Патент ссср 153776

 

Класс А 61k; 30h, 14 № 153776

СССР

„:;1=j9Щ3117 :

1 i, <ТЕ! . < 1!О! ь -1 -,

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Пг)(7|711снг< <7 г/)(/77777),X 189

М. Г. Лавров

ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ

КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ И ПТИЧЬИХ

ЭМБРИОНОВ

Звив,!< »о 22 мг!!1 79(32 г. в:1, Й 779!37 3!-76

В !«,.<И!тЕт !I

Г)»у<1!<и!<<о»

Известны питательные среды для кульгивнрования клеток, пригоговie«»I»L. lIa ос11оне белковых гидролизатов, Предлагаемая полусингетичссHFl и ит I TB.1ьн 3 я cpp. I a J,, I H куль ГH BH poB3 H HSI к71еток млеко пи 13юlцих и

ill è÷üèõ эмбрионов на основе белковых п1дролизатов более эффектliBHd, обеспс IHBает стимуляцию роста н удлинение срока переживания клетс!к, что достигается введением в состав сре;1ы 5-окси-метил-4-метилурацила, Полу интетическая сре Ia cOcTBBëÿåòñë из синтетического дополнения, г,ключаю<цего растворы витаминов и 5-оксиметил-4-метилурацила, солеЛОГО pFICTBOpa, бе.1 к01)ОГО ГII IpO, I H33 тв! и Cl 180pOTKII, В ср<. де х!ОГут ОЬ11 b

IIcп0льзованы оелковые гидролизаты, изготовленные промышленным способом.

Для приготовления среды предварительно готовят исходные растворы спите)11ческого дополнения: раствор рибофлавина, ниацина, пиридоксина, пантотената Са, холина xëoðèäa, тиамина ii мезоинозпта, раствор фолиевой кислогы, раствор 5-оксиметил-4-мстилурацила, Растворы рнбоф iaBHH3, пианина, ниридоксина, пантотената Са, xo.1HFI3 x,1oðHäà, тиамина и мезоинозита нриготолля<от следхющим ооразом.

К 10,нл димииерализованной воды приливают 2 11.7 концентрированной соляной кислоты н затем прибавляют 10 гиг рибофлавина, Если рибофлавин не растворяется до конца, раствор подогревают в кипящей Оане, Г)о растворении рнбофлалина раствор дово LIIT;LO объема 100.я.t димннерализован1гой во LoH и к нему прибавля1от навески: пиридоксина (или пиридоксаля) — 100 1;<7, пантотенат,1 Са (или пантотеновой кислогы) — 100 11г, тиамина — 100 11", пианина — -100 11г, холина хлорида —100 11г, мезоинозита -200 11г, тетрацик.<ина хлоргидрата — 20 .11г.

Гlосле полного растворения перечнсленных ве<цеств объем раствора

1оводится химически чистым глицерином до 198 .г1»7 и к нему приливаетcя 2 ги.i 1,7% раствора нистатина на (0%-ном спирте 1эгиловом), Далее раствор тщательно перемешивают.

¹ 158 76

Хранить раствор следует в светонепроницаемой посуде при температуре 15 — 20 С (срок «0;()inc f ff до 6 месяцев). Раствор можно употр(блять I(-рез 5 дней после изгсп овлепия, Раствор фолиевой кислоты !.отовят, приливал к 90 .1!л диминерализова не!Ой(Boll 1О .11.1 7,0% p3 c I Bop3 ()III(3 j)()0113T3 натрия, В !Io«f>i ч(.HII>> ю смесь вносят 100 ряя фолпевой кислоты, после растворения которой;10оавляют 20 .я. тетрациклина клоргидрата, и объсм раствора LOBO:LIIT;(0 ! 98,11.! кимическп чистым глицерином Затем к смеси приливаfoT 2 11.1

l,7% раствора нистатиня 113 0%-ном этаноле. после" чего тщательно перемешивают. Ус«!Ови)1 кран(lllli!, срок годности и длительность выдер>KIfB3ния и(1гед употребл(нием т3кпе жс, кяк и для предыд\ н((ГО J);I«творя, Дл)1 приг(кровле шя 1 .Ял вора 5-он«им(!1!«1-4-метилурациля в 100,И г диминерализовянной воды вносят 400 я.) 5-оке!!Метил-4-метилурацила и зятем неоольшими порц!(ями (100 -200 1!3) добавляют оикярбонат натрия, После добав.)ения ка>кдой 110f)LIHIf раствор энергично встpHxHB3101 .

