Патент ссср 159682

 

Подписная аруппа М 173

П. Н. Смирнов

СПОСОБ ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕВРАЩЕНИЯ ГИДРОКОРТИЗОНА

В ПРЕДНИЗОЛОН

Известны способы полярографического анализа смесей кортизона и гидрокортизона и соответствующих им дегидросоединений преднизола и преднизолона. Однако с их помощью можно анализировать лишь чистые растворы указанных стероидов, По предлагаемому способу контроля микробиологического превращения гидрокортизона в преднизолон, с целью ускорения анализа, производную полярограмму снимают непосредственно в культуральной жидкости или ее экстрактах с применением, например, каломельного полуэлемента.

Для определения концентрации преднизолона в культуральной жидкости в соответствии с предлагаемым способом из ферментера отбирают пробу в количестве 2 ил, смешивают ее с 3 мл диметилформамида и добавляют 0,5мл ацетатного буферного раствора (1 моль уксусной кислоты и 1 моль ацетата натрия на

1 л раствора). Часть полученной смеси переносят в электролизер, в течение 5 — 7 мин продувают азотом, а затем снимают производную полярограмму от 1,0 до 1,5 в по отношению к насыщенному каломельному полуэлементу при чувствительности гальванометра 1: 1 и напряжении от аккумулятора 2 в. Для уменьшения осцилляции полярограммы снимаются при быстром капании капилляра, что достигается увеличением высоты ртутного сто гоа до 690 — 700 мм, Температура полярографируемых растворов должна поддерживаться постоянной, например, 25 0,1 С, с помощью ультратермостата. Концентрация предннзолона в культуральной жидкости рассчитывается по предварительно построенному калпбровочному графику.

Для построения калибровочного графика точную навеску преднизолсна (9 — 10 мг) растворяют в 12,5 мл днмегилформамида, добавляют 2,5 мл ацетатного буферного раствора и 10 м.г воды. 2 мл полученного раствора переносят в электролизер и снимают производную полярограмму, как это было описано выше. Затем, добавляя последовательно по

0,5 м.г заранее приготовленной смеси 12,5 мл диметилформамида, 2,5 м,г ацетатного буферного раствора н 10 мл воды, снимают производные полярограммы еще 5 — 7 более разбавленных растворов предннзолона. При расчете концентрации преднизолона следует иметь в виду, что смесь 12,5 мл днметилформамнда, 2,5м,г ацетатного буферного раствора н 10 мл воды занимает объем 24,4 мл. По полученным данным строят калибровочный график, огкладывая по осн абсцисс концентрацшо предннзолона, а по осн ординат — высоту волны.

Присутствие гидрокортнзона и посторонних белковых соединений практически не отражается на точности определения.

Предлагаемый способ позволяет достаточно просто, быстро и с большой точностью осу№ 159682

Предмет изобретения

Составитель В, А. Таратута

Редактор Б. А. Шнейдерман Техред А, А. Камышникова Корректор P. Г. Кслембет

11одп. к печ. 27/XII — 63 г, Формат бум. 60 X 90 /з Объем 0,23 пзд. л.

Заказ 3182/9 Тираж 876 Цена 4 коп.

1НИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2 ществлять контроль микробиологического превращения гидрокортизона в преднизолон.

Способ полярографического контроля микробиологического превращения гидрокортизона в преднизолон, отличающийся тем, что, с целью ускорения анализа, производную полярограмму снимают непосредственно в культуральной жидкости или ее эстрактах с применением, например, каломельного полуэлемента при чувствительнссти гольванометра порядка 1:1 и напряжении порядка 2 в.