Способ экстракорпоральной детоксикации организма

 

СПОСОБ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА путем использования взвеси изолированнь1х клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной , отличающийся тем, что, с .Целью повторного использования клеток печени, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,01 ,2 см , сформированные гранулы вносят в колонку, заполненную кровезаменителем, про . пускают через нее кровь, по окончании перфузсш гранулы отмывают и помещают в питательную среду для хранения.

4954 A

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (1% (11) 315Р А 61 М 1/03

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPGKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3347807/28 — 13 с (22) 05.11.81 (46) 0701.83. Бюл, Н 1 (72) В. Г. Бруслик, Г. Е. Островерхов, И. И. Шиманко, С. Г. Мусселиус и А. В. Иванов (71) 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинскйй институт им. Н. И. Пи- рогова и Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н. В. Склифосовского (53) 616.314 — 089 (088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР М 644485, кл. А 61 М 1/03, 1977. (54) (57) СПОСОБ ЭКСТРАКТ,ПОРАЛЬНОЙ

ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА путем использования взвеси изолированных клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной, о т л и ч а ю щ н и с я тем, что, с целью повторного использования клеток печени, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают в замкнутые оболочки иэ полупроницаемой мембраны объемом 1,0—

1,2 см, сформированные гранулы вносят в . колонку, заполненную кровеэаменителем, про.пускают через нее кровь, по окончании перфуэии гранулы отмывают и помещают в питательную

- среду для хранения.

54 2

Проведены операции подключения колонки с гранулами у 3 больных с отравленными

СС1 и печеночно-почечной недостаточностью.

К артериовенозному шунту подключают колонку объемом 350 мл, которую заполняют гранулами и кровезаменителем так, чтобы артериальная кровь заполняла ее снизу. Отток крови

1 10649

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии и токсикологии, и может быть использовано при лечении заболеваний и токсических поражениях печени с целью компен сации ее утраченных функций.

Известен способ экстракорпоральной детоксикации организма путем использования взвеси ! изолированных клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной (Ц.

Однако известный способ не всегда и не везде может быть использован s силу своей сложности, обязательного наличия сложного оборудования, т. е. центров, где имеются аппа- раты "искусственная ночка", перитонеального диализа. Кроме того, не всегда возможно провести вмешательство на брюпшой полости (это перитонеальный диализ), так как имеется спаечный процесс в брюшной полости, которые ограничивают возможность проведения этой . операции. Значит неритоиеальньй диализ имеет свои ограничения и не всегда может быть ,использован для лечения больных с острой печеночной недостаточностью. При использовании этих способов клеточная взвесь аллогенной печени применяется всего лишь раз и затем выбрасывается. Поэтому способ требует большого количества заготовки биологического материала и запаса клеточной взвеси.

Цель изобретения — повторное использование клеток печени.

Указанная цель достигается тем, что согласно

30 способу зкстракорноральной детоксикации организма путем использования взвеси изолированных клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают 35 в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,0 — 1,2 см, сформированные гранулы вносят в колонку, заполненную кровезаменителем, пропускают через нее кровь, по окончании перфузии гранулы отмывают 40 ц помещают в питательную среду для, хранения.

Способ осуществляют следующим образом.

Взвесь изолированных клеток печени (полученную ферментно-механическим способом)

45 разводят в среде 199 до концентрашш

2.10 (20 млн/мл), заполняют ими шприц с, точной градуировкой и системой гибких силикойовых трубок. Одновременно. проводят подготовку полупроницаемой целлофановой пленки, рассекают ее на определенпои формы квадраты, 50 которые первоначально помещают в физиологический раствор, а затем переносят в раствор диоцида 1:2000 с последующим промыванием дистиллированной водой. Участок пленки как бы надевают на конец силиконового шланга и, 55 отступив на 1 см от его конЬа, накладывают лигатуру, после чего в эту полость вводят 1 мл клеточной взвеси и, затягивая лигатуру, удаляют силиконовый шланг. Избыток пленки и шовного материала удаляют. Готовят 250 — 300 гранул и помещают их во флакон со средой 199.

