Патенты автора Пешкова Юлия Игоревна (RU)
Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии и биохимии, и предназначено для получения антимикробных пептидов. Для получения антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней осуществляют следующие сбор свежей крови кур в пластиковые контейнеры с добавлением 3,8% раствора цитрата натрия (рН 3,5). Центрифугируют собранную кровь при 250 g в течение 30 минут. Полученный супернатант центрифугируют при 1000 g 30 минут. Полученные осажденные тромбоциты отмывают трижды средой 199 с добавлением 3,8% цитрата натрия. Отмытую тромбоцитарную массу ресуспендируют в 10%-ной уксусной кислоте и выдерживают при -15…-20°С в течение 24 часов. Размораживают и центрифугируют полученный экстракт при 1000 g в течение 40 минут. Высаживают антимикробные вещества из полученного супернатанта охлажденным ацетоном в соотношении 1:7 (объем/объем) в течение 12 часов при 4°С. Центрифугируют осадок при 6000 g в течение 10 минут, высушивают на воздухе при интенсивном перемешивании и измельчают. Обессоливают полученный ацетоновый осадок путем обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) в ступенчатом градиенте увеличения концентрации 80% водного ацетонитрила в 0,1% водной трифторуксусной кислоте (ТФУ) до значения 75%. После элюции с колонки подупаривают суммарный экстракт от избыточного содержания ацетонитрила на вакуумной центрифуге с последующей лиофилизацией. Перерастворяют высушенный обессоленный экстракт в 0,1% ТФУ и разделяют методом аналитической ОФ-ВЭЖХ в линейном градиенте повышения концентрации водного ацетонитрила в водной ТФУ от 8 до 40% (основной) и 40-56% (дополнительный). Собирают и лиофилизируют антимикробные пептиды. Использование изобретения обеспечивает получение очищенных антимикробных пептидов из тромбоцитов курицы домашней. 2 табл., 1 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает забор исследуемого материала, посев его на селективные питательные среды, инкубирование посевов при заданных параметрах с последующей идентификацией выросших колоний. Из выросших колоний проводят выделение и идентификацию чистой культуры энтерококков до вида известными способами с последующим определением у выделенных энтерококков антикарнозиновой активности (АКрА). При этом энтерококки, не обладающие антикарнозиновой активностью (АКрА) или обладающие антикарнозиновой активностью (АКрА ) при уровне выраженности данного признака, равном или меньше 1,9 мг/мл, относятся к нормальной кишечной микрофлоре животных. Изобретение позволяет упростить способ и дифференцировать энтерококки кишечной микрофлоры на нормальную и патогенную микрофлору. 2 табл., 1 пр.
