Ферментный датчик для определения лактозы
Изобретение относится к исследованию и анализу материалов путем определения электрохимических параметров, а именно к датчикам определения концентрации лактозы в биологических жидкостях и пищевых продуктах. Цель изобретения - повышение селективности определения путем применения биферментной мембраны, состоящей из совместно иммобилизованных глюкозооксидазы и β - галактозидазы. Это позволяет определять лактозу в пробах молока и других пищевых продуктах. 1 табл.
„„SU„„1502995
А( ((1) 4 0 О1 И 27/30
I Pj9 (ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ тозы. дуктах..(.-галактозидаза лактоза галактоза + глюкоза, глюконовая кислота + 11 0 ° ф
P ...!/,ф"i ;",ф СОЮЗ СОБЕТСКИХ ",Ф."- (СО1 1ИАЛИСТИЧЕСНИХ
1 М":» - . РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4279738/31-25 (22) 08.07.87 (46) 23.08.89. Вюл. 11 31 (71) Институт биохимии ЛН ЛитССР (72) Ю.IÎ.Êóëèñ, Б.С.Куртинайтене, В.-С.A.Ëàóðèíàâè÷þñ и С.-Г.А.Фиран, тас (53) 543.257(088.8) (56) Taylor P.I. Design construction
and application of a galactose selective electrode. Anal. Chem. 1977, v. 49, N 6.
Lactose analysis specification
sheet YSI 11ос1е1 27. — Jellow >prings
Instrument Company 1984.
Изобретение относится к исследованию и анализу материалов путем определения электрохимических параметров, конкретнее к .устройствам для определения концентрации лактозы в биологических жидкостях и пищевых прог J(h3KO3 OOK CH+a3 а глюкоза + ((В результате этих превращений образуется перекись водорода, количество которой пройорционал(но концентрации лактозы н пробе. 1<оп»честно перекиси водорода опрсд(:(яется по величине анодного тока э:l к.рохимического датчика. (=-Галакт((ила(а » глк1коэоо сидаза обладают »ск.((»;т(льной специ2 (54) ФЕРГ1ЕНТН1П1 ЛАТЧИК ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАКТ0311 (57) Изобретение относится к исследованию и анал»зу материалов путем определе((ия электрохимических параметров, а имение к датчикам определения концентраци» лактозы в биологических жидкостях и пищевь(х продуктах. Цель изобретения — повышение селективности определения путем применения биферментной мембраны, состоящей из совместно иммобилизованных глюкозооксидазы и /з-галактозндазы.
Это позволяет определять лактозу в пробах молока и других пищевых прсдуктах. 1 табл.
Целью изобретен»я является повышение селективност» определения лакУвеличение селективности осуществляется следующ((ми превращениями лак— тозы: фичностью по отношен((ю к лактозе и глюкозе. Поэтому le((электрода образуется только в пр»сутствии лактозы или глюкозы.
Использование н качестве микропор:(стой мембраны аист((тцеллюлозь(поЗВОЛстгт УВЕЛИЦi((l ;ll ;(((аЗОН ИЗМЕРЯЕМОЙ концентрации до тока от концентрации лактозы до
3,0 мМ, При измерении содержания лактозы в неразбавленных растворах в качестве внешней микропористой мембраны используют ацетатцеллюлозную пленку, коэффициент диффузии лактоэы через которую значительно уменьшен. В зависимости от степени ацетилирования целлюлозы наблюдают различный интервал линейной зависимости тока от концентрации лактозы.
Ферментная мембрана датчика сохраняет работоспособность не менее
10 дней. ф о р м у л а и э о б р е т е н и я
Концентрация лактоэы, мМ 0 0,2 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 5,0
Ток датчика, нЛ 0 16 40 84 120 160 200 240 256
Составитель Н.Рогаль
Техред М. Ходанич Корректор Т.Палий
Редактор Н.Рогулич
Подписное
Заказ 5079/54
Тираж 789
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãîðoä, ул. Гагарина, 101
3 1502995
Пример. На электрохимический датчик накладывают разделительную мембрану толщиной 5 мкм. На разделительную мембрану накладывают фермент5 ную мембрану и микропористую пленку.
Ферментную мембрану изготовляют следующим образом. К 0,25 мл 0,01 M фосфатного буферного раствора, рН
7,2, содержащего 1200 ед. глюкозооксидазы, 100 ед. Р-галактоэидазы и
107. бычьего сывороточного альбумина, добавляют 15 мкл 57.-ного глутарового альдегида (конечная концентрация реагента 0,37) и выливают на стеклянную пластинку площадью 16 см .
На датчик с мембранами наносят
2 капли буферного раствора и определяют остаточный ток. Стационарный ток электрода определяют при помощи поля- 20 рографа ОН-105. После измерения датчик осушивают фильтровальной бумагой и наносят 2 капли раствора лактоэы.
После каждого определения датчик промывают буферным раствором. Проводят измерения концентрации лактоэы в растворах, содержащих 0,2-5,0 мМ лактоэы.
Зависимость тока датчика от концентрации лактозы в растворе приве- 30 дена в таблице.
При измерении концентрации лактозы в буферных растворах предлагаемый датчик обладает линейной зависимостью
Ферментный датчик для определения лактозм, включающий платиновый анод, покрытый разделительной, ферментной и микропористой мембранами и электрод сравнения, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности определения, ферментная мембрана содержит совместно иммобиййзованные глюкоэооксидаэу и / -галактоэидаэу.
