Способ серологической идентификации бактерий
Класс $0h, 6
СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРКТЯНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Подписная,. ругтпа М 189
Б. А. Фихман
СПОСОБ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ
БАКТЕРИЙ
:Заявлено 19 иоября 1959 г. за № 644508j81 в Комитет ио делам изобретений и открытий ири Сов»те Мииистров СССР
Оиубликоваио в «Блоллетеи» изооретеиий» № 23 ла 196(1 г
Современные методы серологнческого анализа бактерий, учитывакь щие суммарный эффект реакции антиген-антитело на большом числе клеток, нс пригодны для регистрации этой реакции на отдельных клетках, что необходимо при изучении смешанных культур, изменчивости бактерий и для идентификации возбудителей в патологическом матери але.
Предлагаемый способ позволяет проводить серологический анализ отдельных б",ктериальных клеток Сущность изобретения заключается в том, что применяется аноптральная микроскопия бактериальных клеток, обработанных гомологичной антисывороткой и иммергированных в желатиновом геле с показателем светопреломле1 ия, равным соответствующему показателю протопласта клетки. Каплю исследуемой взвеси (жидкой культуры или смыва бактериальной массы с поверхности плотной питательной среды) наносят на покровное стекло и смешивают с каплей соответствующей антисыворотки. Сразу же после смешивания покровное стекло (каплей книзу) накладывают на предметное стекло, предварительно покрытое тонким слоем (не более 0,2 л.я) желатинового геля с соответствующим показателем свстопреломлсния. Приготоьленный препарат исследуют в аноптральном микроскопе, При этом, в случае положительной реакции антиген-антитело, клетки имеют вид оптически пустых тел, окаймленных утолщенной и блестящей клеточной стенкой.
Для приготовления желатинового геля навеска сухой очищешюй желатины добавляется к определенному объему слабощелочного 0,1 М раствора NaC1 и оставляется на несколько часов до полного набухания желатины. Затем осторожным подогреванием желатину растворяют и просветляют путем кипячения с яичным белком и удаления хлопьев фильтрацией или центрифугированием расплавленной массы. После установления нейтральной реакции расплавленную >келатину разливают по пробиркам и стерилизуют дробно текучим паром. Показатель светопреломлепня находится в следующем соотношении с концентрацией желатины (в /t)1:
Концентрация желатины 1в /в) 10 15 20 25 30 35 40
Показатель светопреломле((ия
1,350 1,35b 1,366 1,374 1,382 1,390 1,397
11 р t. д >д е т и з;) б () е т с 11 ((ÿ
Корректор В. П. Фомина
Техред А. Л Сосина
Рс (автор О. Фоминых
П<1дtl h пси. 2.((-ь(I
Зак. !0877
Формат бум. 70Х108 /„
Тираж б00
ЦБТИ при Комитете ио делам изобретений и при Совете Министров СССР
Москва, Центр, М. Черкасский пер., д, Об1.1 ем 0,17 усл. и. л.
Цена 3 ко.t. открытий
2/б.
Типографии UETTI Комитета по делам изобретений и открытий
tIJliI С "IBcTc Министров СССР, Москва, Петровка, 11.
Способ серологической идентификации бактерий в живом состоянии. отличающийся тем, что, с целью регистрации реакции антпген-антитело на изолированных бгктериальных клетках, обрабатывая>т бактерии гомологичной антисывороткой, а затем иммергируют в >кслатиновом геле с показателем светопреломления, равным соответствующему показател(о протопласта клетки. и микроскопируют в ано(1тральн<)>д микроскопе.
