Патенты автора Коржевский Дмитрий Эдуардович (RU)
Изобретение относится к медико-биологическим наукам и может быть использовано в медицинской диагностике заболеваний сердечно-сосудистой системы. Способ выявления тромбоцитов на гистологических препаратах включает фиксацию препарата в 10% формалине в течение 24 ч при комнатной температуре, процедуру обезвоживания, заключение в парафин, приготовление гистологических срезов толщиной от 5 до 10 микрометров, нанесение их на адгезивные предметные стекла, депарафинизацию в ксилоле, проводку по спиртам понижающей концентрации, промывку в течение 5 мин в 3% водном растворе перекиси водорода при комнатной температуре, экспозицию в течение 5 мин в 0,01 М фосфатно-солевом буфере c рН 7,4, экспозицию препаратов с блокировочным раствором в течение 10 мин при комнатной температуре. При этом после экспозиции гистологических препаратов с блокировочным раствором, его сливают и, не промывая препараты, наносят на них смесь антител к фактору Виллебранда в концентрации 3,3-4,0 мг/л. После чего препараты размещают во влажной камере и инкубируют в термостате. Затем препараты промывают в фосфатно-солевом буфере. Промакивают стекла фильтровальной бумагой. Наносят вторичные антитела против иммуноглобулинов кролика. Размещают стекла во влажной камере и ставят их в термостат. Наносят на них рабочий раствор 3,3'-диаминобензидинтетрагидрохлорида, выдерживают, затем промывают препараты в трех сменах дистиллированной воды, обезвоживают препараты в спиртах восходящей крепости, просветляют в ксилоле и заключают в водорастворимую среду. Далее проводят световую микроскопию. При этом выявляются тромбоциты, окрашенные в коричневый цвет. Способ прост для воспроизведения, может быть использован для исследования архивного материала, хранящегося в парафиновых блоках, обработки тонких срезов. 1 пр., 1 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим гистологическим исследованиям. Предложен способ демаскирования антигенов при проведении иммуноцитохимических реакций, включающий фиксацию препарата в 10% формалине в течение 24 ч при комнатной температуре, процедуру обезвоживания, заключение в парафин, приготовление гистологических срезов толщиной от 5 до 10 мкм, нанесение их на адгезивные предметные стекла, депарафинизацию в ксилоле, проводку по спиртам понижающей концентрации, промывку в течение 5 мин в дистиллированной воде, отличающийся тем, что после промывки срезов их в течение 22 мин подвергают процедуре теплового демаскирования в 10% водном растворе тиосульфата натрия, предварительно прогретом до 45-60°С, остывшие стекла промывают дистиллированной водой, оставляют в 0,01 М фосфатно-солевом буфере с рН 7,4 на 5 мин при комнатной температуре, затем на срезы наносят блокировочный раствор на 10 мин при комнатной температуре, сливают излишек раствора и, не промывая препараты, наносят на стекла первичные антитела, после чего препараты размещают во влажной камере и инкубируют в термостате при температуре 27°С в течение 20 ч, затем промывают в трех сменах дистиллированной воды по 5 мин в каждой, после этого наносят вторичные антитела и инкубируют во влажной камере в термостате при температуре 27°С в течение 30 мин, промывают в трех сменах дистиллированной воды по 5 мин в каждой, затем наносят раствор хромогена и в течение 1-3 мин отслеживают образование окрашенного продукта гистохимической реакции под микроскопом, смывают хромоген и промывают препараты в 2-3 порциях дистиллированной воды по 5 мин в каждой, при необходимости препараты подкрашивают гистологическими красителями, обезвоживают в спиртах восходящей крепости, просветляют в ксилоле, заключают в любую не водорастворимую заключающую среду. Технический результат – повышение эффективности и промышленной безопасности способа демаскирования антигенов. 2 ил., 1 пр.
Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ определения фактора Виллебранда, включающий использование иммуногистохимии, отличающийся тем, что мазки периферической крови от животных, фиксированные 96% спиртом, после 5-минутной промывки в дистиллированной воде переносят в 3%-ный водный раствор перекиси водорода на 10 мин при комнатной температуре, затем смывают дистиллированной водой и помещают в 0,01 М фосфатно-солевой буфер с рН 7,4 на 5-10 мин, наносят 5%-ный бычий сывороточный альбумина 10 мин, на одну из областей мазка наносят первичные поликлональные кроличьи антитела к фВ, а на вторую область мазка наносят фосфатно-солевой буфер, помещают предметные стекла с мазками во влажную камеру и ставят в термостат с температурой 27°С на 24 ч, затем смывают антитела, помещают стекла в сосуд со свежей порцией буфера на 5-10 мин, наносят вторичные кроличьи антитела, ставят в термостат с температурой 27°С на 35 мин, смывают антитела и наносят рабочий раствор 3,3-диаминобензидина, в течение 1-3 мин процесс контролируют, чтобы остановить реакцию до появления неспецифического фона, затем промывают препараты в 2-3 порциях дистиллированной воды по 3-5 мин в каждой, мазки докрашивают азур-эозином по Май-Грюнвальду или по Романовскому, после обезвоживания в спиртах восходящей крепости препараты просветляют в ксилоле и заключают в полистерол, фактор Виллебранда определяют по его преципитатам черно-коричневого цвета в виде мелкой зернистости и многочисленных агглютинированных тромбоцитов. Заявленное изобретение позволяет быстро и просто определить фактор Виллебранда в крови. 3 ил., 3 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммуногистохимии, и позволяет выявлять эндотелиальные клетки на гистологических препаратах. Для этого проводится фиксация препарата, далее следует процедура обезвоживания, заключение в парафин, приготовление гистологических срезов, нанесение их на адгезивные предметные стекла, депарафинизация в ксилоле, проводка по спиртам понижающей концентрации, промывка в дистиллированной воде, тепловое демаскирование в цитратном буфере (рН=6,1), повторная промывка дистиллированной водой, экспозиция в 0,01 М фосфатно-солевом буфере (рН=7,4), экспозиция препаратов с блокировочным раствором. После экспозиции гистологических препаратов с блокировочным раствором, его сливают и, не промывая препараты, наносят на них смесь, приготовленную из равных количеств раствора антител к фактору Виллебранда в разведении 1:100, конъюгированных с флуоресцентным красителем FITC и раствора флуоресцентного ядерного красителя 7-аминоактиномицина D в разведении 1:50. После чего препараты размещают во влажной камере и инкубируют в термостате при температуре 27°С в течение 48 часов. Затем препараты промывают в трех сменах дистиллированной воды по 5 минут в каждой и заключают в водорастворимую среду. Изобретение позволяет создать более эффективный, менее затратный и более промышленно безопасный иммуногистохимический способ определения фактора Виллебранда. 2 ил., 1 табл.
Способ флуоресцентной идентификации амилоида // 2673815
Изобретение относится к медицине, а именно к области диагностики амилоидозов при помощи окрашивания гистологических образцов, и может быть использовано в патологической анатомии, цитологии, клинической лабораторной диагностике и биологии. Способ флуоресцентной идентификации амилоида для диагностики амилоидозов основан на применении для окрашивания препаратов динатриевой соли 2,7-(1-амино-4-сульфо-2-нафтилазо)флуорена. Способ не требует исключительно высокой квалификации персонала, обладает высокой степенью специфичности и обеспечивает низкую вероятность ложноположительных и ложноотрицательных результатов за счет практически полного исключения фоновой окраски тканей. 2 ил., 2 пр.
Изобретение относится к нейробиологии и медицине и может быть использовано при изучении парасимпатической и симпатической иннервации разных органов и тканей в норме и при патологии. Иммуногистохимический способ выявления симпатических и парасимпатических структур на гистологических срезах различных органов заключается в том, что на предметное стекло монтируют три последовательных серийных парафиновых среза толщиной 5-7 мкм, первый срез окрашивают маркером PGP 9.5, второй срез окрашивают маркером ТН, а третий срез окрашивают маркером Syn, затем все срезы докрашивают астровым или толуидиновым синими, а после заключения препарата в полистирол производят микрофотографирование и сравнение полученных изображений. 7 ил.
ПОКРЫТИЕ ПРЕДМЕТНЫХ СТЕКОЛ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКИХ И ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ // 2386137
Изобретение относится к общим и частным гистологическим исследованиям
