Способ одновременного выявления нейронов и астроцитов на гистологических препаратах нервной ткани - заявка 2016152820 на патент на изобретение в РФ

Способ одновременного выявления нейронов и астроцитов на гистологических препаратах нервной ткани, включающий фиксацию препарата в 10% растворе нитрата серебра в течение 3-4 дней в темноте при комнатной температуре, стандартную процедуру обезвоживания, заключение в парафин, приготовление гистологических срезов толщиной от 5 до 30 микрометров, нанесение на предметные стекла, депарафинизацию в ксилоле, отличающийся тем, что предварительно приготавливают растворы №1 и №2 следующего состава:
раствор №1:
формальдегид 37-40% 20 мл кислота лимонная 500 мг кислота азотная концентрированная 2 капли вода дистиллированная 100 мл
раствор №2:
крезилвиолет 100 мг вода дистиллированная 100 мл,
затем после депарафинизации препараты проводят по спиртам понижающей концентрации, споласкивают в двух порциях дистиллированной воды, проводят повторную импрегнацию в 10% растворе нитрата серебра в течение 5-8 минут в термостате при 40°C в темноте, в течение этого времени приготавливают раствор для окраски путем растворения 8 капель раствора №1 и 8 капель концентрированного гидроксида аммония в 50 мл дистиллированной воды, после чего препараты без промывки переносят в свежеприготовленный раствор на время от 40 с до 1 мин, затем погружают их в 1% раствор гидроксида аммония на 1 минуту и промывают в трех сменах дистиллированной воды, после чего препараты помещают на 1 мин в 5% раствор тиосульфата натрия, промывают их дистиллированной водой в течение 5 мин и производят докраску в растворе №2 на ацетатном буфере в термостате при 60°C в течение 15-20 мин, затем вновь промывают дистиллированной водой, после чего последовательно погружают препараты в 100% спирт на 5-8 мин, в карбол-ксилол на 1 мин и дважды по 5 мин в орто-ксилол, далее заключают срезы канадским бальзамом под покровные стекла.
Наверх