Средство для модуляции функциональной активности естественных киллеров in viтrо

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной иммунологии. Цель изобретения - применение вазопрессина в качестве модулятора активности естественных киллеров IN VITRO как средства физиологичного для организма. Цель достигается тем, что применяют известный гормон нейрогипофиза - вазопрессин в качестве регулятора активности естественных киллеров.

СОКИ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) 01) А1 (51)5 G 01 N 33/531 ч jQ)p ;р * „ с „г ), 11

1

Ч 1; ° >DJlI ° Q

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

Н А BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ l

i(21) 4399281/30" 14 ! (22) 22.02.88 (46) 15.12.90 ° Бюл. М 46 (71) Научно-исследовательский институт онкологии им. проф. H.Н.Петрова (72) И.Г.Андрианов, А.И.Добкин, О.И.Киселев, В,Б.Окулов и В.Ф.Семиглазов (53) 615.375 (088.8) (56) Marheus P.È.Froelich С.J.

Sibbif. M.L, Bankhursc А.D., Enhancemenr

of natural cytotoxicicy by P --end6rphin,J.Immunology, 1983, v.130, Ф 4, р. 1658.

Изобретение относится к медицине, в частности. к экспериментальной иммунологии, и может быть использовано для оценки модуляции функциональной активности естественных киллеров в системе 1n vitro °

Цель изобретения — применение вазопрессина в .качестве модулятора активности естественных киллеров in

vif.го как средства физиологичного для организма и не обладающего психотропным действием.

Средство применяется следующим образом.

Выделяют мононуклеары путем центрифугирования гепаринизированной крови на градиенте плотности фиколаверографин ($ = 1,077 г/см ). Для э определения ествественной цитотоксичност)1 монокнуклеаров применяют радиометрический метод. В качестве

2 (54) СРЕДСТВО ДЛЯ МОДУЛЯЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЕСТЕСТВЕННЫХ КИЛЛЕРОВ IN VITRO (57) Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной иммунологии. Цель изобретения — применение вазопрессина в качестве модулятора активности естественных киллеров in vitro как средства физиологичного для организма. Цель достигается тем, что применяют известный гормон нейрогипофиза — вазепрессин в качестве регулятора активности естественных киллеров.

l тест-объекта используют культуру эритролейкозных клеток человека

К-562. Реакцию проводят в 96-луночных пластиковых планшетах. В калдую лунку вносят по 0,1 мл суспензии мононуклеаров, содержащих 5II 10 клеток и 0 1 мл суспензии меченных Н- ури-9 ф дином клеток К-562, содержащих 1 ° 10 клеток, Каждую пробу ставят в 5 лунках. В качестве контроля на специочность реакции служат меченные

Н-уридином клетки К-562 беэ мононуклеаров, Инкубацию проводят 4ч при 37 С, затем содержимое лунок помещают на бумажные фильтры и последовательно промывают физиологическьм раствором, 5%-ной трихлоруксусной кислотой и 96%-ным этанолом. Радиоактивность определяют на счетчике

"Beckman" (США). Высчитывают цитотоксический индекс (ЦИ) — разность

1613956

Формула изобретения

Применение вазопрессина в качестве средства для модуляции функциональной активности естественных кйллеров in vitro.

Составитель P.Ãóìåíþê

Редактор Т.Парфенова Техред M. èäbtê

Корректор А.Осауленко

Заказ 3890 Тираж 511 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 радиоактивности в опыте и контроле, выраженную в процентах от радиоактивности в контроле. Ваэопрессин добавляют из расчета 4Р10 — 4 х х 10 МЕ в лунку.

Вазопрессин в относительно высоких концентрациях 4 10 МЕ/5 10 клеток вызывает достоверное снижение активности естественных киллеров как у больных (ДЦИ = — 7,83 + 2,4; р 0,01 по сравнению с исходной величиной), так и у здоровых.. доноров (бЦИ = -7,44 +2,02; р .(0,(1), В концентрации же 4» 1О - МЕ/5 10> клеток вазопрессин достоверно стимулирует эту активность и у больных (hgH = 9,0<1,65; р < 0,01 по сравнению с исходной величиной) и у здоровых женщин (фЦИ = 9,0+2,25; p (0,01).20

Пример . Выделяли мононуклеары периферической крови больных опухолями молочной железы в зависимости от характера онкологического процесса, стадии заболевания и про- 25 веденного лечения.

Использовали вазопрессин в концентрациях, достоверно изменяющих активность естественны киллеров (соответственно 4 ° 10 t NE/5 10 кле- .

30 ток и 4 10 ME/5. 10 клеток). Иммуностимулирующий эффект вазопрессина в концентрации 4 10 + NE/5-10.- клеток был наиболее выражен у больных фиброаденоматозом I-IIa, III- é стадии рака молочной железы до лечения. Менее выраженный стимулирующий эффект этой дозы наблюдался у больных начальными стадиями рака молочной железы после комбинированного лечения и практически отсутствовал у больных III-й стадией заболевания после лучевой терапии.

Иммунодепрессивный эффект вазопрессина наиболее выражен при действии на естественные киллеры больных

III"é стадией рака молочной железы до и после лучевой терапии, в меньшей степени - на больных I u II-й стадиями до и после комбинированного лечения и практически отсутствовал у больных фиброаденоматозом.

Таким образом, использование вазопрессина в качестве регулятора активности естественных киллеров позволяет отказаться от трудносинтезируемых и дорогостоящих препаратов.