Модуляция содержания нитратов в растениях - заявка 2017102191 на патент на изобретение в РФ

1. Мутантная, не встречающаяся в природе или трансгенная растительная клетка, содержащая:
(i) полинуклеотид, содержащий, состоящий или состоящий по существу из последовательности, кодирующей член семейства CLC хлоридных каналов, и имеющей по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO:4
(ii) полипептид, кодируемый полинуклеотидом, изложенным в (i);
(iii) полипептид, содержащий, состоящий или состоящий по существу из последовательности, кодирующей член семейства CLC хлоридных каналов, и имеющей по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO:13, или
(iv) конструкцию, вектор или вектор экспрессии, содержащие выделенный полинуклеотид, изложенный в (i),
и где экспрессия или активность полинуклеотида или полипептида модулирована по сравнению с контрольным растением, содержащим контрольную растительную клетку, и где указанная мутантная, не встречающаяся в природе или трансгенная растительная клетка содержит одну или несколько мутаций, которые увеличивают уровень биомассы в мутантном, не встречающемся в природе или трансгенном растении, содержащем мутантную, не встречающуюся в природе или трансгенную растительную клетку, по сравнению с контрольным растением, содержащим контрольную растительную клетку, и где мутация (мутации) включает делецию, вставку, замену или миссенс-мутацию в положении P184 последовательности SEQ ID NO:13.
2. Мутантная растительная клетка по п. 1, где мутация представляет собой мутацию по типу замены.
3. Мутантная растительная клетка по п. 2, где указанная мутация по типу замены представляет собой P184S, как показано в SEQ ID NO:15.
4. Мутантная растительная клетка по любому из пп. 1-3, где мутация является гетерозиготной.
5. Мутантная растительная клетка по любому из пп. 1-3, где мутация является гомозиготной.
6. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение или его компонент, содержащие клетку растения по любому из пп. 1-5.
7. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, компонент растения или растительная клетка по любому из пп. 1-6, где дополнительно модулировано содержание нитратов.
8. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, компонент растения или растительная клетка по любому из пп. 1-7, где дополнительно модулировано содержание 4-(метилнитрозамино)-1-(3-пиридил)-1-бутанона (NNK).
9. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, компонент растения или растительная клетка по п. 7 или п. 8, где мутация (мутации) дополнительно включают делецию, вставку, замену или миссенс-мутацию в положении P143 последовательности SEQ ID NO:13.
10. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, компонент растения или растительная клетка по п. 9, где мутация в положении в положении P143 последовательности SEQ ID NO:13 представляет собой мутацию по типу замены P143L.
11. Способ модулирования по меньшей мере содержания биомассы в растении или его компоненте, включающий этапы:
(a) модулирования экспрессии или активности:
(i) полинуклеотида, содержащего, состоящего или состоящего по существу из последовательности, кодирующей член семейства CLC хлоридных каналов, и имеющей по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO:4
(ii) полипептида, кодируемого полинуклеотидом, изложенным в (i);
(iii) полипептида, содержащего, состоящего или состоящего по существу из последовательности, кодирующей член семейства CLC хлоридных каналов, и имеющей по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO:13;
и где экспрессия или активность полинуклеотида или полипептида модулирована по сравнению с контрольным растением, содержащим контрольную растительную клетку, и где указанная мутантная, не встречающаяся в природе или трансгенная растительная клетка содержит одну или несколько мутаций, которые увеличивают уровень биомассы в мутантном, не встречающемся в природе или трансгенном растении, содержащем мутантную, не встречающуюся в природе или трансгенную растительную клетку, по сравнению с контрольным растением, содержащим контрольную растительную клетку, и где мутация (мутации) включает делецию, вставку, замену или миссенс-мутацию в положении P184 последовательности SEQ ID NO:13.
(b) необязательно измерения по меньшей мере содержания нитратов по меньшей мере в части мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, полученного на этапе (a); и
(c) идентификации мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, в котором по меньшей мере биомасса изменена по сравнению с контрольным растением, в котором экспрессия или активность полинуклеотида или полипептида, изложенного в (a), не была модулирована.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что дополнительно модулируют содержание нитратов в растении.
13. Способ по п. 11 или 12, где модулируют содержание 4-(метилнитрозамино)-1-(3-пиридил)-1-бутанона (NNK) в растении.
14. Способ по любому из пп. 11-13, где дополнительно модулируют содержание никотина в растении.
15. Способ по любому из пп. 11-14, где по меньшей мере содержание N-нитрозоникотина (NNN) является по существу таким же как в контрольном растении
16. Способ по любому из пп. 11-15, где компонент растения представляет собой лист, предпочтительно, высушенный лист.
17. Растение или компонент, которые получены или могут быть получены способом по любому из пп. 11-16.
18. Растительный материал, в том числе биомасса, семена, стебель или листья растения, полученные из растения по любому из пп. 6 или 17.
19. Табачный продукт, содержащий клетку растения по п. 1, по меньшей мере часть растения по любому из пп. 6 или 17, растительный материал по п. 18 или обработанный предпочтительным образом растительный материал по п 18.
20. Выделенный полипептид, содержащий, состоящий или состоящий по существу из последовательности, кодирующей член семейства CLC хлоридных каналов, имеющей по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO:15.
21. Растение или его часть, содержащие предпочтительно гомозиготную мутацию в гене CLC, как показано в SEQ ID No. 15.
Наверх