Способы получения промышленных продуктов из растительных липидов - заявка 2017102934 на патент на изобретение в РФ

1. Способ получения нефтепродукта, включающий стадии:
(i) обработки в реакторе композиции, содержащей:
(a) вегетативные части растения, сухая масса которых составляет по меньшей мере 2 г, и в которых общее содержание неполярных липидов составляет по меньшей мере 5% масс., в пересчете на сухую массу,
(b) растворитель, который содержит воду, спирт или и то, и другое, и
(c) необязательно катализатор,
причем обработка включает нагревание композиции при температуре от около 50°C до около 450°C и давлении от 5 до 350 бар на протяжении периода от 1 до 120 минут, в окислительной, восстановительной или инертной среде,
(ii) извлечение нефтепродукта из реактора с выходом по меньшей мере 35% масс., в пересчете на сухую массу вегетативных частей растения,
с получением таким образом нефтепродукта.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что способ характеризуется одним или более или всеми из следующего:
(i) сухая масса вегетативных частей растения составляет по меньшей мере 1 кг,
(ii) общее содержание неполярных липидов в вегетативных частях растения составляет по меньшей мере 10%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере 20%, около 25%, около 30%, около 35% или от 30% до 75%, в пересчете на сухую массу,
(iii) концентрация твердых веществ в композиции составляет от 5% до 90%,
(iv) катализаторы содержат NaOH или KOH или оба, предпочтительно в концентрации 0,1-2 М,
(v) время обработки составляет от 1 до 60 минут, предпочтительно от 10 до 60 минут, более предпочтительно, от 15 до 30 минут,
(vi) если растворитель является водой, выход нефтепродукта в результате способа составляет от по меньшей мере 36%, 37%, 38%, 39% или 40% до максимального значения 55% или 60% масс., в пересчете на сухую массу вегетативных частей растения,
(vii) если растворитель содержит спирт, то выход нефтепродукта в результате способа составляет от по меньшей мере 36%, 37%, 38%, 39% или 40% до максимального значения 65% или 70% масс., в пересчете на сухую массу вегетативных частей растения,
(viii) если растворитель содержит около 80% воды, то нефтепродукт содержит около 30% C13-C22 углеводородных соединений,
(ix) если растворитель содержит около 50% метанола, то нефтепродукт содержит около 50% метиловых эфиров жирных кислот (МЭЖК),
(x) содержание воды в извлеченном нефтепродукте составляет менее чем около 15% масс.,
(xi) выход нефтепродукта по меньшей мере на 2% масс. больше, чем выход соответствующего способа с применением соответствующих вегетативных частей растения, в которых содержание неполярного липида составляет менее чем 2%, в пересчете на сухую массу, и
(xii) вегетативные части растения на стадии (i)(a) физически обрабатывают одним или более из сушки, рубки, нарезки, помола, вальцовки, прессования, дробления или перетирания.
3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что дополнительно включает одно или более из:
(i) гидродезоксигенации извлеченного нефтепродукта,
(ii) обработки извлеченного нефтепродукта водородом, с целью снижения уровней кетонов или сахара в нефтепродукте,
(iii) выработки синтетического газа из извлеченного нефтепродукта, и
(iv) фракционирования извлеченного нефтепродукта, с целью получения одного или более из мазута, дизельного топлива, керосина или бензина
4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что вегетативные части растения включают листья растения, стебли или и то, и другое.
5. Рекомбинантная эукариотная клетка, полученная из или находящаяся в листе или стебле растения, которая содержит:
a) первый экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или более гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в клетке,
b) второй экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, принимающий участие в биосинтезе одного или более неполярных липидов,
c) первую генетическую модификацию, подавляющую эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в катаболизме триацилглицеридов (ТАГ) в клетке, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей генетической модификации, и необязательно одно или оба из:
d) третьего экзогенного полинуклеотида, кодирующего полипептид, который повышает экспорт жирных кислот из пластид клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей четвертого экзогенного полинуклеотида, и
e) четвертого экзогенного полинуклеотида, кодирующего второй полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или более гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в клетке,
причем каждый экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в клетке, и, при этом перед цветением растения содержание общего неполярного липида в клетке составляет по меньшей мере 8% (масс., в пересчете на сухую массу).
