Способ определения ацилпроизводных фенотиазина в биологическом материале

 

Изобретение относится к медицине и может быть применено в судебной медицине . Целью изобретения является повышение точности способа за счет отделения от аллилпроизводных фенотиазина. Разделение смеси 10-аллил и 10-ацилпроизводных фенотиазина основано на ш,елочно.м гидролизе молекул 10-ацилпроизводнь х фенотиазина при экстрагировании их эфиром при рН 13. При этом редуцированные молекулы 10-ацилпроизводных фенотиазина приобретают резко выраженные гидрофобные свойства и не реэкстрагируются из эфирной фазы 0,5н. раствором серной кислоты. 10-аллилпроизводные фенотиазина не подвергаются при этих условиях деструкции и легко реэкстрагируются из эфирной фазы 0,5н. раствором серной кислоты. Идентификация и разделение продуктов гидролиза 10-ацилпроизводных фенотиазина осуществляется методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Силуфол.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (5в 4 A 61 В 5/10

QСЕ :О@ЗНАЯ

Г4ТЫТНЪ it.Aae acXAH

БИБЛИО t л

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Г(>СУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4226604/28-14 (22) 12.03.87 (46) 30.03.89. Бюл. № 12 (71) Научно-исследовательский институт судебной медицины (72) Е. М. Саломатин и А. П. Егоров (53) 6! 5.475(088.8) (56) Пиотровский 3. К. и соавт. Химикофармацевтический журнал, 1979, № 8, с. 112. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЦИЛПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ (57) Изобретение относится к медицине и может быть применено в судебной медицине. Целью изобретения является повышение точности способа за счет отделения от аллилпроизводных фенотиазина. Разделение сме1

Изобретение относится к медицине, в частности может применяться в судебной меди ци не.

Цель изобретения — повышение точности способа путем отделения от аллилпроизводных фенотиазина.

Прилер. Берут 100 г измельченного органа (печени), заливают 100 мл воды, доводят рН до 2,0 10%-ным раствором серной кислоты и производят встряхивание

15 мин. Водную вытяжку фильтруют через слой марли, после чего орган заливают

50 мл подкисленной воды и повторяют операцию дважды. Объединенные вытяжки встряхивают с Г50 мл эфира в течение 10 мин с целью очистки от балластных веществ, после чего центрифугируют и эфирный слой отбрасывают. При этом образовавшийся сгусток на границе вода/эфир оставляют в центрифужном стакане, заливают 50 мл воды, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют. Последняя операция необходима для исключения потерь исследуемых веществ. Объединенный центри„„SU„„1468500 А1 си 10-аллил и 10-ацилпроизводных фенотиазина основано на щелочном гидролизе молекул 10-ацилпроизводных фенотиазина при экстрагировании их эфиром при рН 13. При этом редуцированные молекулы 10-ацилпроизводных фенотиазина приобретают резко выраженные гидрофобные свойства и не реэкстрагируются из эфирной фазы 0,5н. раствором серной кислоты, 10-аллилпроизводные фенотиазина не подвергаются при этих условиях деструкции и легко реэкстрагируются из эфирной фазы 0,5н. раствором серной кислоты. Идентификация и разделение продуктов гидролиза 10-ацилпроизводных фенотиазина осуществляется методом тонкослойной хроматографии на пластинах

«Сил уфол».

2 фугат подщелачивают 50%-ным раствором гидроксида натрия или калия рН=13 и выдерживают в течение 10 мин, после чего экстрагируют 150 мл эфира дважды по 10 мин.

Следует избегать интенсивного встряхивания, чтобы не допустить образования эмульсии. В случае образования эмульсии проводят центрифугирование до расслоения эмульсии. Затем осторожно во избежание образования эмульсии переливают в делительную воронку и отделяют эфирный слой, пропуская его через бумажный фильтр с безводным сульфатом натрия (3 — 4 г). При этом в эфирном слое содержатся в нативном состоянии 10-аллилпроизводные фенотиазина (аминазин, пропазин, этаперазин, дипразин, метеразин. тиоридазин, трифтазин, левомепромазин и др.), а 10-ацилпроизводные фенотиазина (нонахпазин, хлорацихин, этацизин, этмозин, фторацизин) — в форме продуктов их гидролиза. Для отделения

10-ацилпроизводных фенотиазина от 10аллилпроизводных производят реэкстракцию последних из эфирного слоя 150 мл раствора 0,5 и. серной кислоты в течение

1468500

Составитель В. Фролова

Редактор С. Лисина Техред И. Верес Корректор М. Самборская

Заказ 1289/4 Тираж 644 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

1! 3035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

15 мин, после чего эфирный слой фильтруют через безводный сульфат натрия.

Таким образом аминазий, тизерцин, пропазин, этаперазин, дипразин, динезин, мепазин, метеразин, трифтазин, тиоридазин, левомепромазин и другие аллилпроизводные фенотиазина психотропного действия переходят- в водную фазу, а продукты гидролиза нонахлазина, хлорацизина, этацизина и этмозина сердечно-сосудистого действия и фторацизина антидепрессивного действия остаются в эфирном слое. Эфирный слой взбал, тывают с подщелоченной водой для нейтрализации и удаления остатка серной кислоты из эфирной фазы. С целью идентификации продуктов гидролиза 10-ацилпроизводных фенотиазина проводят хроматографию в тонком слое силикагеля на пластинках «Силуфол» 20х20 см.

Точность известного способа определяется возможностью проведения идентификации только при наличии 30 мкг вещества в биоматериале, а для осуществления предлагаемого способа достаточно 0,05 — 0,1 мкг.

Формула изобретения

Способ определения ацилпроизводных фенотиазина в биологическом материале пу10 тем их экстрагирования, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет отделения от аллилпроизводных фенотиазина, добавляют щелочь до рН 13,0, выдерживают пробу в течение 10 мин и дважды экстрагируют эфиром, проводят реэкст15 ракцию 0,5 н. серной кислотой, при этом определяют в эфирной фазе продукты гидролиза ацилпроизводных фенотиазина, а в сернокислой фазе — аллилпроизводные фенотиазина.