Способ получения рекомбинантного капсидного белка вируса гепатита е - заявка 2016151437 на патент на изобретение в РФ

1. Способ получения рекомбинантного капсидного белка вируса гепатита Е генотипа 3 (PORF2), включающий: 1) создание синтетического гена, кодирующего PORF2, несущего замены в аминокислотной последовательности, характерные для штаммов ВГЕ, циркулирующих на территории РФ (L284P, S324T, Y354H, S357G, I364V, G490N, V492M, S497T, T517S, S527T, F537Y, V571I), нуклеотидная последовательность которого оптимизирована для экспрессии в E. coli; 2) культивирование штамма-продуцента, содержащего последовательность ДНК, кодирующую белок ORF2, в подходящих для экспрессии указанного белка условиях, выделение и очистку целевого белка, отличающийся тем, что культивируют рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/PORF2, содержащий интегрированную в экспрессионный вектор последовательность ДНК, включающую рекомбинантный ген, кодирующий полипептид PORF2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID #1, под контролем гибридного промотора и регуляторных последовательностей Т7 РНК полимеразы в условиях самоиндукции альфа-лактозой, а после выделения и очистки получают белок PORF2 в виде VLP, состоящей из мономеров с молекулярной массой мономера 60.9 кДа.
2. Рекомбинантная вакцина для профилактики вирусного гепатита Е, содержащая эффективное количество капсидного белка вируса гепатита Е, адъювант и физиологически приемлемый разбавитель, отличающаяся тем, что в качестве антигена вируса гепатита Е вакцина содержит белок PORF2 с аминокислотной последовательностью SEQ ID #1, полученный способом по п. 1.
Наверх