Способ получения биомассы бруцелл вакцинных штаммов при глубинном выращивании с использованием жидкой питательной среды минимизированного состава - заявка 2016152370 на патент на изобретение в РФ

1. Способ получения биомассы бруцелл вакцинных штаммов, заключающийся в том, что глубинное культивирование осуществляют в минимизированной по содержанию белкового компонента жидкой питательной среде в условиях дозирования глюкозы по определенной схеме, поддержания оптимальной величины рН среды введением раствора аммиака и регуляции парциального давления растворенного в культуральной жидкости кислорода на протяжении всего процесса культивирования.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что культивирование проводят в питательной среде следующего состава:
ферментативный гидролизат мяса до содержания аминного азота в среде, г/л от 0,45 до 0,55; дрожжевой экстракт сухой, г/л 2,50; Fe2(SaO4)3⋅3Н2О, мг/л 7,00; MnSO4⋅5H2O, мг/л 2,00; KH2PO4, г/л 1,13; MgSO4⋅7H2O, г/л 0,23; никотиновая кислота, мг/л 2,00; тиамина хлорид, мг/л 0,20; кальция пантотенат, мг/л 1,00; глюкоза (суммарное количество за цикл выращивания), г/л 26,00; вода дистиллированная, л до расчетного объема; рН среды от 6,8 до 7,2 ед. рН.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что концентрация посевного материала составляет от 0,5 до 1,0 млрд микробов/мл.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что введение глюкозы осуществляют по следующей схеме: одномоментное введение ее в питательную среду перед засевом в концентрации 10,0 г/л; с 16 по 19 ч роста - непрерывное введение по 1,5 г/л в час, с 20 по 24 ч роста - непрерывное введение по 2,0 г/л в час.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что парциальное давление растворенного кислорода (в процентах от насыщения) поддерживают по схеме: с 1 по 11 ч роста - от 20 до 25 pO2; с 12 по 23 ч роста - от 40 до 45 pO2; с 24 по 26-28 ч роста - от 30 до 35 pO2.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что поддержание оптимальной величины показателя рН культуральной жидкости в диапазоне от 6,8 до 7,2 ед. рН осуществляют автоматическим дозированным введением 12,5% водного раствора аммиака.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что критерием завершения процесса культивирования является самопроизвольное повышение величины показателя рН культуральной жидкости до 7,4 ед. рН.
Наверх