Среда для криоконсервации гамет

 

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. Целью изобретения является повышение выживаемости и оплодотворяемое™ деконсервированных гамет Среда содержит следующие компоненты, мас.%: лактоза 7,5-9,6. глицерин 2,4- 5,0, желток куриного яйца 11,5-16,7, сукцинат 2-этил-6-метил-3- оксипиридин 0.00000255-0,00255, вода до 100. Выживаемость семени 8.8±0,17 ч, оплодотворяемость 68% 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ls>)s А 01 N 1/02

ГОСУДАРСТВЕ1+1ЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4425455/15 (22) 17.05.88 (46) 15,03.91. Бюл. N 10 (71) Институт зоологии и физиологии

АН МССР (72) А.М.Гуськов, В.А.Наук, М.Г.Букарчук.

Ю.М.Казакова, Л.Д. Смирнов, К.M Дюмаев и В.И.Кузьмин (53) 636.082,453.5(088.8) (56) Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. М..

1973, с, 138.

Изобретение относится к искусственному осеменению животных, в частности к средам для разбавления и замораживания семени сельскохозяйственных животных, например быка.

Цель изобретения — повышение выживаемости и оплодотворяемости деконсервированных гамет за счет снижения накопления в семени токсичных продуктов перекисного окисления липидов.

Указанная цель достигается тем, что известная среда дополнительно содержит мембранотропный препарат антиоксидантного действия сукцинат 2-этил-6-метил-3оксипиридин (мексидол).

Пример. Для получения среды было подготовлено 5 вариантов состава (табл.1) следующим образом.

В кипяченую бидистиллированную воду вносили при 70-95 С сортветствующее количество лактозы и мексидола, растворяли и стерилизовали 10 мин на кипящей водяной бане. а затем добавляли глицерин, охлаждали до 40-45 С, растворяли желток и

„„ 4 „„1634268 А1 (54) СРЕДА ДЛЯ КРИОКОНСЕРВАЦИИ ГАМЕТ (57) Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. Целью изобретения является повышение выживаемости и оплодотворяемости деконсервированных гамет. Среда содержит следующие компоненты, мас. $: лактоза 7,5 — 9,6, глицерин 2,4-5,0; желток куриного яйца 11,5-16,7; сукцинат 2-зтил-6-метил-3оксипиридин 0,00000255-0,00255. вода до

100. Выживаемость семени 8,8 -0,17 ч, оплодотворяемость 68ф>. 3 табл. охлаждали до температуры семени. После разбавления семя криоконсервируют общепринятым методом.

Укаэанные варианты испытывали в лабораторных условиях на подвижность, выживаемость и абсолютный показатель выживаемости деконсервированных гамет быка при 38 С (табл.2).

Оптимальный состав среды следующий, мас. :

Лактоэа 8,8

Глицерин 3,8

Желток куриного яйца 11.5

Мексидол 0,0000255

Бидистиллированная

Вода До 100

Эффективность среды оценивают по подвижности, выживаемости, абсолютному показателю выживаемости, сохранности акросом деконсервированных гамет быка и содержанию малонового диальдегида (токсичного продукта перекисного окисления липидов) в замороженно-оттаянном семени (табл. 3).

1634268

25

Таблица 1

Варианты состава среды

Таблица 2

Физиологические показатели гамет в различных средах

Р<0,05

P <0,01 ххх P + 0 001

Результаты испытаний показывают, что среда на 12,5 Д повышает выживаемость деконсервированных гамет и на 29,7 снижает содержание в семени токсичных продуктов перекисного окисления липидов.

Криозащитный эффект мексидола заключается в первую очередь в ингибировании перекисного окисления липидов, которое усиливается при криоконсервации и оказывает негативное влияние на функциональную полноценность гамет. Он реагирует с перекисными радикалами липидов и гидроксильными радикалами пептидов и белков.

Кроме того. мексидол хорошо фиксируется в липидном бислое мембран: в спектре липидов, выделенных из гамет после криоконсервации, появляется характерный для него максимум поглощения при 285 нм. Концентрация диеновых коньюгатов (первичных продуктов перекисного окисления липидов, поглощающих при 230-233 нм) снижается в гаметах по сравнению с контролем на

32,2 . Таким образом, мексидол обладает высоким мембранотропным действием. Он хооошо растворим в воде. не разрушается при стерилизации кипячением,. сохраняется при комнатной температуре не менее 2 лет.

Оплодотворяемость деконсервирован5 ных гамет с использованием среды 68,0 при базовой 55,0+4,97 .

Формула изобретения

Среда для криоконсервации гамет, 10 включающая лактозу, глицерин, желток куриного яйца и воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выживаемости и оплодотворяемости деконсервированных гамет, среда дополнительно содержит

15 сукцинат 2-атил-6-метил-3-оксипиридин при следующем соотношении компонентов, мэс.g:

Лактоэа

Глицерин

Желток куриного яйца

Сукцинат 2-этил-6-метил-3-оксипиридин 0,00000255-0,00255

Бидистиллированная вода До 100

1634268

Таблица 3

Эффективность среды в сравнении с прототипом

P <0,05

Составитель И. Марченко

Техред М.Моргентал Корректор О. Кравцова

Редактор Н, Горват

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 711 Тираж 359 Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5