Способ определения стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности

 

Изобретение относится к рефлексотерапии . Цель - повышение точности выбора стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности . Для этого в плазме крови и мембранах эритроцитов определяют содержание продуктов перекисного окисления липидов и микровязкость мембран эритроцитов, затем осуществляют нелатерализованное одностороннее пробное рефлекторное воздействие на биологически активную точку ВМ 147, повторно производят указанные определения в крови и сравнивают результаты с исходными показателями и при их одновременном снижении выбирают ипсилатеральную сторону воздействия, а при одновременном повышении выбирают контрлатеральную сторону воздействия для последующей рефлексотерапии . Это позволяет повысить точность способа. § (/)

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51) 5 А 61 Н 39/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 (57) Изобретение относится к рефлексотерапии. Цель — повышение точности выбора стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности. Для этого в плазме крови и мембранах эритроцитов определяют содержание продуктов перекисного окисления липидов и микровязкость мембран эритроцитов, затем осуществляют нелатерализованное одностороннее пробное рефлекторное воздействие на биологически активную точку ВМ 147, повторно производят указанные определения в крови и сравнивают результаты с исходными показателями и при нх одновременном снижении выбирают ипсилатеральную сторону воздействия, а при одновременном повышении выбирают контрлатеральную сторону воздействия для последующей рефлексотерапии. Это позволяет повысить точность способа.

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ТННТ СССР (21) 4393205/14 (27) 16.03.88 (46) 07.04.91. Бюл. Nl 13 (71) Ростовский научно †исследовательский институт акушерства и педиатрии и Научно-исследовательский биологический институт Ростовского государственного университета им. M.À.Ñóñлова (72) М.И.Радул, В.И.Орлов, А.Б.Порошенко, Н.П.Милютина, А.А.Ананян и К.Б.Шерстнев (53) 618.5(088.8) (56) Орлов В.И. Клинико-экспериментальное обоснование диагностики и немедикаментозной терапии некоторых форм невынашивания беременности, дисс.докт.мед.наук, Ростов-на-Дону, 1987 с. 326. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТОРОНЫ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПРИ РЕФЛЕКСОТЕРАПИИ НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

У беременной, которой назначен курс рефлексотерапии, за 10-30 мин до черезкожной стимуляции берут 2-3 мл крови. из вены. Затем проводят одно" стороннее, произвольной латерализа", ции, пробное воздействие на биологически активную точку ВМ 147 любым

Л0„„1639652 А 1 черезкожным раздражителем (игла, Ф электроток, лазер) . Через 10-20 минпосле пробного воздействия производят еще раз забор крови из вены 2-3 мл.

Затем в плазме крови и мембранах эритроцитов. той и другой пробы определяют содержание первичных продуктов ПОЛдиеновых конъюгатов и конечных продуктов ПОЛ-шиффовых оснований, а также микровязкость мембран эритроцитов, и сравнивают результаты.

Кровь центрифугируют при 3000 об/мин

15 мин для отделения плазмы. Зритро1639652 циты трижды отмывают 10,0 мл трис-НС1 буфера, содержащего 150 мл NaC1 рН

7,4. Мембраны эритроцитов выделяют по Л.И.Колчинской и соавт. (1979) °

Полученный осадок мембран эритроцитов суспендируют в 2 мл 0,01 M трис-НС1 буфера.

Из плазмы и суспензии мембран эритроцитов экстрагируют липиды по мето- 10 ду E.Bligh, W.I.Dyer (1959). К 0,5 мл плазмы или суспензии мембран эритроцитов приливают 2,7 мл дистиллированнои воды, 8 мл метанола и 4 мл хлороформа при постоянном перемешивании. 15

Затем смесь экстрагируют 3 мин и приливают 4 мл хлороформа, 4 мл дистиллированной воды, помещают в холодильник и через 40 мин отбирают нижнюю фазу, представляющую собой липидный 20 экстракт плазмы или мембран эритроцитов.

В липидном экстракте определяют содержание продуктов ПОЛ.

Для определения содержания диено- 25 вых конъюгатов (Владимиров, Арчаков, 1972) 2 мл липидного экстракта плазмы или мембран эритроцитов упаривают на роторном испарителе. Оставшийся сухой осадок растворяют в 3 мл смеси мета- 30 нол-гексан (5:1) и измеряют его оптическую плотность при 233 нм. Содержание диеновых конъюгатов выражают в мкм/мг липидов и рассчитывают по формуле 35

10ExF

СхА где Е - экстинкция; — молярный коэффициент экстинкции, равный 2;1 ° 10 м см ; 40

С вЂ” разведение пробы;

А — содержание общих липидов в пробе, мг.

Для определения содержания Шиффовых оснований (Bidlack, Тарре1 1973) 45 измеряют интенсивность флуоресценции липидного экстракта плазмы или мембран эритроцитов при 440 нм, при длине волны возбуждающего света 350 нм. .В качестве, стандарта используют раст-50 вор сернокислого хинина в 0,1 н.

H S0g (1 мг/мл). Содержание Шиффовых оснований выражают в отн.ед/мг липида.

Содержание общих липидов в липидном экстракте определяют сульфованилиновым методом (Колб, Камышников, 1982). 1 мл липидного экстракта гидролизуют в концентрированной Н $04 на кипящей водяной бане 20 мин.

