Патенты автора Пряничникова Наталия Сергеевна (RU)

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к молекулярно-генетическим методам исследований в лабораторной диагностике и мониторинге возбудителя лейкоза крупного рогатого скота. Представлен способ геноидентификации Bovine leukemia virus (аббр. BLV) с совмещенной техникой полимеразной цепной реакции и полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ). В способе используют стратегию ПЦР-ПДРФ-генотипирования BLV. Стратегия основана на филогенетическом анализе env-гена возбудителя. В nested ПЦР используют специфические «внешние» TCTGTGCCAAGTCTCCCAGATA и AACAACAACCTCTGGGAAGGGT и «внутренние» CCCACAAGGGCGGCGCCGGTT и GCGAGGCCGGGTCCAGAGCTGG праймеры, и соответствующие эндонуклеазы рестрикции - PvuII-ПДРФ, SspI-ПДРФ, AsuHPI-ПДРФ, HaeIII-ПДРФ и BstX21-ПДРФ. ПДРФ-протокол состоит из 5 последовательных шагов, инициирующих на завершающем этапе реакции наработку фрагмента env-гена возбудителя. Генотип определяют исходя из анализа выравнивания и рестрикционного картирования последовательностей ДНК локуса env-гена референсных изолятов известных генотипов BLV с последующим in silico моделированием рестриктограмм по 5 эндонуклеазам рестрикции: PvuII, SspI, HphI (изошизомер AsuHPI), HaeIII, BstYI (изошизомер BstX2I). Изобретение обеспечивает идентификацию 11 генотипов вирусного патогена. 2 табл., 2 ил.
Изобретение относится к молочной промышленности и может быть использовано при производстве творожного продукта функциональной направленности

 


Наверх