Патенты автора Клотченко Сергей Анатольевич (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена рекомбинантная плазмидная ДНК pET22b(+)-NS1-6×His для экспрессии в клетках Escherichia coli рекомбинантного неструктурного белка NS1 вируса гриппа А. Предложен также штамм Escherichia coli BL-21(DE3)-pET22b(+)-NS1, являющийся продуцентом рекомбинантного неструктурного белка NS1 вируса гриппа А и полученный путем трансформации клеток Escherichia coli BL-21(DE3) рекомбинантной плазмидной ДНК pET22b(+)-NS1-6×His. Указанный штамм депонирован в Биоресурсном Центре Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (БРЦ ВКПМ) НИЦ «Курчатовский институт» ГосНИИгенетика под № В-14117. Изобретение позволяет получить стабильный при хранении рекомбинантный неструктурный белок NS1 гриппа А, который может быть использован в качестве мишени при разработке подходов направленной противовирусной терапии. 2 н.п. ф-лы, 6 ил.
Изобретение относится к области молекулярной диагностики, а именно к разработке метода молекулярной диагностики синдрома системной воспалительной реакции (ССВР, systemic inflammatory response syndrome, SIRS), включая сепсис, с помощью количественного определения альфа-2-макроглобулина, фетуина А и сывороточного амилоида А1 в сыворотке крови человека с применением технологии MALDI-TOF масс-спектрометрии. По настоящему изобретению для альфа-2-макроглобулина в качестве изотопно-меченого стандарта используют пептид VGFYESDVMGR, для фетуина А - HTFMGVVSLGSPSGEVSHPR, а для сывороточного амилоида А1 - FFGHGAEDSLADQAANEWGR, в качестве изотопной метки используется стабильный изотоп кислорода 18О. Технический результат состоит в обеспечении возможности эффективного количественного мультиплексного анализа альфа-2-макроглобулина, фетуина А и сывороточного амилоида А1 как факторов воспаления в сыворотке крови с использованием MALDI-TOF масс-спектрометрии. 4 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области медицины и биохимии, в частности к молекулярной диагностике, а именно к многопараметрической диагностической тест-системе, и может быть использовано для количественного определения уровней мРНК генов RIG-1, IFIT-1, IFIH-1 человека в биологическом образце. Предложена многопараметрическая диагностическая тест-система для количественного определения уровня мРНК генов RIG-1, IFIT-1, IFIH-1 методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией. Тест-система включает набор олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентных зондов. Тест-система обеспечивает возможность быстрого и точного определения уровня мРНК генов RIG-1, IFIT-1, IFIH-1 человека в биологическом образце. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 9 ил.
Предложена рекомбинантная плазмидная ДНК pet302-NT-His-hIFN-λ1 для экспрессии в клетках E. coli рекомбинантного белка интерферона hIFN-λ1, имеющего последовательность SEQ ID NO:3. Также предложен штамм Escherichia coli BL21[DE3]pET302-hIFNL1 – продуцент рекомбинантного белка интерферона hIFN-λ1, имеющий последовательность SEQ ID NO:3. При этом указанный штамм получен путём трансформации клеток штамма E. coli BL21DE3 рекомбинантной плазмидной ДНК pet302-NT-His-hIFN-λ1. Полученный интерферон лямбда является стабильным при хранении и может быть использован в качестве терапевтического средства. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 8 пр.
Изобретение относится к средствам молекулярной диагностики и может быть использовано в иммунологии и медицине для оценки иммунного статуса методом ПЦР. Настоящее изобретение представляет собой многопараметрическую диагностическую тест-систему, предназначенную для количественного определения уровней мРНК интерферонов I, II и III типов человека в биологическом образце. В частности, система представляет собой две пробы – А и Б, в каждой из которых одновременно проходят несколько реакций: в пробе А – определение уровней экспрессии IFN-α, IFN-β и IFN-γ человека, в пробе Б – одновременное определение экспрессии четырёх подтипов IFN-λ человека. Система позволяет дифференцированно определять три субтипа (1, 2/3 и 4, соответственно) IFN-λ, а также определять экспрессию любого из 14 существующих субтипов IFN-α (без детерминации на подтипы). 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.
