Патенты автора Гусев Виталий Николаевич (RU)
Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии, а именно к способу получения антирабической вакцины. Для этого используют сублинию клеток ″ВНК-21/13-02″, выращивая их безопорным методом в специальной среде для суспензионных условий, используя раствор Хенкса для суспензионного культивирования с добавлением сыворотки крови КРС, проверенной на отсутствие антител к вирусу бешенства и ростовые свойства, в концентрации 2,5%, D-глюкозу (1,0 г/л), D-фруктозу (1,0 г/л), l-глутамин (0,3 г/л), ферментативный мышечный гидролизат КРС (0,35% в пересчете на сухое вещество), l-аргинин, l-метионин, l-цистин, мио-инозитол и водорастворимые витамины согласно прописи среды Игла MEM, до концентрации (2,5-3,0)×106 кл./мл. Затем инфицируют выросшую культуру клеток штаммом ″Щелково-51″ вируса бешенства, адаптированным к данной системе, в дозе 0,1-1,0 МЛД50/кл., при этом инкубирование осуществляют при температуре 37°C в течение 48-72 часов безопорным методом. После чего добавляют стабилизирующий буфер, фиксируя pH в пределах 7,2-7,6, а затем инактивируют полученный вируссодержащий материал бета-пропиолактоном в конечной концентрации 0,025%, а затем приготавливают из него сорбированную или сухую вакцину. Использование данного способа позволяет повысить иммуногенность продукта за счет определенной плотности клеток к моменту заражения, оптимальной дозы заражения и времени репродукции вируса в инфицированных клетках. 4 з.п. ф-лы, 3 пр., 3 табл.