6. Клетка по п. 5, отличающаяся тем, что дополнительно содержит одно или более или все из:
a) пятого экзогенного полинуклеотида, кодирующего полипептид покрытия масляного включения (ПМВ),
b) второй генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в импорте жирных кислот в пластиды клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей второй генетической модификации, и
c) третьей генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в выработке диацилглицеридов (ДАГ) в пластиде, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей третьей генетической модификации.
7. Клетка по п. 5 или 6, отличающаяся тем, что применяется один или больше или все из следующих признаков:
i) в клетке повышен синтез общих жирных кислот относительно соответствующей клетки, не содержащей первого экзогенного полинуклеотида, или снижен катаболизм общих жирных кислот относительно соответствующей клетки, не содержащей первого экзогенного полинуклеотида, или присутствуют оба этих признака, таким образом, что клетка содержит повышенный уровень общих жирных кислот относительно соответствующей клетки, не содержащей первого экзогенного полинуклеотида,
ii) в клетке повышена экспрессия и/или активность ацилтрансферазы ацилов жирных кислот, катализирующей синтез ТАГ, ДАГ или МАГ, предпочтительно ТАГ, относительно соответствующей клетки, содержащей первый экзогенный полинуклеотид и не содержащей экзогенного полинуклеотида, который кодирует полипептид, принимающий участие в биосинтезе одного или более неполярных липидов,
iii) в клетке снижена выработка лизофосфатидиновой кислоты (LPA) из ацил-АПБ и G3P в пластидах клетки относительно соответствующей клетки, содержащей первый экзогенный полинуклеотид и не содержащей генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в выработке диацилглицерида (ДАГ) в пластиде клетки,
iv) в клетке изменено соотношение C16:3 и C18:3 жирных кислот в содержании общих жирных кислот и/или содержании галактолипидов относительно соответствующей клетки, не содержащей экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) и/или генетической(их) модификации(й), предпочтительно соотношение снижено,
v) клетка находится в вегетативной части растения, причем общее содержание в ней неполярных липидов составляет по меньшей мере около 8%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 35%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 45%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 55%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 65%, по меньшей мере около 70%, от 8% до 75%, от 10% до 75%, от 11% до 75%, от около 15% до 75%, от около 20% до 75%, от около 30% до 75%, от около 40% до 75%, от около 50% до 75%, от около 60% до 75% или от около 25% до 50% (масс., в пересчете на сухую массу),
vi) клетка находится в вегетативной части растения, причем содержание ТАГ в ней составляет по меньшей мере около 8%, по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, по меньшей мере около 12%, по меньшей мере около 15%, по меньшей мере около 20%, по меньшей мере около 25%, по меньшей мере около 30%, по меньшей мере около 35%, по меньшей мере около 40%, по меньшей мере около 45%, по меньшей мере около 50%, по меньшей мере около 55%, по меньшей мере около 60%, по меньшей мере около 65%, по меньшей мере около 70%, от 8% до 75%, от 10% до 75%, от 11% до 75%, от около 15% до 75%, от около 20% до 75%, от около 30% до 75%, от около 40% до 75%, от около 50% до 75%, от около 60% до 75% или от около 25% до 50% (масс., в пересчете на сухую массу),
vii) полипептид(ы) фактора транскрипции выбран(ы) из группы, состоящей из Wrinkled 1 (WRI1), Leafy Cotyledon 1 (LEC1), LEC1-подобного, Leafy Cotyledon 2 (LEC2), BABY BOOM (BBM), FUS3, ABI3, ABI4, ABI5, Dof4 и Dof11,
viii) олеиновая кислота составляет по меньшей мере 20% (моль %), по меньшей мере 22% (моль %), по меньшей мере 30% (моль %), по меньшей мере 40% (моль %), по меньшей мере 50% (моль %) или по меньшей мере 60% (моль %), предпочтительно около 65% (моль %) или от 20% до около 65% от содержания общих жирных кислот в клетке,
ix) неполярный липид в клетке содержит жирную кислоту, которая содержит гидроксильную группу, эпоксигруппу, циклопропановую группу, двойную углерод-углеродную связь, тройную углерод-углеродную связь, конъюгированные двойные связи, разветвленную цепь, такую как метилированная или гидроксилированная разветвленная цепь, или комбинацию двух или более из них или любую из двух, трех, четырех, пяти или шести вышеупомянутых групп, связей или разветвленных цепей,
