Улучшенные вариабельные домены иммуноглобулина - заявка 2016149463 на патент на изобретение в РФ

1. Домен VH, в котором: (i) аминокислотный остаток в положении 112 представлен K или Q; и/или (ii) аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т; и/или (iii) аминокислотный остаток в положении 89 представлен L и аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q; и (iv) в каждом из случаев (i)-(iii) аминокислота в положении 11 предпочтительно представлена V; причем данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
2. Домен VH по п. 1, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
3. Домен VH по п. 2, который представляет собой нанотело.
4. Домен VH, в котором аминокислотный остаток в положении 112 представлен K или Q.
5. Домен VH по п. 4, который содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
6. Домен VH по п. 4 или 5, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
7. Домен VH по п. 6, который представляет собой нанотело.
8. Домен VH, в котором аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т; где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
9. Домен VH по п. 8, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
10. Домен VH по п. 9, который представляет собой нанотело.
11. Домен VH, в котором аминокислотный остаток в положении 89 представлен L и
аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q.
12. Домен VH по п. 11, где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
13. Домен VH по п. 11 или 12, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
14. Домен VH по п. 13, который представляет собой нанотело.
15. Домен VH, в котором аминокислотный остаток в положении 11 представлен V и аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q.
16. Домен VH по п. 15, где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
17. Домен VH по п. 15 или 16, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
18. Домен VH по п. 17, который представляет собой нанотело.
19. Домен VH, в котором аминокислотный остаток в положении 89 представлен L и аминокислотный остаток в положении 110 представлен V.
20. Домен VH по п. 19, где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
21. Домен VH по п. 19 или 20, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
22. Домен VH по п. 21, который представляет собой нанотело.
23. Домен VH, в котором:
- аминокислотный остаток в положении 11 представлен L, V или K;
- аминокислотный остаток в положении 14 представлен А или Р;
- аминокислотный остаток в положении 41 представлен А или Р;
- аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т, V или L;
- аминокислотный остаток в положении 108 представлен Q или L;
- аминокислотный остаток в положении 110 представлен Т, K или Q; и
- аминокислотный остаток в положении 112 представлен S, K или Q;
где либо (i) аминокислотный остаток в положении 112 представлен K или Q; и/или (ii) аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т; и/или (iii) аминокислотный остаток в положении 89 представлен L, а аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q; и (iv) в каждом из случаев (i)-(iii) аминокислота в положении 11 предпочтительно представлена V;
где данный домен VH необязательно содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (а предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
24. Домен VH по п. 23, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
25. Домен VH по п. 23 или 24, который представляет собой нанотело.
26. Домен VH по любому из пп. 23-25, где аминокислотный остаток в положении 112 представлен K или Q.
27. Домен VH по любому из пп. 23-25, где аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т.
28. Домен VH по любому из пп. 23-25, где аминокислотный остаток в положении 89 представлен L и аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q.
29. Домен VH по любому из пп. 23-25, где аминокислотный остаток в положении 89 представлен L и аминокислотный остаток в положении 11 представлен V.
30. Домен VH по любому из пп. 23-29, где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где п равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
31. Домен VH, в котором:
- аминокислотный остаток в положении 11 представлен L;
- аминокислотный остаток в положении 14 представлен А или Р;
- аминокислотный остаток в положении 41 представлен А или Р;
- аминокислотный остаток в положении 89 представлен Т, V или L;
- аминокислотный остаток в положении 108 представлен Q или L;
- аминокислотный остаток в положении 110 представлен K или Q; и
- аминокислотный остаток в положении 112 представлен S, K или Q;
где данный домен VH необязательно содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (а предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
32. Домен VH по п. 31, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
33. Домен VH по п. 30 или 31, который представляет собой нанотело.
34. Домен VH по любому из пп. 30-32, где данный домен VH содержит С-концевое удлинение (Х)n, где n равно 1-10, предпочтительно 1-5, как-то 1, 2, 3, 4 или 5 (предпочтительно 1 или 2, как-то 1); а каждый X означает остаток аминокислоты (предпочтительно встречающейся в природе), которая выбрана независимо, а предпочтительно выбрана независимо из группы, состоящей из аланина (А), глицина (G), валина (V), лейцина (L) и изолейцина (I).
35. Домен VH по любому из предыдущих пунктов, который может специфически связываться с сывороточным альбумином человека.
36. Домен VH по п. 35, который представляет собой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина.
37. Домен VH по п. 36, который представляет собой нанотело.
38. Библиотека доменов VH по любому из пп. 1-7.
39. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 1-7.
40. Библиотека по п. 39, которая является экспрессирующей библиотекой.
41. Библиотека по любому из пп. 38-40, которая является синтетической библиотекой.
42. Библиотека по любому из пп. 38-41, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
43. Библиотека доменов VH по любому из пп. 8-10.
44. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 8-10.
45. Библиотека по п. 44, которая является экспрессирующей библиотекой.
46. Библиотека по любому из пп. 43-45, которая является синтетической библиотекой.
47. Библиотека по любому из пп. 43-46, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
48. Библиотека доменов VH по любому из пп. 11-14.
49. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 11-14.
50. Библиотека по п. 48, которая является экспрессирующей библиотекой.
51. Библиотека по любому из пп. 48-50, которая является синтетической библиотекой.
52. Библиотека по любому из пп. 48-51, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
53. Библиотека доменов VH по любому из пп. 15-18.
54. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 15-18.
55. Библиотека по п. 54, которая является экспрессирующей библиотекой.
56. Библиотека по любому из пп. 53-55, которая является синтетической библиотекой.
57. Библиотека по любому из пп. 53-56, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
58. Библиотека доменов VH по любому из пп. 19-22.
59. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 19-22.
60. Библиотека по п. 59, которая является экспрессирующей библиотекой.
61. Библиотека по любому из пп. 58-60, которая является синтетической библиотекой.
62. Библиотека по любому из пп. 58-61, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более
предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
63. Библиотека доменов VH по любому из пп. 23-30.
64. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 23-30.
65. Библиотека по п. 64, которая является экспрессирующей библиотекой.
66. Библиотека по любому из пп. 63-65, которая является синтетической библиотекой.
67. Библиотека по любому из пп. 63-66, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
68. Библиотека доменов VH по любому из пп. 31-37.
69. Библиотека последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих домены VH по любому из пп. 31-37.
70. Библиотека по п. 69, которая является экспрессирующей библиотекой.
71. Библиотека по любому из пп. 68-70, которая является синтетической библиотекой.
72. Библиотека по любому из пп. 68-71, которая содержит по меньшей мере 100 различных последовательностей, как-то по меньшей мере 1000 различных последовательностей, предпочтительно более 105 различных последовательностей, более предпочтительно более чем 106, как-то от 108 до 1010 или больше различных последовательностей.
Наверх