому из пп. 12-15, в котором грызун представляет собой мышь, которая неспособна экспрессировать белок С3 мыши.
17. Грызун по любому из пп. 12-16, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С5 мыши, кодируемый эндогенным геном С5 мыши.
18. Грызун по п. 17 или 18, в котором мышь экспрессирует человеческий или гуманизированный белок С5.
19. Грызун по п. 18, в котором мышь содержит замену в эндогенном локусе С5 мыши гена мыши, кодирующего белок С5 на ген С5 человека, кодирующий белок С5 человека.
20. Грызун по п. 18 или 19, в котором экспрессия гена С5 человека находится под контролем регуляторных элементов мыши в эндогенном локусе С5 мыши.
21. Грызун по любому из пп. 12-20, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С3 человека в сыворотке при концентрациях, по меньшей мере, приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 или 200% от уровня белка С3 мыши, присутствующего в сыворотке мыши соответствующей возрастной группы, которая экспрессирует функциональный эндогенный белок С3, но не содержит указанной замены.
22. Грызун по любому из пп. 12-21, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С3 человека в сыворотке при концентрациях в диапазоне приблизительно от 10% до приблизительно 200%, в диапазоне приблизительно от 20% до приблизительно 150%) или в диапазоне приблизительно от 30% до приблизительно 100% от уровня белка С3 мыши, присутствующего в сыворотке мыши соответствующей возрастной группы, которая экспрессирует функциональный эндогенный белок С3 мыши, но не содержит указанной замены.
23. Грызун по любому из пп. 12-22, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С3 человека в сыворотке при концентрации в диапазоне от приблизительно 100 мкг/мл до приблизительно 1500 мкг/мл, в диапазоне от приблизительно 200 мкг/мл до приблизительно 1250 мкг/мл или в диапазоне от приблизительно 300 мкг/мл до приблизительно 1000 мкг/мл.
24. Грызун по любому из пп. 12-23, в котором грызун представляет собой мышь, которая экспрессирует белок С3 человека в сыворотке при концентрации, по меньшей мере, приблизительно 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1250 или 1500 мкг/мл.
25. Способ получения гуманизированного грызуна, включающий замену последовательности гена С5 грызуна, кодирующей белок С5 грызуна, на последовательность гена С5 человека, содержащую один или несколько экзонов последовательности гена С5 человека, кодирующей человеческий или гуманизированный белок С5, где замена происходит в эндогенном локусе С5 грызуна и последовательность гена С5 человека, содержащая один или несколько экзонов последовательности гена С5 человека, кодирующего человеческий или гуманизированный белок С5, функционально связана с регуляторными элементами или последовательностями грызуна в эндогенном локусе С5 грызуна, где регуляторные элементы или последовательности грызуна происходят из мыши или крысы.
26. Способ по п. 25, в котором грызун представляет собой мышь или крысу.
27. Способ по п. 25 или 26, в котором регуляторные элементы или последовательности грызуна являются эндогенными регуляторными элементами или последовательностями грызуна в локусе С5 грызуна.
28. Способ по любому из пп. 25-27, в котором последовательность гена С5 человека, заменяющая последовательность гена С5 грызуна, содержит, по меньшей мере, один экзон последовательности гена С5 человека.
29. Способ по п. 28, в котором последовательность гена С5 человека, заменяющая последовательность гена С5 грызуна, содержит, по меньшей мере, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 или 40 экзонов последовательности гена С5 человека.
30. Способ по п. 28 или 29, в котором последовательность гена С5 человека, заменяющая последовательность гена С5 грызуна, содержит все 41 экзон последовательности гена С5 человека.
31. Способ по любому из пп. 25-30, в котором замена происходит в эндогенном локусе С5 грызуна и последовательность гена С5 человека, содержащая один или несколько экзонов последовательности гена С5 человека, кодирующей человеческий или гуманизированный белок С5, функционально связана с эндогенными регуляторными элементами или последовательностями грызуна в эндогенном локусе С5 грызуна.
32. Способ получения гуманизированной мыши, включающий замену последовательности гена С5 мыши, кодирующей белок С5 мыши, на ген С5 человека, кодирующий белок С5 человека, в котором замена происходит в эндогенном локусе С5 мыши, и ген С5 человека, кодирующий белок С5 человека, функционально связан с эндогенными регуляторными последовательностями мыши в эндогенном локусе С5 мыши.