x) неполярный липид в клетке содержит одну или более полиненасыщенных жирных кислот, выбранных из эйкозадиеновой кислоты (ЭДК), арахидоновой кислоты (АРК), стеаридоновой кислоты (СДК), эйкозатриеновой кислоты (ЭТЕ), эйкозатетраеновой кислоты (ЭТК), эйкозапентаеновой кислоты (ЭПК), докозапентаеновой кислоты (ДПК), докозагексаеновой кислоты (ДГК) или комбинации двух из более из них,
xi) один или более или все из промоторов экспрессируются в вегетативной части растения с более высоким уровнем, чем в семени растения,
xii) один или более или все из промоторов выбраны промотором, не являющегося конститутивным промотором, предпочтительно тканеспецифического промотора, такого как специфичный для листьев и/или стеблей промотор, регулируемого развитием промотора, такого как специфичный для старения промотор, например, промотор SAG12, индуцибельного промотора или регулируемого циркадным ритмом промотора,
xiii) клетка содержит, в числе общих жирных кислот, среднецепочечные жирные кислоты, предпочтительно C12:0, C14:0 или обе, на уровне по меньшей мере 5% от общего содержания жирных кислот, и необязательно экзогенный полинуклеотид, кодирующий LPAAT, которая проявляет преимущественную активность в отношении жирных кислот со средней длиной цепи (C8-C14), предпочтительно C12:0 или C14:0,
xiv) клетка содержит, в числе общих жирных кислот, уровень олеиновой кислоты и/или уровень пальмитиновой кислоты, по меньшей мере на 2% выше, чем в соответствующей клетке, не содержащей экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) и/или генетической(их) модификации(й), и/или уровень а-линоленовой кислоты (АЛК) и/или уровень линолевой кислоты, по меньшей мере на 2% ниже, чем в соответствующей клетке, не содержащей экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) и/или генетической(их) модификации(й),
xv) неполярный липид в клетке содержит модифицированный уровень общих стеролов, предпочтительно свободных (неэтерифицированных) стеролов, стероильных эфиров, стероилгликозидов, относительно неполярного липида в соответствующей клетке, не содержащей экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) и/или генетической(их) модификации(й),
xvi) неполярный липид в клетке содержит воски и/или эфиры восков,
xvii) клетка является одним из членов популяции или коллекции размером по меньшей мере около 1000 таких клеток, предпочтительно в вегетативной части растения,
xviii) клетка содержит экзогенный полинуклеотид, кодирующий супрессор сайленсинга, причем экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в клетке,
xix) уровень одного или более неполярных липидов и/или общее содержание неполярных липидов в клетке по меньшей мере на 2% масс. выше, чем в соответствующей клетке, которая содержит экзогенные полинуклеотиды, кодирующие WRI1 Arabidposis thaliana (SEQ ID NO: 21) и DGAT1 Arabidopsis thaliana (SEQ ID NO: 1), и
xx) общее содержание полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК), сниженное относительно общего содержания ПНЖК в соответствующей клетке, не содержащей экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) и/или генетической(их) модификации(й).
8. Клетка по любому из пп. 5-7, отличающаяся тем, что применяется один или больше или все их следующих признаков, если это уместно:
i) полипептид, принимающий участие в биосинтезе одного или более неполярных липидов, является ацилтрансферазой ацилов жирных кислот, который принимает участие в биосинтезе ТАГ, ДАГ или моноацилглицерида (МАГ) в клетке, например, DGAT, PDAT, LPAAT, GPAT или MGAT, предпочтительно DGAT или PDAT,
ii) полипептид, принимающий участие в катаболизме триацилглицеридов (ТАГ) в клетке, является липазой SDP1, полипептидом Cgi58, ацил-КоА оксидазой, такой как ACX1 или ACX2, или полипептидом, принимающим участие в β-окислении жирных кислот в клетке, такой как пероксисомальный транспортер АТФ-связывающей кассеты PXA1, предпочтительно липазой SDP1,
iii) полипептид покрытия масляного включения (ПМВ), является олеозином, таким как полиолеозин или калеозин, или связанным с липидными капельками белком (БСЛК),
iv) полипептид, который повышает экспорт жирных кислот из пластид клетки, является тиоэстеразой C16 или C18 жирных кислот, такой как полипептид FATA или полипептид FATB, переносчиком жирных кислот, таким как полипептид ABCA9 или длинноцепочечная ацил-КоА синтетаза (ДЦАС),
v) полипептид, принимающий участие в импорте жирных кислот в пластиды клетки, является переносчиком жирных кислот или его субъединицей, предпочтительно полипептидом ТГД, и
vi) полипептид, принимающий участие в выработке диацилглицерида (ДАГ) в пластиде, является пластидной GPAT, пластидной LPAAT или пластидной PAP.