Так пост;па!от до полного растворения 5-Оксимстил-4-ме!Н«) раци 13, К получен!гому ряс!Вору лсгбявл,ffO! 20 .1!г тетряциклина хлоргидратя и доводяпг;Lo об! (мя 198 дьl ким;! (ск!. чнл ым глицерином, Затем к рас гвор; при, 1 НВа) !От 2 д(л 1,7 ",.,, p cl BOpÿ l! Ii татиня ня эз аl но I(. и TILIHT(x i hfl0 ! 1е >) е м е н! и В я ю т . Х р >1 i l (! I I и (., (. p 01(I Од н О с т и I I д I I l ò(, I I> 11 o c т ь В ы де р >к к и Il (f ) ( > fIoTp(0ë("нис м 1 я ки(з >ке, K3 K il (ill I! I! III(Оп Ice! ll li bix pal cTBop(213 ВитЯ минов, J 10«IX II I IТ(Tll f(С Кя я ill f г<1 Г(., I bi I 3 I! (f и«,13 СОС! Я В«!1!ЕТС>! >1 СЕНТ ИЧС СКИ ИЗ сгс.ри«н>нь!); коз(нон(*Итон, Взя гык В еле(ую1ц! ., соотношенияк: солевой р>(створ, например, Хенк«я и.l!I )рл>1 -îl 7с) 2--; 9,1о)о lo 84,2 — 84,1%, ()(. Iновый !ИдрО«!Изя: 01 ) (О l 0 (,, «Iино> !>1 кя- - 10%, ряс I Bop рибоф.1!1 Вин>>, ll I l 3 il H flF!, Ill! f) ll. 10K ll, If!, ll >! ll i ()) « Il Гfl (. 3, КО. I fi ll3 К, !ОР ИДЯ, Tli3 XI H113 И МЕзоиноз1па --0,2о(), рял вор фолнев)й кислоты — 0,2%, раствор 5-оксимси!л-4-метилуряциля--(гг 0,4 дo 0,5%. 1<они(нтрация солевогÎ раствора заВи(IIT от изб f)3 H llhix концепт!)3(ill it Ое.1 кОВОГО I и.!ролизята и 5-0к«If)I(TH,14->IBTlf,)) ря ци«! l. Л нтиб 1 Kl (.pH 3«I 1>II I 1(B«I II 3«TB3, LO()3 13,1)I foT K срс де В 0(i1цепринятык концентрациях. (зСЛ11 ПитатЕЛЬНаЯ СРС ДЯ ПРЕДНЯЗНЯЧаЕтСЯ ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПЯратов с дальнейшим ик введением парэнтс ральным путем, то вместо глицерина при изготовлении растворов с iczye l пользоваться диминерализоВанной водой, а после изготовления фильтровать через стеклянный бактериальный фильтр, Хранить подобные растворы рекомен;(уется при +2 С, Предмет изооретения

I J0, INC!I ÍT(ТИЧЕСК>! я I) IITBTe, Il>f 1 ÿ ÿ СРЕдЯ д«IS! 1".i ЛЬТИВИрОВЯ Н Ия K«IЕТОI( млекопитающик и пти IBIIx эмбрио!Нов, со lер>капьая белковый гидролизат, отличающаяся тем, что, с целью стимуляции роста и удлинения сроков переживания клеток, в нее введен 5-оксиметил-4-мети iyp3ILHл, (",оставитель С В. Пы>кев редактор Б. Л. Шнейдерман (кред А. А. Камышникова !,орре!«гор А. фомина

Поди. к в(ч. 11!I > 1-БЗ г Формат оум. 70>(101> l>к Ооъеч 0,18 изд л.

;)зказ 1-13".) Тиран(-15(> Цена 4 ко, .

1(Н1!ИП! 1 1 осударственио(.о комитета ио делам изооре(ений ii открытий CCCP

Москва. Центр, проезд (,åðîâà, дол(Кири.,>чекан тииогр:>фин отдела издательств и полиграфической промыв(ленности

Владимирского ооластного Управлении(культуры.