Способ получения меченных астатом-211 моноклональных антител

 

Изобретение относится к радиохимии и радиотерапии, а именно к получению меченных α₁ моноклональных антител (МКАТ), и может быть использовано в ядерной медицине для избирательной доставки чистого α₂ к опухолям при лечении раковых образований. Цель изобретения - сокращение времени введения астата в МКАТ. Осуществляется это следующим образом. Астат-211 на последней стадии выделения и очистки перегоняют непосредственно в 10^-4 моль/л раствор диэтилентриаминпентауксусной кислоты (ДТПК), содержащий в качестве окислителя персульфат натрия с концентрацией 0,05 моль/л. Общий объем смеси, имеющей рН около 7,0, не превышает 10 мкл. После перегонки смесь нагревают на водяной бане в течение 5 мин, затем охлаждают до температуры не выше 37°С. К раствору связанного в комплекс с ДТПК астата добавляют 200 мкл раствора МКАТ (типа РЯ-1) с концентрацией 1 мг/мл и выдерживают при 37,0± 0,5°C в течение 5 - 10 мин. Хроматографический анализ показывает, что астат на 28± 2 связан МКАТ. Время получения меченых астатом МКАТ сокращается в 6 раз.

Изобретение относится к радиохимии и радиотерапии, а именно к получению меченных α -излучателями моноклональных антител (МКАТ), и может быть использовано в ядерной медицине для избирательной доставки чистого α -излучателя астата-211 к опухолям при лечении раковых образований. Целью изобретения является сокращение времени получения целевого продукта. Способ осуществляют следующим образом. Астат комплексуют с диэтилентриаминпентауксусной кислотой (ДТПК) в присутствии персульфата натрия с последующей инкубацией в течение 3-5 мин в присутствии МКАТ, взятых в соотношении 1:20. Астат на конечной стадии выделения и очистки, фиксированный на серебряной фольге, перегоняют, непосредственно в 10^-4 моль/л раствор ДТПК, содержащий в качестве окислителя персульфат натрия в концентрации 0,05 моль/л. Общий объем смеси, имеющей рН приблизительно 7,0, не превышает 10 мкл. После перегонки смесь нагревают на водяной бане при 60^оС в течение 5 мин, затем охлаждают до температуры не выше 37^оС. Анализ по электромиграции в свободном электролите и хроматографически на колонке с Сефадексом G-25 показывает, что астат (Ат) полностью (почти на 100%) связывается в комплекс с ДТПА (ДТПА-Ат). К раствору комплекса ДТПА-Ат добавляют 200 мкл раствора МКАТ (типа РЯ-I) с концентрацией 1 мг/мл. При постоянном перемешивании смесь выдерживают при температуре 37,0 ± 0,5^оС в течение 5-10 мин. Хроматографический анализ полученного соединения на колонке, заполненной гелем Сефадекса G-25, при использовании в качестве элюента 0,1 М раствора хлорида натрия, показывает, то астат на 28 ±2% связан с МКАТ. Образование устойчивого продукта взаимодействия комплекса ДТПА-Ат с МКАТ подтверждают эксперименты по электромиграции в свободном электролите. Моноклональные антитела, меченные астатом по предлагаемому способу, сохраняют свою биологическую активность, которая, как показал иммунноферментный анализ, остается постоянной и через 20 ч выдержки при комнатной температуре. Установлено, что химический выход продукта взаимодействия комплекса ДТПА-Ат с МКАТ зависит от молекулярного соотношения ДТПА и МКАТ. Наиболее высокий выход меченых МКАТ достигается при соотношении ДТПА-Ат:МКАТ 1:20. П р и м е р. Очищенный астат в количестве 1 мКи переводят в 10 мкл раствора ДТПА концентрацией 10^-4 моль/л, содержащего в качестве окислителя персульфат натрия концентрацией 0,05 моль/л. Раствор имеет рН, близкий к 7. Смесь нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Затем охлаждают до температуры не выше 37^оС, добавляют МКАТ типа РЯ-I в количестве 200 мкг (молекулярное соотношение ДТПА: МКАТ 1:20) и выдерживают при температуре 37,0±0,5^оС в течение 3-5 мин. Полученный продукт очищают хроматографически на Сефадексе G-25, используя в качестве элюента 0,1 М раствор хлорида натрия. Меченые астатом-211 антитела имеют удельную активность ≈ 1,5 мкКи/мкг. Предлагаемый способ создает принципиально новые возможности для более быстрого введения астата в МКАТ. Время процесса сокращается в 6 раз (с 2 ч по прототипу до 20 мин в предлагаемом способе), что важно при работе с таким короткоживущим изотопом, как астат-211. Технология упрощается. Астат-211, существующий как истинный радиоэлемент, получается на ускорителях в ультрамикроколичествах. Это чистый α -излучатель с периодом полураспада 7,2 ч. Каждый акт его распада сопровождается испусканием α -частиц со средней энергией 6,8 МэВ. Длина их пробега в биологической ткани составляет 60 мкм. Таким образом, ионизация происходит в малом объеме и при локализации астата в опухоли окружающие ткани не будут страдать от его радиоизлучения. Моноклональное антитело к определенной опухоли селективно концентрируется в ней, увлекая с собой привязанный к ней через комплекс с ДТПА астат.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ АСТАТОМ-211 МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ путем обработки астата реагентом, инкубации его с моноклональными антителами с последующим хроматографическим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени получения целевого продукта, астат обрабатывают диэтилентриаминпентауксусной кислотой, взятой в концентрации 10^-4 моль/л, в присутствии персульфата натрия, нагревают на водяной бане в течение 3 5 мин, охлаждают и инкубируют с антителами, взятыми в молярном соотношении к диэтилтриаминпентауксусной кислоте 20 1.