Патенты автора Бикетов Сергей Федорович (RU)
Изобретение относится к областям биотехнологии. Предложен набор олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченых зондов для ПЦР-РВ, который позволяет одновременно детектировать специфические для бактерий вида В. mallei фрагменты ДНК целевого гена, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID №:1, и специфические для бактерий вида В. pseudomallei фрагменты ДНК целевого гена, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID №:2. Для амплификации специфических фрагментов ДНК В. mallei ПЦР-РВ набор специфических олигонуклеотидов включает: прямой праймер - «BmF», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:3, обратный праймер - «BmR», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID№:4, флуоресцентно-меченый зонд - «Bm_FAM», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID№:7. Для амплификации специфических фрагментов ДНК В. pseudomallei ПЦР-РВ набор олигонуклеотидов включает: прямой праймер - «BpF», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:5, обратный праймер - «BpR», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:6, флуоресцентно-меченый зонд - «Вр_Су5», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ Ш№:8. Для выявления ДНК В. mallei и В. pseudomallei проводят реакцию с использованием одновременно двух пар олигонуклеотидных праймеров, гомологичных фрагментам генов SEQ ID №: 1 В. mallei и SEQ ID №: 2 В. pseudomallei, а также двух соответствующих олигонуклеотидных TaqMan зондов с флуоресцентными красителями, отличающихся спектром поглощения и эмиссии, что позволяет выявлять сигналы от различных мишеней. Заявленное изобретение позволяет в течение 2 часов с высокой специфичностью одновременно детектировать наличие возбудителя сапа - В. mallei и возбудителя мелиоидоза - В. pseudomallei - в пробах чистых культур в концентрации 100 м.к./мл. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 3 пр.
Изобретение относится к областям биотехнологии, молекулярной биологии и медицинской микробиологии. Описан набор олигонуклеотидных праймеров для реакции петлевой изотермической амплификации (LAMP), который позволяет амплифицировать специфические для бактерий вида Francisella tularensis фрагменты ДНК из целевого гена, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1. Описанный набор олигонуклеотидных праймеров включает: праймер FIP - «fopFt182-F3», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 2, праймер BIP - «fopFt182-B3», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 3, праймер F3 - «fopFt182-FIP», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 4, праймер В3 - «fopFt182-BIP», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 5. Изобретение позволяет в течение 1-2 часов с высокой специфичностью детектировать наличие возбудителя туляремии - Francisella tularensis в пробах чистых культур в концентрациях от 10-1000 мк в мл (в зависимости от штаммов). 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к областям биотехнологии, молекулярной биологии и медицинской микробиологии. Описан набор олигонуклеотидных праймеров для реакции петлевой изотермической амплификации (LAMP), который позволяет амплифицировать специфические для бактерий вида Francisella tularensis фрагменты ДНК из целевого гена, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID №1. Описанный набор олигонуклеотидных праймеров включает: праймер FIP - «Ft40», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №2, праймер BIP - «Ft40», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №3, праймер F3 - «Ft40», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №4, праймер В3 - «Ft40», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №5. Заявленное изобретение позволяет в течение 1-2 часов с высокой специфичностью детектировать наличие возбудителя туляремии - Francisella tularensis в пробах чистых культур в концентрациях от 10-1000 мк в мл (в зависимости от штаммов). 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 3 пр.
Изобретение относится к областям биотехнологии, молекулярной биологии и медицинской микробиологии. Разработан набор олигонуклеотидных праймеров для реакции петлевой изотермической амплификации (LAMP), который позволяет амплифицировать специфические для бактерий вида Francisella tularensis фрагменты ДНК из целевого гена, имеющего нуклеотидную последовательность SEQ ID №:1. Для амплификации специфических фрагментов ДНК Francisella tularensis в реакции петлевой изотермической амплификации предложен набор олигонуклеотидных праймеров, включающий: праймер FIP - «acpFt101-F3», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:2, праймер BIP - «acpFt101-В3», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:3, праймер F3 - «acpFt101-FIP», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:4, праймер В3 - «acpFt101-BIP», имеющий нуклеотидную последовательность SEQ ID №:5. Заявленное изобретение позволяет в течение 1-2 часов с высокой специфичностью детектировать наличие возбудителя туляремии - Francisella tularensis в пробах чистых культур в концентрациях от 10 до 1000 м.к. в мл (в зависимости от штаммов). 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению иммуногенного полипептида, обеспечивающего формирование иммунного ответа против инфекции, вызываемой спирохетами комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, и может быть использовано для серодиагностики клещевого боррелиоза. Рекомбинантным путем в клетках штамма бактерий Е. coli BL21(DE3)/pETdbpagNH получен слитый полипептид DBPAG, состоящий из иммуногенных доменов белков DBPA Borrelia garinii и Borrelia afzelii. Изобретение обеспечивает получение нового полипептида, перспективного для разработки новой тест-системы для диагностики Лайм боррелиоза. 5 н.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 5 пр.
Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения карбоксипептидазы В из поджелудочной железы свиней предусматривает гомогенизацию животного сырья, автолиз, экстракцию двойным объемом буферного раствора, содержащим 0,01М КH2PO4 0.001 М ZnCl2 при температуре 65°С с получением экстракта. Проводят осаждение сульфатом аммония в заданном соотношении и центрифугируют. Осадок растворяют в 0,05М трис-НCl-буфере, содержащем 0,001 М ZnCl2, фильтруют через стекловолоконный и картонный фильтры при заданных параметрах температуры. Фильтрат разводят в 0,005 М трис-НCl-буфере, содержащим 0,001 М ZnCl2, с последующей ультрафильтрацией в тангенциальном потоке на мембранном кассетном модуле из полиэфирсульфона с пределом отсечения 20 кДа и двукратной ионообменной хроматографией на клонке с UNO Shhere. Уравновешенной 0,005 М трис-НCl-буфером, содержащим 0,01 NaCl и на колонке с Macro Prep Q, уравновешенной тем же буфером. Изобретение позволяет повысить выход фермента и его активность. 2 пр.
Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в биотехнологии при получении генно-инженерных продуктов
