Способ получения солей канцеролитических пептидов

 

Мо 132229

Класс 12ц, 6о

12ч, 6ot

ОПИСЛНИК ИЗОЬРКткНИя

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Подписная группа М 52

И Л Кнунянц, О. В. Кильдишева и Н. Е. Голубева

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЛЕИ КАНЦЕРОЛИТИЧЕСКИХ

ПЕПТИДОВ

Заявлено 5 ноября 1959 г. за Ма 646290/23 н Комитет по лелага изобретений и открытий при Совете Министров СССР

0t it, :вковано в «Бюллетене изобретений» Л 19 за !960 г.

Группой советских авторов были синтезированы канцеролитические пептиды, содержащие остатки Х-ацил-и-ди- (2-хлорэтил) амино-DLфенилаланина («Сарколизина»), и изучено их противоопухолевое действие на животных. Было показано, что полученные препараты имели высо. кую противоопухолевую активность и в отличие от и-ди- (2-хлорзтил) амина-DL-фенилаланина нетоксичны и проявляют ббльшую избирательность действия по отношению к различным штаммам опухолей.

Однако нерастворимость пептидов и необходимость применять слишком большие дозы затрудняет их применение. Поэтому представляет интерес синтез ряда пептидов, содержащих не ациламино, как это было ранее достигнуто, а свободные аминогруппы.

Однако пептиды со свободной аминогруппой плохо сохраняются и быстро образуют соответствующие дикетопиперазины. Превращение пептидов в хлоргидраты их стабилизирует, но вследствие диссоциации, последние, хотя и медленно, также образуют дикетопиперазины.

Предложен способ получения солей канцеролитических пептидов, содержащих остаток ди-(2-хлорэтил) амино-И -фенилаланина, заключающийся в том, что, с целью повышения активности пептида, эфиры пептидов, содержащие остаток N-формил-и-ди-(2-хлорэтил) амино-DL-фенилаланина обрабатывают спиртовым раствором хлористого водорода.

С целью получения наиболее стабильных солей пептидов, дихлоргидрат, полученный по вышеописанному способу, обрабатывают ацетатом натрия, а затем метилен-бис-Р-оксинафтойной кислотой.

Соли, образованные пептидами с нелетучей метилен-бис-P-оксинафтойной кислотой, совершенно стабильны и весьма удобны для применения и хранения.

Д о I $$7gg

Способ получения солей описанных канцеролитических пептидов заключается.в удалении,формильной группы из молекулы пептида, содержащего остаток N-формил-и-ди-(2-хлорэтил) амино-01 -фенилаланина кратковременным нагреванием соответствующего пептида в 6Н спиртовом растворе НСI и последующем выделении пептида со свободной амино-группой в виде солей с органическими и минеральными кислотами.

Соответствующие реакции протекают по схемам:

НС1 (С!СЯНКА) ".ХС>>НЛСН СНС014 НР1, "+ (СIС >H4) КС Н4СН СНС ONHR

С,Н,,О 1 1

NHCHO (I) 11Н,.2HCI

СН-„СООКа метилен-бис-Р-окси-нафтойная — — — --- (С1С Н4) gNCgH4CHgCHCONHR кислота !

1 11 12 (С1С Н4) gNCgH CHgCHCONHR где R — остатки аминокислот.

Пример 1. Дихлоргидрат этилового эфира п-ди-(2-хлорэтил) амино-ЕН -фенилаланил-DL-метионина (продукт I).

1,8 г (3,6 л мол) этилового эфира N-формил-п-ди-(2-хлорэтил) амино-DL-фенилаланил-Р1 -метионина кипятят в течение 1 л ин в 20 мл 6Н спиртового раствора НСI. Растворитель отгоняют, оставляя небольшой объем, остаток выливают в эфир, выпавший осадок отфильтровывают и очищают переосаждением из спирта и эфира Получают продукт в виде неустойчивых краснеющих на воздухе гигроскопических кристаллов с т. пл. 127 — 130 (с разложением). Выход 30% от теоретического. По данным элементарного анализа.

Найдено %. C= — 44,28; H=6,33; N=7,46.

С Нз-.С14МзОзЯ. Вычислено % С= — 44,69; Н=6,14; Х=-7,32.

Пример 2. Соль этилового эфира и-ди- (2-хлорэтил) -амино-DLфенилаланил-DL-валина с метилен-бис-13-оксинафтойной кислотой (продукт 11).

1,8 г этилового эфира Х-формил-и-ди- (2-хлорэтил) амино-Р1 -фенилаланил-DL-валина кипятят в течение одной минуты с 20 лл 6Н спиртовой НСI. Растворитель удаляют, остаток обрабатывают насыщенным раствором ацетата натрия. Выделившееся основание извлекают эфиром, эфирный экстракт сушат над, сульфатом натрия. Эфир отгоняют, остаток — 1,4 г обрабатывают 0,62 г ме-.илен-бис-11-оксинафтойной кислоты в растворе абсолютного тетрагидрофурана. К образовавшемуся прозрачному раствору прибавляют 20 мл абсолютного эфира (до полноты осаждения) и выпавшую соль (продукт П) очищают переосаждением эфиром из спиртового раствора и вновь осаждают эфиром из тетрагидрофурана. желтый порошок с т. пл 113 — 114, Выход 65% от теоретического.

Результаты элементарного анализа. Найдено %: C=59,55; Н=6,08.

С Н зС14И Од. Вычислено %: С=-60,4; H=6,2. № 132229

Предмет изобретения

1. Способ получения солей канцеролитических пептидов, содержащих остаток и-ди- (2-хлорэтил) амино-DL-фенилаланина, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения активности пептида, эфиры пептидов, содержащие остаток N-формил-п-ди-(2-хлорэтил) амино-DL-фенилаланина, обрабатывают спиртовым раствором хлористого водорода.

2. Выполнение способа по п. 1, о тл и ч а ю щ е ес я тем, что, с целью получения наиболее стабильных солей пептидов, дихлоргидрат обрабатывают ацетатом натрия и метилен-бис-Р-оксинафтойной кислотой.