9. Клетка по любому из пп. 5-8, отличающаяся тем, что указанная клетка:
i) получена из или находится в растении 16:3 или в его вегетативной части, причем она содержит одно или более или все из следующего,
a) экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, который повышает экспорт жирных кислот из пластид клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей экзогенного полинуклеотида,
b) первой генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в импорте жирных кислот в пластиды клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей первой генетической модификации, и
c) второй генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в выработке диацилглицерида (ДАГ) в пластиде, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей второй генетической модификации,
и, при этом, экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в клетке, или
ii) получена из или находится в растении 18:3 или в его вегетативной части.
10. Клетка по любому из пп. 5-9, отличающаяся тем, что общее содержание неполярного липида в клетке перед цветением растения составляет по меньшей мере около 10%, по меньшей мере около 11%, от 8% до 15%, или от 9% до 12% (масс., в пересчете на сухую массу).
11. Клетка по любому из пп. 5-10, отличающаяся тем, что генетическая модификация является мутацией эндогенного гена, которая частично или полностью инактивирует ген, такой как точечная мутация, инсерция или делеция, или генетическая модификация является экзогенным полинуклеотидом, кодирующим молекулу РНК, которая подавляет экспрессию эндогенного гена, причем, экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в клетке.
12. Рекомбинантная эукариотная клетка, содержащая:
a) первый экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или более гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в клетке,
b) второй экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, принимающий участие в биосинтезе одного или больше неполярных липидов, и любое одно или оба или все три из:
c) первой генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в катаболизме триацилглицеридов (ТАГ) в клетке, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей генетической модификации,
d) третьего экзогенного полинуклеотида, кодирующего полипептид, который повышает экспорт жирных кислот из пластид клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей четвертого экзогенного полинуклеотида, и
e) четвертого экзогенного полинуклеотида, кодирующего второй полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или больше гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в клетке,
причем каждый экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в клетке.
13. Растение или его часть, содержащее одну или более клеток по любому из пп. 5-11, или организм, не относящийся к человеческому роду, или его часть, содержащий одну или более клеток по п. 12.
14. Трансгенное растение или его часть, содержащее:
a) первый экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или более гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в растении,
b) второй экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид, принимающий участие в биосинтезе одного или более неполярных липидов,
c) генетическую модификацию, подавляющую эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в катаболизме триацилглицеридов (ТАГ) в растении, по сравнению с соответствующим растением, не содержащим генетической модификации, и необязательно одно или оба из:
d) третьего экзогенного полинуклеотида, кодирующего полипептида, который повышает экспорт жирных кислот из пластид клетки, по сравнению с соответствующей клеткой, не содержащей четвертого экзогенного полинуклеотида, и
e) четвертого экзогенного полинуклеотида, кодирующего второй полипептид фактора транскрипции, который повышает экспрессию одного или более гликолитических генов и/или генов биосинтеза жирных кислот в клетке,
причем каждый экзогенный полинуклеотид функционально связан с промотором, способным направлять экспрессию полинуклеотида в растении, и, при этом, перед цветением растения содержание общего неполярного липида в клетке в листе или стебле указанного растения составляет по меньшей мере 8% (масс., в пересчете на сухую массу).
15. Растение или его часть по п. 14, отличающееся тем, что дополнительно содержит одно или более или все из:
a) пятого экзогенного полинуклеотида, кодирующего полипептид покрытия масляного включения (ПМВ),
b) второй генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в импорте жирных кислот в пластиды растения, по сравнению с соответствующим растением, не содержащим второй генетической модификации, и
c) третьей генетической модификации, подавляющей эндогенную выработку и/или активность полипептида, принимающего участие в выработке диацилглицерида (ДАГ) в пластиде, по сравнению с соответствующим растением, не содержащим третьей генетической модификации.
