Устройство анализа кристаллических белково-липидных соединений

 

УСТРОЯСТВО ДЛЯ АНАЛИЗА КРИСТАЛЛИЧЕСКИХ БЕЛКОВО-ЛИПИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ , содержащее светонепроницаемую камеру с установленными в ней кондиционером , фотоприемником, подключенным кблоку регистрации, оптически прозрачной кюветой для исслелуемого образца и возбуждающим зондом, отличающееся тем/ что, с целью повышения правильности измерений, кювета выполнена из органического стекла, зонд выполнен из фторопласта в виде диска, укреплен на валу электродвигателя и установлен с зазором относительно стенок кюветы.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) 3(51) Д 01 t(21/70

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ ИОТНРЦТИЙ

<(21) 3284071/18-25 (22) 04.05.81 (46) 15.02.84. Бюл. 9 6 (72) В.Э.Орел (53) 535.376(088.8) (56) 1. Владимиров. .О.А. Фотохимия и люминесценция белков. М., "Наука", 1965, с.13.

2. Кислюк М.у., Бутягин 11.Ю.

О возможности исследования механической деструкции полимеров методом хемилюминесценции.-Высокомолекулярные соединения", 1967, т.9, 9 8, . с. 612 (прототип); (54 ) (57 ) УСТРОЙСТВО ДЛЯ АНАЛИЗА КРИСТАЛЛИЧЕСКИХ БЕЛКОВО-ЛИКВИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ, содержащее светонепроницаемую камеру с установленными в ней конднци- онером, фотоприемником, подключенным к блоку регистрации, оптически прозрачной кюветой для исследуемого образца и возбуждающим зондом, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения правильности измерений, кювета выполнена иэ органического стекла, зонд выполнен из фторопласта в виде диска, укреплен на валу электродвигателя и установлен с з азором относитель но стенок кюветы.

1073643

Изобретение относится к технике люминесцентного анализа кристаллических проб и может быть использовано в биологии, медицине и фармации.

Известно устройство для анализа белковых соединений, содержащее измерительную светонепроницаемую камеру, источник возбуждающего излучения, оптический тракт, термостат, поворачинающуюся кювету с исследуемым образцом, фотоприемник, "соеди- 1О ненный с блоком регистрации j1) .

Однако известное устройство не обеспечивает высокой точности измерений из-за нестабильности источника возбуждающего излучения, фоновой 15 люминесценции примесей образца и деталей установки.

Наиболее близким техническим решением к предлагаемому является устройство для определения кристалли- 2О ческих белковолипидных соединений, содержащее светонепроницаемую камеру с установленным в ней кондиционером, фотоприемником, подключенным к волоку регистрации, оптически проз- 75 рачной кюветой (из отожженного стекL ла) для исследуемого образца и возбу>кдающим зондом (в виде стеклянных шаров), имеющих механический контакт с кюветой и исследуемым образцом.

Возбуждение люминесценции проводят путем вибрации устройства )2) .

Однако известное устройство для ана лиз а кристаллических соединений харак теризуется недостаточной правильностью измерений. Недостатки устройства обусловлены тем,что в процессе вибрации стеклянные шары,измельчающие исследуемый образец, саударяются с образцом и стеклянной кюветой в стохастической последовательности и. с разной to силой, в результате чего возникают вспышки люминесценции различной интенсивности, что и снижает правильность измерений.

Целью изобретения янляется повы45 шение правильности измерений.

Укаэанная цель достигается тем, что в устройстве для анализа кристаллических белково-липидных соединений, содержащем светонепроницаемую камеру с установленными в ней кондиционером, фотоприемником, подключенным к блоку регистрации, оптически прозрачной кюветой для исследуемого образца и возбуждающим зондом, кюве- 55 та выполнена из органического стекла, а возбуждающий зонд выполнен из фторопласта в ниде диска, укреплен на валу электродвигателя и установлен с зазором относительно стенок кюветы.60

На чертеже представлена схема устройства для анализа кристаллических белконо-липидных соединений.