Настоящее изобретение относится к средствам диагностики вирусных инфекций. Многопараметрическая диагностическая тест-система, предназначенная для одновременного дифференциального обнаружения путём иммунофлуоресцентного анализа вирусов следующих типов: вирусов гриппа А и В, циркулирующих преимущественно в человеческой популяции, аденовируса, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 2 и 3 типа, включает белковый чип для одновременного определения указанных вирусов в образце, содержащая антитела к вирусам гриппа А и В, аденовирусу, респираторно-синцитиальному вирусу, вирусам парагриппа 2 и 3 типа, в концентрации 250 мкг/мл каждого из указанных типов антител, лизирующий буферный раствор для пробоподготовки образцов, растворы для двухэтапной блокировки чипа, включающие раствор для первого этапа, представляющий собой 0,4% NaHB4, 20% этанол в ФСБ, и раствор для второго этапа, включающий 1% БСА в 20 мМ Na2HPO4, pH 8,5, используемый непосредственно перед анализом образца, при этом белковый чип представляет собой подложку с альдегидными группами или аминосилановую подложку, а антитела к вирусам гриппа А и В, аденовирусу, респираторно-синцитиальному вирусу, вирусам парагриппа 2 и 3 типа получали следующим образом: получение антитело-продуцирующих спленоцитов; накопление клеток мышиной миеломы; слияние антитело-продуцирующих спленоцитов с миеломными клетками; отбор гибридом; инокуляцию клеток гибридомы в брюшную полость праймированных пристаном мышей; накопление моноклональных антител в асцитах; очистку полученных моноклональных антител. Изобретение обеспечивает быстрое и точное определение типа вирусов. 3 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области биохимии, иммунологии и медицины, в частности к средствам диагностики острых респираторных вирусных инфекций. Раскрыт способ дифференциальной диагностики возбудителей респираторных вирусных инфекций, включающий: обработку лизирующим буферным раствором образца перед внесением в тест-систему; приготовление аналитической пробы — предварительное смешивание биологического образца и детектирующих моноклональных антител в конечной концентрации последних по 1 мкг/мл каждого; блокировку активных групп на подложке биочипа, представляющего собой белковый чип для одновременного определения в образце вируса гриппа А, вируса гриппа В Викторианской и Ямагатской линий, аденовируса, респираторно-синцитиального вируса, вирусов парагриппа 2 и 3 типов, содержащий моноклональные антитела к указанным вирусам, при этом белковый чип представляет собой подложку с активированными альдегидными группами или аминосилановую подложку, при этом блокировка проводится в два этапа; внесение и одностадийную инкубацию приготовленной аналитической пробы в биочипе; определение наличия вирусов в образце путём иммунофлуоресцентного анализа с установлением уровня флуоресценции. Изобретение обеспечивает упрощение процедуры анализа, сокращение времени постановки анализа, повышение чувствительности и специфичности метода одновременной детекции нескольких вирусов. 3 з.п. ф-лы, 12 ил., 1 табл., 7 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ получения мышиных моноклональных антител, специфичных к различным штаммам вируса гриппа В Ямагатской и Викторианской эволюционных линий и имеющих высокую специфичность к NP-белку, включающий стадии получения антитело-продуцирующих спленоцитов; накопления клеток мышиной миеломы; слияния антитело-продуцирующих спленоцитов с миеломными клетками; отбора гибридом; инокуляции клеток гибридомы в брюшную полость праймированных пристаном мышей; накопления моноклональных антител в асцитах; очистки полученных моноклональных антител. В указанном способе для получения антител использована гибридома-продуцент моноклональных антител, направленных к NP-белку вируса гриппа В, депонированная как 6G1/B под номером РККК(П) 785Д, или гибридома-продуцент моноклональных антител, направленных к NP-белку вируса гриппа В, депонированная как 10А5/В под номером РККК(П) 787Д в Специализированную коллекцию культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» ФГБУН Института цитологии РАН. Изобретение расширяет арсенал способов для получения мышиных моноклональных антител, специфичных к вирусу гриппа В Ямагатской и Викторианской эволюционных линий и имеющих высокую специфичность к NP-белку. 2 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 5 пр.
МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА, СПЕЦИФИЧНЫЕ К РАЗЛИЧНЫМ ШТАММАМ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОГО ВИРУСА // 2713340
Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ получения мышиных моноклональных антител, специфичных к F-белку респираторно-синцитиального вируса групп А и В. Способ включает стадии получения антитело-продуцирующих спленоцитов, накопления клеток мышиной миеломы, слияния антитело-продуцирующих спленоцитов с миеломными клетками, отбора гибридом, введения гибридомы в брюшную полость праймированных пристаном мышей, накопления моноклональных антител в асцитах и очистки полученных моноклональных антител. Для получения антител в способе использована гибридома-продуцент моноклональных антител, направленных к F-белку респираторно-синцитиального вируса групп А и В, депонированная как 11G4/RS под номером РККК(П) 786Д, или гибридома-продуцент моноклональных антител, направленных к F-белку респираторно-синцитиального вируса, депонированная как 10G6/RS под номером РККК(П) 784Д в Специализированную коллекцию культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» ФГБУН Института цитологии РАН. Изобретение расширяет способы получения мышиных моноклональных антител, специфичных к F-белку респираторно-синцитиального вируса групп А и В. 3 ил., 2 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Описано моноклональное антитело, применяемое в иммуноферментном анализе для идентификации вируса Эбола. Моноклональное антитело, специфичное к вирусу Эбола и продуцируемое гибридомой 1B1, штамм которой депонирован в специальной коллекции культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» ФБГУН Институт цитологии РАН под № РККК(П) 788Д, полученное иммунизацией мыши рекомбинантным фьюжн-белком rBs с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1, связывающееся с рекомбинантным белком eGP вируса Эбола с равновесной константой диссоциации (KD) 4,4×10–8 М, применяемое в иммуноферментном анализе для идентификации вируса Эбола. Изобретение позволяет получать моноклональное антитело с высокой специфичностью к рекомбинантному белку eGP вируса Эбола. 5 ил., 2 табл.
Изобретение относится к области молекулярной биологии и вирусологии
