Способ выделения и очистки антибиотика альбомицина

 

Класс ЗОН, 6

Pk 111196

СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Г. В. Самсонов, А. Д. Горюнкова, С. Ф. Клих, И. Г. Морозова, А. Г. Сирота, М. П. Шестерикова и Л. В. Дмитриенко

СПОСОБ ВЪ1ДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ АНТИБИОТИКА

АЛЬБОМИЦИНА

Заявлено 4 нюня 1957 г. за Я 574327 в Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Известным промышленным способом выделения и очистки антибиотика альбомицина, полученного путем десорбции с активированного угля, на котором он был сорбирован из культуральной жидкости, удается получать препарат, содержащий около 80в/о балластных веществ, обладающий благодаря этому нежелательными пирогенными свойствами.

Предлагаемый спосоо позволяет в процессе промышленного производства альбомицина из ацетонового элюата получать апирогенный препарат с высокой активностью и значительным выходом.

Отличительная особенность способа заключается в том, что содержащийся в ацетоновом элюате альбомицин, с целью отделения его от балластных примесей, последовательно сорбируют на сульфокатионитной ионообменной смоле СДВ-З, взятой в смешанной водородноаммонийной форме, затем на той же смоле в водородной форме и, наконец, на смоле КФУ в водородной форме, после чего полученный очищенный концентрат альбомицина обрабатывают известными приемами, а ионообменные смолы регенерируют как обычно.

Способ осуществляется следующим образом.

Ацетонсвый элюат подкисляется до рН 2,3 — 2,6, 2,5",о-ной серной кислотой, фильтруется на фильтре и подается на хроматографическую колонку с сульфокатионитной смолой СДВ-3 в смешанной аммонийно-водородной форме со скоростью

100 — 120 мл см I ÷àñ. Количество элюата берется из расчета 10—

25 миллиардов единиц на 1 кг воздушносухой смолы.

Хроматографическое разделение альбомицина и сопутствующих примесей производится элюативным методом. Зона альбомицина перемещается по колонке при пропускании через колонку 0,05 н уксусно-аммонийного буферного раствора рН 5,1 — 5,3 со скоростью 40—

60 лл/см /час. На выходе из колонны сначала появляются малоокрашенные примеси, а затем выходит окрашенный раствор альбомицина (колориметрический метод анализа по железу). Пропушенный через колонку раствор альбомицина с концентрацией по железу оо.tåå

20 — 30 галглг/мл направляется на последующее концентрирование, а раствор с меньшей концентрацией по железу присоединяется к исходному ацетоновому элюату для повторной очистки.

Выход на данной стадии составляет 70 — 85%, причем 60 — 65% HBправляется на концентрирование, а

10 — 20% направляется на повторную очистку.

Раствор альбомицина после хроматографической очистки поступает на колонку со смолой СДВ-3 в водородной форме в количестве 8 — 10 л раствора на 0,1 кг воздушносухой смолы. Скорость пропускания составляет 100 — 300 м г/слРчас. Лльбомицин сорбируется полностью, элюация производится 1 н раствором аммиака со скоростью 30—

35 лгл/см /час.

Вышедший из колонки концентрированный аммиачный раствор альбомицина (темно-красного цвета) пропускается через колонку, содержашую смолу КФУ в водородной форме 60 — 100 мл/см /час B количестве одного литра аммиачного концентрата на 0,2 кг смолы. Далее колонка промывается дистиллированной водой со скоростью 40—

50 мл/см /час для полного вытеснения альбомицина.

Полученный концентрат альбомицина характеризуется удельной активностью 550000 — 700000 ед/мг, не является пирогенным и не токсичен.

Выход на данной стадии составляет 75 — 80%.

Методом лиофильной сушки из концентрата получается готовый препарат альбомицина.

Выход от культуральной жидкости с учетом потерь при сорбции на угле составляет 40 — 45%.

Предмет изобретения

Способ выделения и очистки антибиотика альбомицина из ацетонового элюата в процессе промышленного его производства, о т л ичающийся тем, что, с целью получения апирогенного препарата с высокой активностью, содержащийся в ацетоновом элюате альбомицин для отделения его от балластных примесей, последовательно сорбируют (и десорбируют соответствующими растворителями) на сульфокатионитной ионообменной смоле

СДВ-3, взятой в смешанной водородно-аммонийной форме, затем на той же смоле в водородной форме и, наконец, на смоле КФУ в водородной форме, после чего полученный очищенный концентрат альбомицина обрабатывают известными приемами, а ионообменные смолы регенерируют, как ооычно.

Отв. редактор И, В. Макаров

Стандартгиз. Подп. к печ. 15/V 1958 г. Объем 0,17 п. л. Тираж 300. Цена 25 коп.

Типография Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Неглинная, 23. Зак. 3432,