Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях

 

Изобретение относится к биологии и может быть использовано в медицине ветеринарии и вирусологии,Целью изобретения является повышение выхода клеток или вирусов. Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизоляционной рубашкой 2 и крьппкой 3, выполненной из стекла. Емкость 1 снабжена патрубком для подачи в нее через мембранный фильтр газовой смеси и патрубком для отбора пробы. Емкость 1 снабжена также патрубками 2Q (Л

СО)ОЭ СОВЕТСНИХ

РЕСГ)УЬЛИН (19) (11) (g1) g С 12 М 3/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ; д

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

Г10 ДЕЛАМ НЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3934466/30-13 (22) 23.07.85 (46) 07.05.87. Бюл. Ф 17 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии (72) М.Н.Комаров, Н.Б.Гуськов,В.А.Кокурин, В.И.Жестерев и Ю.Ф.Калантаенко (53) 663 . 038 (088. 8) (56) Biotechnology and Bioengineering. 1975, ХУП, р. 1467-1471.

Авторское свидетельство СССР

И 1082807, кл. С 12 М 3/00, 1982. (54) АППАРАТ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК ИЛИ ВИРУСОВ НА МИКРОНОСИТЕЛЯХ (57) Изобретение относится к биологии и может быть использовано в медицине ветеринарии и вирусологии. Целью . изобретения является повышение выхода клеток или вирусов. Аппарат содержит цилиндрическую емкость 1 с термоизоляционной рубашкой 2 и крьнп— кой 3, выполненной из стекла. Емкость

1 снабжена патрубком для подачи в нее через мембранный фильтр газовой смеси и патрубком для отбора пробы.

Емкость 1 снабжена также патрубками

13(862 для заполнения 7 и слива 8 культуральной жидкости. Аппарат содержит устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11. Барабан 9 снабжен сеткой

12, установленной íà его внутренней поверхности и зафиксированной пру.— жинйым элементом. Емкость 1 установлена на осях 14 и 15 в опорах 16 и

17 с возможностью свободного враще3 ния. Полая ось 15 соединена с патрубком 18 для загрузки микроносителей и имеет уплотнение 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состоящий из электродвигателя 20 редуктора 21 и магнитных полумуфт 22 и 23. Аппарат посредством цапф установлен на кронштейнах 25 и с помощью червячной пары переводится из горизонтального в вертикальное положение или любое промежуточное.1 з.п. ф-лы, ил.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине, ветеринарии и вирусологии.

Цель изобретения — повышение выхода клеток или вирусов. 5

На фиг. 1 схематично изображен аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях,продольный разрез; на фиг. 2 — разрез А-А на фиг. 1.

Аппарат содержит цилиндрическую емкость .1 с термоизоляционной рубашкой 2 и крышкой 3, выполненной из стекла.

Емкость 1 снабжена патрубком 4 для подачи в нее через мембранный фильтр-аэратор 5 газовой смеси,патрубком 6 для отбора пробы и патрубками 7 и 8 для заполнения и слива культуральной жидкости.

Аппарат содержит устройство для перемешивания культуральной жидкос- ти с микроносителями, выполненное в виде перфорированного барабана 9 с крышкой 10 и полым днищем 11.Ба,рабан 9 снабжен сеткой 12, установленной на его внутренней поверхности и фиксируемой пружинным элементом 13. Емкость 1 установлена на осях 14.и 15 в опорах 16 и 17 с возможностью свободного вращения.

Полая ось 15 соединена с патрубком

18 для загрузки микроносителей в барабан и уплотнена в отверстии крышки 3 посредством сальника 19. На стенке емкости 1 размещен съемный привод, состоящий из электродвигате-. ля 20 и редуктора 21, а также магнит2 ных полумуфт 22 и 23. Емкость 1 посредством цапф 24 установлена на кронштейнах 25 и может быть снабжена механизмом поворота ее и барабана на 90, содержащим червячную пару

О

26, с помощью которой можно переводить из горизонтального положения в вертикальное или любое промежуточное.

Аппарат работает следующим образом.

