Способ определения активности вирусного цирроза печени

 

Изобретение относится к медицине, в частности гепатологии, и касается диагностики форм активности циррозов печени. Цель - повышение точности способа. Способ позволяет достоверно диагносцировать активную и неактивную стадии цирроза печени. Способ осуществляется путем определения индекса торможения /И<SB POS="POST">т</SB>/ прилипших к стеклу лимфоцитов крови, инкубированных с HB<SB POS="POST">C</SB>AG по сравнению с прилипшими лимфоцитами, неинкубированными с HB<SB POS="POST">C</SB>AG, и при И<SB POS="POST">т</SB> равном или выше 30% диагносцируют активную стадию циррозов печени, а при более низком И<SB POS="POST">т</SB> - неактивную форму болезни. Метод прост и имеет важное медико-социальное значение, так как позволяет своевременно диагносцировать форму активности циррозов печени и тем самым проводить более обоснованную эффективную терапию больных. Точность возрастает на 50%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 (21) 4376554/30-14 (22) 15.02.88 (46) 23.10.90. Бюл. hh 39 (71) Рижский медицинский институт (72) А.Ф.Блюгер, Х.M,Âåêñëåð, Н,А.Осна и

Г.И.Силонова (53) 615.375 (088.8) . (56) Блюгер А.Ф., Новицкий И.Н. Практическая гепатология. — Рига.; Звайгзне, 1985, с. 621. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ВИРУСНОГО ЦИРРОЗА ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности гепатологии, и касается диагностики форм активности циррозов печени, Цель — повышение точности способа, СпоИзобретение относится к медицине, касается области гепатологии, в частности вопроса диагностики активной и неактивной формы цирроза печени.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом, Из крови больных в градиенте плотности фиколл-верографина выделяют лимфоциты, Наносят на ограниченную восковым мелком часть предметного стекла 0,01 мл лимфоцитов в концентрации 1,5- 2,5 10 кл./мл,добавля5 ют0,01 мл Н BsAg в концентрации 8 — 12 мкг/мл по белку(в контроле — 0,01 физиалагического раствора), инкубируют смесь 1,5 ч во влажной камере при 37ОС, неприлипшие клетки удаляют переварачиванием стекла, созданием висячей капли (на 20 мин) с последующим отсасыванием ее и отмыванием, прилипшие клетки фиксируют, окрашивают, „„ Ы„„1601583 А1 соб позволяет достоверно диагностировать активную и неактивную стадии цирроза печени. Способ осуществляется путем определения индекса торможения (И,) прилипших к стеклу лимфоцитов крови, инкубированных с HBsAg по сравнению с прилипшими лимфоцитами, неинкубированными с

HBsAg, и при Nr. равном или выше 30%, диагностируют активную стадию циррозов печени, а при более низком Ит — неактивную форму болезни. Метод прост и имеет важное медико-социальное значение, так как позволяет своевременно диагностировать форму активности циррозов печени и тем самым проводить более обоснованную эффективную терапию больных. Точность возрастает на 50%, подсчитывают число прилипших клеток в опыте и контроле, рассчитывают индекс торможения Ит прилипания по формуле число клеток в контроле—

И вЂ” c o K eToK B on Te Х 100 % число клеток в контроле

При И, равном или выше 30%, диагностируют активную стадию цирроза печени, при И меньше 30% — неактивную форму цирроза печени, Был использован стандартный HBsAg. полученный генно-инженерным способам кланирования в Е,col .

Данный антиген выпускается Промышленно-зкс пери ментал ьн ым заводом И нститута органического синтеза ЛатвССР и прилагается к иммуноферментнаму набору для определения антител IgM-класса к НВ,Аа.

