Патенты автора Белякова Анастасия Сергеевна (RU)
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для моделирования BLV-инфекции у экспериментальных животных. Осуществляют внутрибрюшинное введение 5-6-месячным крысам линии Wistar свежеприготовленной фракции мононуклеаров крови BLV-инфицированного крупного рогатого скота. Свежеполученную стерильную стабилизированную К3 ЭДТА цельную кровь BLV-инфицированного крупного рогатого скота центрифугируют на 1000 об/мин при 25°С в течение 10 минут. Образовавшееся между плазмой и эритроцитами кольцо мононуклеаров отбирают стерильным шприцем, разводят стерильным физиологическим раствором по стандарту мутности МакФарланда (R092B стандарт 1 ед) и вводят крысам двукратно с интервалом 1 неделя в объеме 0,5 мл. Контроль заражения осуществляют методом ПЦР с кровью экспериментальных животных. Способ обеспечивает возможность малоинвазивного, быстро воспроизводимого, высокоэффективного, легко контролируемого моделирования BLV-инфекции у крыс за счет получения биологически чистого концентрата, содержащего инфекционную форму возбудителя энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, и применения его для моделирования BLV-инфекции у лабораторных животных с последующим контролем заражения. 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярной биологии, молекулярно-генетической диагностики вирусных болезней животных. Описан способ выявления ДНК провируса лейкоза и иммунодефицита крупного рогатого скота методом мультиплексной ПЦР. Также описан набор для осуществления этого способа, содержащий две пары прямых и обратных олигонуклеотидных праймеров для выявления провирусов энзоотического лейкоза и иммунодефицита крупного рогатого скота. Предложенная группа изобретений может быть использована в научных исследованиях и ветеринарии. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл., 2 пр.
Изобретения относятся к области биотехнологии и касаются набора синтетических олигонуклеотидных праймеров и способа его использования. Представленный набор включает две пары праймеров, имеющих следующую структуру - FIV F: 5′-AAGAGTCCCAAATATGCCATAGG-3′ и FIV R: 5′-TCCATCCAAATTGCTACTGTTC-3′; FeLV F: 5′-GAATAAACCTCTTGCTGTTTGC-3′ и FeLV R: 5′-AATCAGATCGAATGACAGAGACAC-3′. Представленные праймеры не содержат полиндромные повторы нуклеотидов, не образуют выраженные вторичные структуры и не имеют протяженных G-C участков, а температуру отжига имеют 55°C для обеих пар олигонуклеотидов. Охарактеризованный способ включает подготовку реакционной смеси путем смешения буфера 10-кратного для ПЦР - 2,5 мкл, дНТФ (25 мМ) - 0,4 мкл, праймеров FIV F, FIV R, FeLV F и FeLV R (15 пмоль/мкл) по 1 мкл, Taq полимеразы (5 ед./мкл) - 0,2 мкл, MgCl2 (50 мМ) - 1,5 мкл, бидистиллированной воды - 11,4 мкл и пробы ДНК - 5 мкл, при этом амплификацию проводят в следующем режиме: тотальная денатурация 95°C - 3 мин, цикл денатурация (95°C - 20 или 60 сек) - отжиг (55°C - 20 или 60 сек) - элонгация (72°C - 40 или 60 сек), причем цикл денатурация-отжиг-элонгация повторяется 35 раз, заключительная элонгация 72°C - 5 мин, хранение 4°C - 10 мин, а детекция полученных результатов осуществляется методом электрофореза в 1,5%-ном агарозном геле. По наличию или отсутствию амплифицируемых фрагментов нуклеотидных последовательностей длиной 397 п.н. для FIV (feline immunodeficiency virus) и 221 п.н. для FeLV (feline leukemia virus) судят о наличии или отсутствии вирусов в организме кошки. Изобретения могут быть использованы в научных исследованиях для обнаружения генетического материала вирусов иммунодефицита - FIV и лейкемии FeLV кошек методом мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в крови животных. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл.