:В перфорированный барабан 9 вставляют сетку 12 и закрепляют ее пружинным элементом 13, затем устанавливают крышку 10 и закрепляют ее винтами. Барабан 9 помещают в емкость 1 таким образом, чтобы ось

14 входила в опору 16. В отверстие крышки 3 устанавливают полую ось

15 с патрубком 18 и уплотняют ее посредством сальника 19. Крышку 3 монтируют на емкости 1 так, чтобы полая ось t5 вошла в опору 17 и через резиновую прокладку винтами закрепляют ее на емкости 1. Патрубок 4 соединяют силиконовой трубкой с мембранным фильтром 5.На патрубки 6 — 8 и 18 надевают силиконовые трубки с пружинными зажимами. Затем аппарат помещают в автоклав и стерио лизуют 2 ч при 130 C. После охлаждения аппарата к нему подсоединяют привод и устанавливают посредством цапф на .кронштейны 25 в вертикальном положении, а в рубашку 2 подают воду от термостата с температурой

37 + 0 5оС.

1308623

При выращивании клеток емкость l через патрубок 7 заполняют на 7080 объема культуральной жидкостью.

В барабан 9 через патрубок 18 загружают микроноситель. Для прикрепления клеток к микроносителям аппарат находится в таком положении 8-16 ч, затем он с помощью червячной пары

26 переводится в горизонтальное положение . При этом микроноситель с прик-10 репленными на нем клетками опускается на сетку и удерживается внутри барабана 9. При вращении барабана 9, которое осуществляется электродвигателем 20 и редуктором 21 при помощи 15 магнитных полумуфт 22 и 23, микроноситель переходит во взвешенное состояние, перемешивается и удерживается во взвеси при частоте вращения 610 об/мин. Частота вращения регулиру-20 ется тиристорным регулятором. Контроль за процессом культивирования осуществляется путем отбора проб че рез патрубок 6. Аэрирование проводят через фильтр 5. Культуру выращивают до получения необходимой плотности клеток.

При выращивании вируса полученную

I культуру клеток заражают вирусом без смены среды. 30

Для этого через патрубок 18 вносят необходимое количество вирусосодержащего материала и культивируют при постоянном вращении.

Клетки, разрушенные в результате 35 репродукции в них вируса, отслаиваются с поверхности.микроносителя и переходят в культуральную жидкость.

Сбор вирусосодержащего материала производится через патрубок 8. 40

Для извлечения микроносителей из барабана 9 емкость 1 на 1/2 объема заполняют физиологическим раствором и при помощи червячной пары 26 переводят в.положение крышкой вниз.Мик- 45 роносители опускаются на конусную проточку крышки 10 и через полую ось 15 и патрубок 18 удаляются вместе с раствором из барабана 9.

Наличие в аппарате для культивирования клеток или вирусов на микроносителях устройства для перемешивания, выполненного в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращения и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой, а также механизма поворота емкости и барабана позволяет увеличить выход клеток илн вирусов с единицы объема, исключив механическое разрушение микроносителей, а также клеток и вирусов, использовать аппарат совместно с управляемым ферментом для промьпнленной наработки клеток или вирусов.

Ф о р м у л а изобретения

1. Аппарат для культивирования клеток или вирусов на микроносителях, содержащий герметичную цилиндрическую емкость, снабженную азратором, и устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями,- отличающийся тем,что, с целью повышения выхода клеток или вирусов, устройство для перемешивания культуральной жидкости с микроносителями вь1полнено в виде перфорированного барабана, установленного с возможностью вращения и снабженного расположенной на его внутренней поверхности сеткой,при этом микроносители размещены внутри барабана.

2. Аппарат по и. 1, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью улучшения прикрепления клеток к микроносителям, аппарат снабжен механизмом е поворота емкости и барабана на 90

1308623

Составитель Л.Смирнова

Техред Л.Сердюкова Корректор С.Черни

Редактор А.Козориз

Заказ 1774/21 Тираж 500

ВНИИПИ Государственнога комитета СССР по делам изобретений и открытий

Il3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4