Патенты автора Богданов Иван Владимирович (RU)
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой аллерген гороха Pis s 3 - полипептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID No 1 или последовательность, на 80% идентичную последовательности SEQ ID No 1. Аллерген гороха Pis s 3 - полипептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID No 1, может быть выделен из гороха, получен с помощью химического синтеза или технологии рекомбинантных ДНК. При этом способ выделения из природного сырья полипептида по п. 1, включает гомогенизацию семян гороха и экстракцию полипептида из семян гороха буферным раствором, осветление полученного экстракта центрифугированием, термическую обработку экстракта, диализ, последовательную ультрафильтрацию, катионообменную и высокоэффективную жидкостную хроматографии с выделением аллерген гороха Pis s 3 - полипептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID No 1. Причем аллерген гороха Pis s 3 применяетя для диагностики IgE-опосредованной пищевой аллергии на горох и для лечения IgE-опосредованной пищевой аллергии на горох, в том числе для аллерген-специфической иммунотерапии, а именно к идентификации нового пищевого аллергена, а именно аллергена гороха Pis s 3. 4 н. и 1 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению белков в Escherichia coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного пищевого аллергена гороха посевного Pisum sativum. Конструируют плазмидный вектор pET-pPsLTP для экспрессии Pis s 3 в клетках Escherichia coli в составе гибридного белка His8-TrxL-Pis s 3. Трансформируют предложенным вектором родительский штамм Escherichia coli BL21(DE3)Star, получая штамм-продуцент гибридного белка His8-TrxL-Pis s 3. Затем проводят культивирование и последующий лизис клеток штамма-продуцента, аффинную очистку гибридного белка His8-TrxL-Pis s 3 на металлохелатном носителе, расщепление гибридного белка His8-TrxL-Pis s 3 бромцианом по остатку метионина, введенному между последовательностями аллергена Pis s 3 и тиоредоксина, повторную металлохелатную хроматографию и очистку целевого пептида с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ. Изобретение позволяет получить особо чистый пищевой аллерген Pis s 3, способный связывать специфические антитела. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 4 пр.