Устройство имеет светонепроницаемую камеру 1, электроднигатель 2 с за- 65 крепленными на его валу возбуждающим зондом 3 в виде фторопластового диска, они вставлены в кювету из органического стекла 4 и между ними засыпан исследуемый образец 5. Кроме этого, имеется электровакуумный или твердотельный фотоприемник б (c чувствительностью не хуже 10 квант/си . с ) кондиционер 7 и блок регистрации светового сигнала 8.

Устройство работает следующим образом.

При вращении электроднигателя 2 крутящий момент передается фторопластовому диску 3 и частично — далее исследуемому образцу 5, толщина которого составляет 1,5 мм. В результате трения в месте контактов фторопластового диска 3 с исследуемым образцом 5, а также кюветы из органического стекла 4 с исследуемым образ— цом 5 образуются различные слои электрических зарядон. Кроме того, в результате трибоэлектризации фтороплас" тового диска и дна кюветы из органического стекла об образец последний дополнительно поляризуется в поле образованного конденсатора с плоскопараллельными электродами из фторопласта и органического стекла. Вследствие появления на поверхностях эдектрических зарядов возникает люминесценция, которая регистрируется фотоприемником б и блоком регистрации светового сигнала 8. Кондиционер 7 поддерживает стабильную среду и температуру исследуемого образца 5 и фотоприемника 6. С помощью предложенного устройства проводился анализ кристаллических белково-липидных соединений. Для этого 1г кристаллического вещества (предварительно ныдержанного в течение двух часов в темноте) по лещали н кювету при +15 С.

Затем включали электродвигатель, производили в течение 10 с трибоэлек— тризацию образца двумя разными диэлектриками (Аторопластом и оргстеклом) на блоке регистрации и в течение

10 с измеряли величину люминесценции методом счета фотонов с помощью фотоприемника.

Для получения сравнительных данных параллельно проводился анализ белковых соединений с помощью известного устройства.

Полученные данные приведены в аблице.

Как видно из таблицы, при использовании известного устройства люминесценция регистрируется Только у кристаллов сывороточного альбумина и величина ее сравнительно невелика,в то время как использование предлагаемого устройства для анализа кристаллических белконо-липидных сое1073643

Люминесценция,измеренная предлагаемым устройством, имп/10 с

Люминесценция,измеренная известным устройством, имп/10 с

Весовое отноиение,липид/белок

Соединение.

Сывороточный альбумин

895

Триптофан

Холестерин

108322

Бегеновая кислота

5923

Холестерин +

+ альбумин

183

624

0,15

381

428

1422

384

36000

264

144

Составитель Н. Зоров

Редактор С.Тимохина Техред С.Легеза Корректор,Г.Решетник

Заказ 319/41 Тираж 823 . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 динений позволяет более точно анализировать кристаллические соединения, так как при использовании предлагаемого устройства альбумин и триптофан не светятся, а липиды наоборот имеют при этом сильное свечение.

В известном устройстве для анализа белковых соединений правильность результатов равна 5%. Описываемое устройство для анализа белково-липидных соединений позволяет получить результаты с правильностью 1,8%, т.е. предложенное устройство повышает правильность определения состава соединения на 3,2%.

Повышение правильности измерения с помощью предложенного устройства обусловлено тем, что при трибоэлектризации белка фтг ропластовый диск и органическое стекло заряжаются однополярно, а при трибоэлектризации липидов разнополярно, вследствие чего при определении белков не происходит электрического разряда и поляризации, а, следовательно, не возбуждается люминесценция. При определении липидов происходит электрический разряд и поляризация, возбуждающие мощное световое излучение. В белково-липидных соединениях интенсивность возбужденной люминесценции зависит от количества в ней .липидов.

Применение предлагаемого устройст ва анализа кристаллических белково- липидных соединений обеспечивает по сравнению с известными устройствами возможность получения с большой пра15 вильностью информации о составе соединения по предварительно составленнйм калибровочным графикам,а также экспрессное получение информации, время одного анализа менее 1 мин.

gp Кроме того, предлагаемое устройство универсально и может быть применено во многих областях народного хозяйства.