16. Растение или его часть по п. 14 или 15, отличающееся тем, что часть является вегетативной частью, и один или более или все из промоторов экспрессируются в вегетативной части с более высокими уровнями, чем в семени растения.
17. Растение или его часть по любому из пп. 14-16, отличающееся тем, что обладает одним или более из признаков, определенных в любом из пп. 9-12.
18. Популяция численностью по меньшей мере около 1000 растений, причем каждое представляет собой растение по любому из пп. 14-17, растущее в поле, или коллекция численностью по меньшей мере около 1000 вегетативных частей растения, и, при этом, каждая является вегетативной частью растения по любому из пп. 14-17, притом что урожай вегетативных частей растения собран с растений, растущих в поле.
19. Семя растения по любому из пп. 14-17 или полученное от указанного растения.
20. Способ получения рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-12, включающий стадии:
i) введение в эукариотную клетку по меньшей мере одного экзогенного полинуклеотида и/или по меньшей мере одной генетической модификации, определенных в любом из пп. 5-12, с получением эукариотной клетки, содержащей набор экзогенных полинуклеотидов и/или генетических модификаций, определенных в любом из пп. 5-12,
ii) экспрессии экзогенного(ых) полинуклеотида(ов) в клетке или ее клетке-потомке,
iii) анализ содержания липидов в клетке или ее клетке-потомке, и
iv) отбор клетки по любому из пп. 5-12.
21. Способ получения растения, в геном которого интегрирован набор экзогенных полинуклеотидов и/или генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17, причем способ включает стадии:
i) скрещивание двух материнских растений, и, при этом, одно растение содержит по меньшей мере один из экзогенных полинуклеотидов и/или по меньшей мере одну из генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17, а другое растение содержит по меньшей мере один из экзогенных полинуклеотидов и/или по меньшей мере одну из генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17, притом, что оба материнских растения содержат набор экзогенных полинуклеотидов и/или генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17,
ii) скрининг одного или больше растений-потомков скрещивания на предмет присутствия или отсутствия набора экзогенных полинуклеотидов и/или генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17, и
iii) отбор растения-потомка, содержащего набор экзогенных полинуклеотидов и/или генетических модификаций, определенных в любом из пп. 14-17, с получением таким образом растения.
22. Способ получения промышленного продукта, включающий стадии:
i) получение рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-12, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17 или семени по п. 19, и
ii) любое из:
a) превращения по меньшей мере части липида в клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части или семени со стадии i) в промышленный продукт, с применением к липиду нагревания, химических или ферментных средств или любой их комбинации in situ в клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части или семени, или
b) физической обработки клетки, организма, не относящегося к человеческому роду, или его части, растения или его части, или семени со стадии i), с последующим или одновременным превращением по меньшей мере части липида в обрабатываемой клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части или семени в промышленный продукт, с применением к липиду нагревания, химических или ферментных средств или любой их комбинации в обрабатываемой клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части или семени, и
iii) извлечение промышленного продукта,
с получением таким образом промышленного продукта.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что часть растения является вегетативной частью растения.
24. Способ по п. 22 или 23, отличающийся тем, что дополнительно включает стадии:
(a) экстракция по меньшей мере части неполярного липида, содержащегося в клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части, или семени в форме неполярного липида, и
(b) извлечение экстрагированного неполярного липида,
причем стадии (a) и (b) выполняются до стадии превращения по меньшей мере части липида в клетке, организме, не относящемся к человеческому роду, или его части, растении или его части, или семени в промышленный продукт.
25. Способ получения экстрагированного липида, включающий стадии:
i) получение рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-12, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17 или семени по п. 19,
ii) экстракция липида из клетки, организма, не относящегося к человеческому роду, или его части, растения или его части или семени, и
iii) извлечение экстрагированного липида,
с получением таким образом экстрагированного липида.
26. Способ по п. 24 или 25, отличающийся тем, что включает извлечение экстрагированного липида путем сбора его в емкость и/или одного или более из дегуммирования (удаления смолы), дезодорирования, обесцвечивания, сушки, фракционирования экстрагированного липида, цветочных и/или восковых эфиров из экстрагированного липида или анализа жирнокислотного состава экстрагированного липида.
