Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой питательную среду плотную для культивирования и сбора биомассы вакцинного штамма чумного микроба Y. pestis EV, включающая питательную основу; натрий хлористый; натрий фосфорнокислый 2-замещенный 12-водный; натрий сернистокислый; питьевую воду, отличающаяся тем, что в качестве питательной основы содержит ферментативный гидролизат кукурузной патоки (жидкой) и ферментативный гидролизат говяжьего мяса в соотношении 2:1, а в качестве стимулирующей добавки железо сернокислое закисное 7-водное, при следующем соотношении ингредиентов: ферментативный гидролизат кукурузной патоки (жидкой) 177,0 мл, ферментативный гидролизат говяжьего мяса 89,0 мл, натрий хлористый 5,0 г, натрий фосфорнокислый 2-замещенный 12-водный 4,0 г, натрий сернистокислый 0,4 г, железо сернокислое закисное 7-водное 0,05 г, агар микробиологический 19,0 г, питьевая вода до 1 л. Использование данной среды обеспечивает достаточное количество биомассы вакцинного штамма чумного микроба Y.pestis EV с определенным процентом живых микробных клеток. 3 пр.