33. Способ получения гуманизированного грызуна, включающий замену последовательности гена С3 грызуна, кодирующей белок С3 грызуна, на последовательность гена С3 человека, содержащую один или несколько экзонов последовательности гена С3 человека, кодирующей человеческий или гуманизированный белок С3, где замена происходит в эндогенном локусе С3 грызуна и последовательность гена С3 человека, содержащая один или несколько экзонов последовательности гена С3 человека, кодирующей человеческий или гуманизированный белок С3, функционально связана с регуляторными элементами или последовательностями грызуна в эндогенном локусе С3 грызуна.
34. Способ по п. 33, в котором грызун представляет собой мышь или крысу.
35. Способ по п. 33 или 34, в котором регуляторные элементы или последовательности грызуна происходят из мыши или крысы.
36. Способ по любому из пп. 33-35, в котором регуляторные элементы или последовательности грызуна являются эндогенными регуляторными элементами или последовательностями грызуна в локусе С3 грызуна.
37. Способ по любому из пп. 33-36, в котором последовательность гена С3 человека, заменяющая последовательность гена С3 грызуна, содержит, по меньшей мере, один экзон последовательности гена С3 человека.
38. Способ по п. 37, в котором последовательность гена С3 человека, заменяющая последовательность гена С3 грызуна, содержит, по меньшей мере, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 или 40 экзонов последовательности гена С3 человека.
39. Способ по п. 38, в котором последовательность гена С3 человека, заменяющая последовательность гена С3 грызуна, содержит все 41 экзон последовательности гена С3 человека.
40. Способ по любому из пп. 33-39, в котором замена происходит в эндогенном локусе С3 грызуна и последовательность гена С3 человека, содержащая один или несколько экзонов последовательности гена С3 человека, кодирующей человеческий или гуманизированный белок С3, функционально связана с эндогенными регуляторными элементами или последовательностями грызуна в эндогенном локусе С3 грызуна.
41. Способ получения гуманизированной мыши, включающий замену последовательности гена С3 мыши, кодирующей белок С3 мыши, на ген С3 человека, кодирующий белок С3 человека.
42. Способ по п. 41, в котором замена происходит в эндогенном локусе С3 мыши, и ген С3 человека, кодирующий белок С3 человека, функционально связан с эндогенными регуляторными последовательностями мыши в эндогенном локусе С3 мыши.
43. Грызун, содержащий гуманизированный ген С5 человека, содержащий замену в эндогенном локусе С5 грызуна гена грызуна, кодирующего белок С5, на ген С5 человека, кодирующий человеческий или гуманизированный белок С5, где экспрессия гена С5 человека, кодирующего человеческий или гуманизированный белок С5, находится под контролем регуляторных элементов или последовательностей грызуна в эндогенном локусе С5 грызуна, и где грызун дополнительно содержит замену в эндогенном локусе С3 грызуна гена грызуна, кодирующего белок С3, на ген С3 человека, кодирующий человеческий или гуманизированный белок С3, где экспрессия гена С3 человека, кодирующего человеческий или гуманизированный белок С3, находится под контролем регуляторных элементов или последовательностей грызуна в эндогенном локусе С3 грызуна.
44. Грызун по п. 43, в котором грызун представляет собой мышь или крысу.
45. Грызун по п. 43, в котором грызун представляет собой мышь, которая неспособна экспрессировать белок С5 мыши и неспособна экспрессировать белок С3 мыши.
46. Грызун по п. 43, в котором регуляторные элементы или последовательности грызуна в эндогенном локусе С5 грызуна и/или эндогенном локусе С3 грызуна происходят из мыши или крысы.
47. Грызун по п. 43, в котором регуляторные элементы или последовательности грызуна являются эндогенными регуляторными элементами или последовательностями грызуна в локусе С5 грызуна и/или локусе С3 грызуна.
48. Способ идентификации соединения, способного модулировать активацию системы комплемента, включающий:
a. введение соединения грызуну по любому из пп. 1-24 или 43-47; и
b. анализ того, модулируется ли активация системы комплемента у грызуна, тем самым идентифицируя соединение, способное модулировать активацию системы комплемента.
49. Способ по п. 48, в котором соединение представляет собой низкомолекулярное химическое соединение, антитело, белок, ингибирующую нуклеиновую кислоту или любую их комбинацию.
50. Способ по п. 48 или 49, в котором соединение модулирует активацию системы комплемента, увеличивая активность комплемента.
51. Способ по п. 48 или 49, в котором соединение модулирует активацию системы комплемента, снижая активность комплемента.
52. Способ по любому из пп. 48-51, в котором сыворотку грызуна анализируют для того, чтобы определить, модулируется ли активация системы комплемента у грызуна.
53. Способ по п. 52, в котором анализ представляет собой скрининговое исследование системы комплемента CH50.
Наверх