Аденоассоциированные вирусные векторы для лечения лизосомных болезней накопления - заявка 2016149206 на патент на изобретение в РФ

1. Рекомбинантный AAV9-вектор, содержащий промотор CAG, SEQ ID NO: 4, связанный с нуклеотидной последовательностью, кодирующей альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1.
2. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID NO: 2.
3. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 3.
4. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, представляет собой последовательность SEQ ID NO: 2.
5. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, представляет собой последовательность SEQ ID NO: 3.
6. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, представляет собой последовательность SEQ ID NO: 19.
7. AAV9-вектор по п. 1, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность, кодирующая альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, представляет собой последовательность SEQ ID NO: 22.
8. Рекомбинантный AAV9-вектор по любому из пп. 1-3 для применения в качестве лекарственного средства.
9. Рекомбинантный AAV9-вектор по любому из пп. 1-3 для повышения активности альфа-N-ацетилглюкозаминидазы в организме.
10. Рекомбинантный AAV9-вектор по любому из пп. 1-3 для лечения мукополисахаридоза, предпочтительно мукополисахаридоза типа IIIB.
11. Плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID NO: 2.
12. Плазмида по п. 11, отличающаяся тем, что указанная плазмида представляет собой pAAV-CAG-cohNaglu с номером доступа DSM 26626, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 3, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1.
13. Плазмида по п. 11, отличающаяся тем, что указанная плазмида представляет собой pAAV-CAG-hNaglu с номером доступа DSM 28568, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1.
14. Плазмида по п. 11, отличающаяся тем, что указанная плазмида представляет собой pAAV-CAG-cohNaglu-версия 2 с номером доступа DSM 32042, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 19, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1.
15. Плазмида по п. 11, отличающаяся тем, что указанная плазмида представляет собой pAAV-CAG-cohNaglu-версия 3 с номером доступа DSM 32043, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 22, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1.
16. Плазмида по любому из пп. 11-15 для применения в качестве лекарственного средства.
17. Плазмида по любому из пп. 11-15 для повышения активности альфа-N-ацетилглюкозаминидазы в организме.
18. Плазмида по любому из пп. 11-15 для лечения мукополисахаридоза, предпочтительно мукополисахаридоза типа IIIB.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество рекомбинантного AAV9-вектора по любому из пунктов 1-10 или плазмиду по любому из пунктов 11-18.
20. Фармацевтическая композиция по п. 19 для внутривенного или интрацистернального введения.
21. Применение рекомбинантного AAV9-вектора по любому из пп. 1-10 для изготовления лекарственного средства для повышения активности альфа-N-ацетилглюкозаминидазы в организме.
22. Применение плазмиды по любому из пп. 11-18 для изготовления лекарственного средства для повышения активности альфа-N-ацетилглюкозаминидазы в организме.
23. Применение рекомбинантного AAV9-вектора по любому из пп. 1-10 для изготовления лекарственного средства для лечения мукополисахаридоза.
24. Применение по п. 23, в котором мукополисахаридоз представляет собой мукополисахаридоз типа IIIB.
25. Применение плазмиды по любому из пп. 11-18 для изготовления лекарственного средства для лечения мукополисахаридоза.
26. Применение по п. 25, в котором мукополисахаридоз представляет собой мукополисахаридоз типа IIIB.
27. Способ получения векторов по п. 1, включающий стадии:
i) получения первого вектора, содержащего последовательность, кодирующую представляющий интерес белок, вставленную между первым концевым повтором AAV и вторым концевым повтором AAV; промотора CAG, функционально связанного с последовательностью, кодирующей представляющий интерес белок; второго вектора, содержащего ген AAV rep и ген AAV cap серотипа 9; и третьего вектора, содержащего ген с хелперной аденовирусной функцией;
ii) совместного трансфицирования компетентных клеток векторами стадии i);
iii) культивирования трансфицированных клеток стадии ii); и
iv) очистки экспрессионных векторов из культуры стадии iii).
28. Выделенная клетка, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую альфа-N-ацетилглюкозаминидазу, SEQ ID NO: 1, по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID NO: 2.
Наверх