Производя забор необходимого количества гранул, заполняют ими колонку, через которую проводят перфузию крови. Для этих целей вьщеляют сосуды (артерию и вену) и катетеризируют для формирования артериовенозного шунта. Колонку с граяулами подключают к шунту таким образом, чтобы артериальная кровь. в колонку поступала снизу вверх, заполняя ее на всем протяженуш, и выходила через верхнюю канюлю, которая соединяется с венозной системой. Перфузию продолжают в течение 2 ч со скоростью 100 — 120 мл/мин.

Затем колонку отключают от шунта и кровь возвращается в систему, После этого осуществляют промывку колонки и гранул и последние помещают на .1-2 сут. в среду 199. Этим самым мы создаем-.все: условия для восстановления их запасов и функций, так как они находятся в культуральной среде, где есть все необходимые метаболиты.для их восстановления и обеспечения жизнеспособности. Следовательно, клет-. ки могут восстановить свой метаболический баланс и могут быть использованы повторно для детоксикации крови. Кроме того, клетки находящиеся в гранулах (они подвергались обработке токсическими веществами), могут повышать свои детоксикационные свойства, как бы тренируясь — отрабатывая свою детоксикационную функцию. Метаболизируя многие вещества, синтезируя многие ферменты и метаболиты, клетка как бы приближена в данных условиях к объекту действия, т. е. бнологичес ким средам, и будет значительно больше влиять на процессы восстановления равновесия биологической среды, так как она находится в малых объемах Среды. Поэтому лроцессы диффузии и осмоса, улътрафильтрации будут осуществляться между гранулами- и средой значительно быстрее, чем в системе аппарата "Искусственная почка". После сохранения клеток в среде 199. нх вновь помещают в колонку, последнюю подключают. к артериовенозному шунту и проводят перфузию в течение 1,5 — 2,0 ч. Затем колонку и гранулы промывают раствором Хенкса и последние помещают в среду 199, Через

1-2 сут гранулы вновь используют для операцин детоксикации организма. Таким образом, гранулы используют 3 — 5 раз для детоксикации. крови и организма по укаэанной методике, Составитель С. Малютина

Техред Л. Иартянова Корректор Л. Патай

Редактор К. Волощук

: Тираж- 689

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 10918/4

Подписное

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3 :1064954 4 регулируют уровнем подъема колонки (40-60 ем) бельных и благоприятном влиянии проводимой, и скоростью кровотока. Перфузию проводят s операции, что оказывает существенное влияние течение 1,5 — 2,0 ч. Во время проведения опера- i на исход заболевания. . ции осуществляют клиническое наблюдение забольнымиичерез30 — 60минзаборкрови: 5 Способ найдет широкое применение в отделе-, для биохимического исследования. В результате ниях интенсивной терапии для лечения острой проведения операции установлено, что у больных печеночной недостаточности при поражениях пеулучшается общее состояние (сознание, АД, Pi, чели, использование его обеспечивает многократчастота дыхания), больные становятся контактны- ное эффективное применение взвеси изолирован. ми, отвечают на вопросы. При биохимическом 10 ных клеток печени, оказывает влияние иа контроле уменьшается концентрация токсических степень детоксицируемой и метаболической веществ на. 50 — 60% (аммиак, билирубин) и, функции изолированных клеток. Процесс обраповьппается концентрация некоторых метаболитов зования гранул позволяет успешно отделить на 20 — 40% (мочевина, холестерин). Все это . клетки от крови и предупредить анфилактичео позволяет сделать вывод о благоприятном тече - 15 кие реакции и в то же время приблизить их к нии клиннко-лабораторных тестов контроля у: объекту действия — биологическим жидкостям.