Гидролизат охлаждают. К 0,1 мл гидролизата приливают 2,5 мл фосфованили" нового реактива, тщательно перемешивают и оставляют на 40 мин в темноте при комнатной температуре для развития окраски. Состав фосфованилинового реактива: 4 части концентрированной К РО4. и 1 часть 0,67.-ного водного раствора ванилина., Оптическую плотность измеряют при 530 нм на спектрофотометре. Содержание общих липидов выражают в мг на 1 мл плазмы или суспензии мембран эритроцитов и рассчитывают по следующей формуле:

0,08хСхЕ

Е э где Š— экстинкция пробы;

Š— экстинкция 0,1 мл эталонного раствора липидов, содержащего 0,8 мг общих липидов/мл;

С вЂ” разведение пробы.

Для определения микровязкости мембран эритроцитов суспензию мембран эритроцитов разводят до концентрации фосфолипидов О, 1 мг/мл, содержание которых определяют по О.Д.Кушмановой, Г.М.Ивченко (1983). 0,2 мл липидного экстракта с концентрированной хлорной кислотой сжигают на песчаной бане (200 С) в течение 120 мин. Смесь охлаждают, затем к ней добавляют 0,2 мл раствора эйконогена, 0,2 мл 5Ж-ного раствора молибдата аммония и 4,2 мл дистиллированной воды. Состав раствора эйконогена: 0,5 г эйконогена, 1 r сульфита натрия, 30 г метабисульфита натрия растворяют в 500 мл дистиллированной воды. Пробы тщательно перемешивают и помещают в кипящую водяную баню на 7 мин для развития окраски. Затем пробы фотометрируют на спектрофотометре при длине волны

830 нм. Калибровочную кривую строят по стандартному раствору однозамещенного фосфата калия (4,39 г/1 л), содержащего в 1 мл раствора 1 мг, фосфора. Общую концентрацию фосфолипидов определяют по содержанию общего фосфора, умноженному на 25.

О МВМЭ судят по отношению флуоресценции мономеров и эксимеров флуоресцентного зонда пирена в суспензии мембран эритроцитов (F+/F ), так как степень эксимериэации. является чувствительным показателем микровязкости

Т

Мембраны эритроцитов

Время исследования

Плазма крови

Диеновые Шиффовы конъю- основаДиеновые конъюШиффовы основаМикровязкость гаты ия гаты ния

Исходные данные

После пробного сеанса рефлексотерапии

4 70 068 1005 5 13 1 59

7,48 2,72 17,27 7,33 2,23

Составитель В.Кузин

Техред Л.Олийнык Корректор A.Осауленко

Редактор И.Шубина

Заказ 1257 Тираж 427 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

5 163965 липидного бислоя (Владимиров, Добрецов, 1980)., В вязкой среде эксимеризация пирена уменьшается, т.е ° чем больше величина отношения Р /Р, тем

5 больше относительная микровязкость липидного бислоя, и наоборот, чем меньше величина отношения F /Ð, тем меньше микровязкость липидного бислоя,.

Конечная концентрация пирена в суспен- 10 зии мембран эритроцитов 10 мкм/мл.

Пример 1„ Беременная Р-а, диагноз: беременность 32 недели, угрожающие преждевременные роды. Резус отрицательная принадлежность крови ° Из анамнеза известно: 1 самопроизвольный аборт в 1982 r, в 24 нед., осложнившийся воспалительным процессом придатков. B 1983 r — неразвивающаяся беременность в 24 недели, в

1985 r. неразвивающаяся беременность в 15 недель ° Назначено лечение: рефлексотерапия.

Перед проведением сеанса рефлексотерапии взята кровь для определения в плазме и мембранах эритроцитов содержания продуктов ПОЛ и МВМЭ.

На внемеридианную (РМ) точку 147, расположенную справа, произведено пробное рефлекторное воздействие, 30 после чего вновь взята кровь для проведения аналогичных исследований.

Полученные результаты представлены. в таблице.

После пробного сеанса черезкожной электростимуляции (ЧЭС) справа у больиаф P-вой в плазме крови и мембранах

2 6 эритроцитов содержание продуктов ПОЛ значительно возрастает, одновременно на 40% увеличивает ся МВМЭ. Следовательно, для последующего курса рефлексотерапии необходимо изменить сторону воздействия, ЧЭС следует проводить на точку ВМ147, расположенную слева.

После курса рефлексотерапии на точку ВМ 147 слева явления угрозы прерывания прошли. Беременность закончилась рождением доношенного ребенка с нормальными массо-ростовыми показателями и оценкой по шкале Ангар 8-9 баллов.

Предлагаемый способ позволяет повысить точность способа.

Формула изобретения

Способ определения стороны воздействия при рефлексотерапии невынашивания беременности путем оценки функции плаценты после рефлекторного воздействия на точку BM-147, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повьппения точности способа, определяют в плазме крови содержание продуктов перекисного окисления липидов и величину микровязкости мембран эритроцитов до и после одностороннего воздействия и при одновременном повышении продуктов окисления липидов на 40% и более, микровязкости на 30% и более для последующей рефлексотерапии выбирают контрлатеральную сторону воздействия.