27. Способ по любому из пп. 24-26, отличающийся тем, что дополнительно включает трансформацию экстрагированного липида в промышленный продукт.
28. Способ по любому из пп. 22-24 или 27, отличающийся тем, что промышленный продукт является углеводородным продуктом, таким как эфиры жирных кислот, предпочтительно метиловые и/или этиловые эфиры жирных кислот, алкан, такой как метан, этан или алкан с более длинной цепью, смеси алканов с более длинной цепью, алкен, биологическое топливо, газообразный монооксид углерода и/или водород, биоспирт, такой как этанол, пропанол или бутанол, биоуголь или комбинация монооксида углерода, водорода и биоугля.
29. Способ по любому из пп. 22-28, отличающийся тем, что часть растения является воздушной частью растения или зеленой частью растения, предпочтительно вегетативной частью растения, такой как лист или стебель растения или часть растения является клубнем или свеклой, таким как клубень картофеля (Solanum tuberosum) или сахарная свекла.
30. Способ получения семени, включающий:
i) выращивание растения по любому из пп. 14-17, и
ii) сбор урожая семени с растения.
31. Экстрагированный или извлеченный липид, получаемый из рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-12, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17, семени по п. 19, или получаемый по способу в соответствии с любым из пп. 25-29.
32. Промышленный продукт, полученный по способу в соответствии с любым из пп. 22-24, 27 или 28, который является углеводородным продуктом, таким как эфиры жирных кислот, предпочтительно метиловые эфиры жирных кислот и/или этиловые эфиры жирных кислот, или алкан, такой как метан, этан или алкан с более длинной цепью, смеси алканов с более длинной цепью, алкен, биологическое топливо, газообразный монооксид углерода и/или водород, биоспирт, такой как этанол, пропанол или бутанол, биоуголь или комбинация монооксида углерода, водорода и биоугля.
33. Применение рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-9, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17, семени по п. 19 или извлеченного или экстрагированного липида по п. 31 для производства промышленного продукта.
34. Способ получения топлива, включающий:
i) введение в реакцию липида по п. 31 со спиртом, необязательно в присутствии катализатора, с получением алкиловых эфиров, и
ii) необязательное смешивание алкиловых эфиров с топливом на основе нефти.
35. Способ получения синтетического дизельного топлива, включающий:
i) превращение липида в рекомбинантной эукариотной клетке по любому из пп. 5-12, трансгенном организме, не относящемся к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17 или семени по п. 19 в бионефть по способу, включающему пиролиз или гидротермическую обработку, или в синтетический газ путем газификации, и
ii) превращение бионефти в синтетическое дизельное топливо с применением способа, включающего фракционирование, предпочтительно с отбором углеводородных соединений, которые конденсируются при температуре от приблизительно 150°C до приблизительно 200°C или от приблизительно 200°C до приблизительно 300oC, или превращение синтетического газа в биотопливо с применением металлического катализатора или микробного катализатора.
36. Способ получения биотоплива, включающий превращение липида в рекомбинантной эукариотной клетке по любому из пп. 5-12, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17 или семени по п. 19 в бионефть путем пиролиза, в биоспирт путем ферментации или в биогаз путем газификации или анаэробного расщепления.
37. Способ по п. 35 или 36, отличающийся тем, что часть является вегетативной частью растения.
38. Способ получения корма (пищевого продукта), включающий смешивание рекомбинантной эукариотной клетки по любому из пп. 5-12, трансгенного организма, не относящегося к человеческому роду, или его части по п. 13, трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17, семени по п. 19, или извлеченного или экстрагированного липида по п. 31 или экстракта или его части, по меньшей мере с еще одним питательным ингредиентом.
39. Корма (пищевые продукты), косметические средства или химические продукты, содержащие рекомбинантную эукариотную клетку по любому из пп. 5-12, трансгенный организм, не относящийся к человеческому роду, или его часть по п. 13, трансгенное растение или его часть по любому из пп. 14-17, семя по п. 19 или извлеченный или экстрагированный липид по п. 31 или экстракт или его часть.
40. Способ кормления животного, включающий предложение животному трансгенного растения или его части по любому из пп. 14-17, семени по п. 19 или извлеченного или экстрагированного липида по п. 31.
Наверх