Патенты автора Корниенко Игорь Валериевич (RU)
Группа изобретений относится к жидким композициям, предназначенным для удаления ДНК- и РНК-содержащего биологического материала на поверхности объектов неорганического и органического происхождения. Раскрыты композиции (варианты) для удаления ДНК и/или РНК-содержащего биологического материала в виде смеси двух растворов: деконтаминационного раствора-1 (ДКР-1) и деконтаминационного раствора-2 (ДКР-2) в соотношении от 1:1 до 35:1, где ДКР-1 может содержать Додецилсульфат натрия (Sodium dodecyl sulfate, SDS), пентагидрат сульфата меди (II) (CuSO4×5H2O), гептагидрат сульфата железа (II) (FeSO4×7H2O), Трис (гидроксиметил) аминометан (Трис, (HOCH2)3CNH2), глицерин, деионизованную воду, а ДКР-2 содержит пероксид водорода (H2O2), бензоат натрия (C6H5COONa) и деионизованную воду. Группа изобретений обеспечивает удаление нуклеиновых кислот и разрушение клеточных мембран на поверхности объектов неорганического и органического происхождения, включая костный материал, в лабораторных условиях. 4 н. и 16 з. п. ф-лы, 25 ил., 11 табл., 5 пр.
Изобретение относится к области медицинской паразитологии, ветеринарии, биотехнологии. Описан способ диагностики возбудителей дирофиляриоза, включающий ПЦР в режиме реального времени с помощью предлагаемых праймеров, специфичных для каждого вида дирофилярий и состоящих из двух пар видовых праймеров: для Dirofilaria repens (F2690DR) 5’- АAGTGTTGATGGTCAACCTGAA-3’ (R2812DR) 5’- GTAGAACGCATATTCTGAGT-3’ для Dirofilaria immitis(F2690DI) 5’- GAGTGTAGAGGGTCAGCCTGAG-3’(R2812DI) 5’- GTAGAACGTATATTCTGAAC- 3’.Выявление осуществляют автоматически в ходе проведения ПЦР на мониторе компьютера в виде кривых и в численных значениях, отражающих накопление продуктов амплификации специфичных для D. repens и D. immitis со специфическими праймерами. В случае наличия в пробе ДНК D. Repens, будет выявляться положительная реакция с праймерами F2690DR/R2812DR, а в случае наличия в пробе ДНК D. Immitis, будет выявляться положительная реакция с праймерами F2690DI/R2812DI. Предварительно подготавливают исследуемую ДНК. Для этого осуществляют промывку нативных гельминтов однократно в стерильном 0,9% растворе NaCl, далее замораживание при температуре -20±2°С. Затем механическое перетирание и гомогенизация до получения однородной суспензии, из которой выделяют ДНК с использованием набора М-Сорб-кровь («НПФ СИНТОЛ», Россия) для постановки ПЦР. Кроме того, ПЦР проводят в объеме 25 мкл и реакционная смесь содержит: 10-кратный ПЦР буфер с EVAGreen – 2,5 мкл; 25 мМ MgCl2 - 2,5 мкл; 2,5 мМ смесь dNTP – 2,5 мкл; праймер видовой F (1 О.Е.) - 1 мкл; праймер видовой R (1 О.Е.) – 1 мкл; ДНК-Taq-полимераза (5 Ед/мкл) – 0,3 мкл, деионизованная вода – 12,2 мкл. При этом ПЦР проводят с соблюдением режимов:- денатурация при 95°С - 5 мин (1 цикл);- затем 45 циклов амплификации, включающих: денатурацию при 95°С - 10 с, отжиг при 60°С - 10 с, синтез при 72°С - 30 с;- дополнительный блок «Melt curve» при температурном режиме 60 – 90°С - 10 мин (1 цикл), дискретность 0,5°С/10 с;- хранение при 10°С.Изобретение может быль использовано при молекулярно-генетической диагностике возбудителей дирофиляриоза, а также для межвидовой дифференциации видов Dirofilaria repens и Dirofilaria immitis. Технический результат предлагаемого изобретения заключается в достоверном выявлении видов возбудителей дирофиляриоза D. repens и D. Immitis. 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и направлено на хранение образцов ДНК-содержащего растительного материала. Способ хранения ДНК-содержащего растительного материала предусматривает приготовление гомогената растительного сырья с использованием буферного раствора из расчета 75 мкл буферного раствора на 10 мг ткани. Гомогенат наносят на бумажный носитель, пропитанный тем же буферным раствором, и высушивают при комнатной температуре. При этом буферный раствор состоит из 0,5-4% N-лаурилсаркозина, 5-20 мМ ЭДТА, 30-200 мМ Трис(гидроксиметил)аминометана и вода - остальное. Предлагаемый способ хранения ДНК-содержащего растительного материала позволяет сохранять ДНК длительное время, не требует особых условий для хранения, может быть использован для создания ДНК-банков растений. 2 ил., 3 табл., 3 пр.
Группа изобретений относится к области биохимии. Предложены композиции для сбора и хранения ДНК или ДНК-содержащих биологических следов (варианты), а также средство для пропитки гигроскопичных материалов-носителей и осуществления смывов ДНК-содержащих биологических следов, наложений или ДНК с целью их хранения и/или транспортировки, где данное средство представляет собой вышеуказанные композиции. Причём композиции включают 1-40 мΜ Трис (гидроксиметил) аминометан, 0,05-1% об. Твин 20, 0,05-1% об. Тритон Х-100, 1-200 мМ K2SO4, 1-200 мМ KCl, 0,01-0,5 мМ ЭДТА, 1-20% глицерин, 0,01-0,4% NaN3 и воду. Изобретения обеспечивают стабильность ДНК биологических образцов в широком диапазоне температур в течение длительных периодов времени. 5 н. и 21 з.п. ф-лы, ил.,0 табл., 6 пр.
Группа изобретений относится к биотехнологии, а именно к буферным жидким композициям, предназначенным для хранения препаратов ДНК в жидком виде, а также для пропитки пористых носителей, используемых для сбора и хранения биологического материала. Композиции включают 0,5-4% N-лаурилсаркозина, 5-20 мМ ЭДТА, 30-200 мМ Трис (гидроксиметил) аминометана, 0,04-0,4% NaN3, а также эффективное количество антибактериального препарата и/или фунгицида, который представляет собой дифеноконазол, и воду. Антибактериальный препарат выбран из пефлоксацина, офлоксацина и кларитромицина. Композиции обладают усиленным противомикробным действием, не вызывают потерю композицией ДНК стабилизирующих свойств на протяжении 15, 30 и 60 минут инкубирования при +80°С по сравнению с водными растворами противомикробных препаратов с аналогичной концентрацией. 5 н. и 25 з.п. ф-лы, 5 ил., 8 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для хранения препаратов ДНК в жидком виде. Получают композицию, содержащую буферный раствор, включающий 0,5-4% N-лаурилсаркозина, 5-20 мМ ЭДТА, 30-200 мМ Трис (гидроксиметил) аминометана и воду - остальное. Варианты композиции могут содержать 0,04-0,4% NaN3 (азида натрия) вместо Трис либо совместно с ним. Полученные композиции применяют для пропитки пористых носителей для хранения и/или транспортировки ДНК-содержащих препаратов или ДНК. Изобретение обеспечивает стабильность ДНК биообразцов в широком диапазоне температур в течение длительных периодов времени. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл., 4 пр.