Важной для его применения в разработанном способе характеристикой является со1601583

Формула изобретения

Способ определения активности вирусного цирроза печени путем исследования крови, отл ича ю щи йс я тем, что, с целью повышения точности способа, из исследуемой крови выделяют лимфоциты, наносят их на предметное стекло в концентрации 1,5—

2,5 10 кл./мл, добавляют к ним KB8Ag в концентрации 8 — 12 мкг/мл, учитывают количество прилипших к стеклу клеток в реакции торможения прилипания, далее определяют индекс торможения и при индексе торможения выше или равной 30% диагностируют активную форму вирусного цирроза печени, а при индексе торможения ниже 30% — неактивную форму заболевания, 35

Предлагаемый способ осуществлен в двух вариантах: А — концентрация лимфоцитов 2,5 . 10 кл./мл, концентрация KB8Ag

12 мкг/мл, индекс торможения 30% (диагноз — активная); Б — концентрация лимфоцитов 5 10 кл,/мл, концентрация HB8Ag

25 мкгlмл, индекс торможения 10% (диагноз — неактивная форма цирроза печени).

Составитель Г. Крюкова

Редактор О. Юрковецкая Техред M.Моргентал Корректор Э.Лончакова

Заказ 3269 Тираж 511 Подписное

ВНИИПИ Государствечного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 держание белка. Разведение антигена до рабочей концентрации производится с помощью физиологического раствора, П р и мер 1. Больная Ч,,56лет, в 1979 г. перенесла ВГ-В, В дальнейшем — повышенная активность АлАТ (5 — 6 мкМ/л), гиперглобулинемия, НВВАц-емия. В течение 3 лет проведена терапия преднизолоном; А АТ, снизился до 2 мкМ/л, однако Н Вз-антигене: мия продолжалась, появились признаки перестройки в цирроз. На основании

: способа-прототипа поставлен диагноз — не,активный цирроз печени. Предлагаемый способ был осуществлен в двух вариантах: А—, :концентрация лимфоцитов 1 5 10 кл,/мл, ., концентрация НВтА08мкг/мл, индексторможе» . ния 38 ; 8 — концентрация лимфоцитое

08 10 кл/мл,концентрация НВтА08мкг/мл,, индекс торможения 17%.

Вариант А способа позволяет поставить

: диагноз активной формы цирроза печени; вариант Б — неактивной формы цирроза печени. В дальнейшем на пункционной биопсии найдена картина активного цирроза с интенсивной плазмоклеточной инфильтрацией перипортальных полей.

Только вариант А способа позволил

: правильно диагностировать активную форму цирроза печени, т.е. параметры варианта

А являютСя оптимальными для правильного осуществления способа.

Пример 2, Больной Ш„47 лет, в 1984 г, перенес ВГ-В с последующим увеличением активности АлАТ и НВВА9-емией, В 1985 г, сохранялась гепатомегалия, повышение активности размеров. С посощью способа-прототипа найдена активность АлАТ 2,0 мкМ/л, что указывает на отсутствие активности процесса.

На пункционной биопсии печени найдена картина перипортального гепатита, подгопортальные септы (перестройка в цирроз), т.е. окончательный диагноз — активная форма цирроза печени.

С помощью предлагаемого способа правильный диагноз удалось поставить только при использовании параметров варианта А, т.е. лишь параметры варианта А являются оптимальными.

Пример 3. Больной Ч„32 года; болен с 1986 г., когда впервые появилась слабость, боли в суставах, повышение АлАТ и HB8Agемия. Монотонные проявления болезни наблюдались в течение 1,5 лет. При стационарном обследовании в 1988 г. (история болезни 1966) показатели активности АлАТ

0,65 MM/n ч, что свидетельствует о неактивной форме цирроза печени.

Предлагаемый способ позволил выявить индекс торможения 12%, что также свидетельствует о неактивной форме цирроза печени.

На пункционной биопсии подтверждено отсутствие признаков активности патологического процесса, т.е. окончательный диагноз — неактивная форма цирроза печени, что совпало с данными нового способа.

Точность способа составляет 100% (по прототипу 50%),